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猪圆环病毒2型对小鼠淋巴细胞发育的抑制作用 被引量:2
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作者 吴斌 肖惠 +5 位作者 胡林 杨了寒 叶十一 何启盖 蔡双双 张淑君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1400-1408,共9页
猪圆环病毒2型(PCV2)是引起仔猪断奶多系统衰竭综合征的病原微生物,该病毒可以降低免疫反应引起严重的免疫抑制,直接导致体内淋巴细胞的凋亡和耗竭。为研究PCV2对发育中淋巴细胞的影响,本文以小鼠为试验模型,用免疫荧光法统计骨髓、胸... 猪圆环病毒2型(PCV2)是引起仔猪断奶多系统衰竭综合征的病原微生物,该病毒可以降低免疫反应引起严重的免疫抑制,直接导致体内淋巴细胞的凋亡和耗竭。为研究PCV2对发育中淋巴细胞的影响,本文以小鼠为试验模型,用免疫荧光法统计骨髓、胸腺、脾CD3、CD19阳性淋巴细胞数,qPCR定量分析淋巴细胞发育相关基因转录水平,MTT法检测体外培养淋巴细胞增殖能力。结果表明:(1)PCV2造成感染早期小鼠外周血淋巴细胞不同程度减少,并抑制体外培养淋巴细胞的增殖;(2)PCV2导致骨髓和脾CD19阳性B淋巴细胞极显著降低(P<0.01),并抑制淋巴细胞发育相关基因的转录;(3)PCV2对发育中淋巴细胞的凋亡也有一定促进作用。因此,PCV2抑制早期淋巴细胞的发育和促进发育中淋巴细胞凋亡可能是导致体内淋巴细胞大量耗竭的原因之一。 展开更多
关键词 PCV2 T淋巴细胞 B淋巴细胞 细胞发育
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不同剂量FSH与不同浓度PVP对母兔超数排卵效果的影响 被引量:1
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作者 杨了寒 伏彭辉 +2 位作者 刘利萍 覃振盛 卫小峰 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第3期177-180,236,共5页
为了探讨聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和促卵泡素(FSH)对母兔超数排卵效果的影响及二者的最佳组合方式,试验采用不同剂量FSH(60,100,150 IU)与不同浓度PVP(20%、30%、40%)混合后对母兔进行超数排卵处理。结果表明:FSH剂量为150 IU,PVP浓度为30%... 为了探讨聚乙烯吡咯烷酮(PVP)和促卵泡素(FSH)对母兔超数排卵效果的影响及二者的最佳组合方式,试验采用不同剂量FSH(60,100,150 IU)与不同浓度PVP(20%、30%、40%)混合后对母兔进行超数排卵处理。结果表明:FSH剂量为150 IU,PVP浓度为30%时,家兔平均排卵数(25.67个)显著优于其他组合。 展开更多
关键词 超数排卵 促卵泡素(FSH) 聚乙烯吡咯烷酮(PVP) 缓释剂
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P58IPK通过PERK/eIF2α通路调控猪圆环病毒2型所诱导的细胞自噬
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作者 杨了寒 王凯 +4 位作者 许苏童 张敏 胡林 何启盖 张淑君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期2125-2134,共10页
旨在研究猪圆环病毒2型(PCV2)感染激活的PERK/eIF2α通路是否与细胞自噬相关,以及过表达分子伴侣蛋白P58IPK在其中的作用。首先通过PERK特异性抑制剂GSK2606414和siRNA及蛋白免疫印迹检测磷酸化eIF2α(p-eIF2α)、LC3-Ⅱ和ATG5-ATG12蛋... 旨在研究猪圆环病毒2型(PCV2)感染激活的PERK/eIF2α通路是否与细胞自噬相关,以及过表达分子伴侣蛋白P58IPK在其中的作用。首先通过PERK特异性抑制剂GSK2606414和siRNA及蛋白免疫印迹检测磷酸化eIF2α(p-eIF2α)、LC3-Ⅱ和ATG5-ATG12蛋白表达,研究PCV2感染PK-15细胞24h后PERK/eIF2α通路与细胞自噬的关系;然后通过构建和瞬时转染P58IPK真核过表达质粒及蛋白免疫印迹研究过表达P58IPK对PCV2感染PK-15诱导的PERK/eIF2α通路及细胞自噬的影响。结果显示,PERK特异性抑制剂GSK2606414和siRNA干扰PERK可极显著抑制PCV2诱导的p-eIF2α(P<0.01)和LC3-Ⅱ(P<0.01)表达;而过表达P58IPK同样可以极显著下调PCV2诱导的p-eIF2α(P<0.01)、ATG5-ATG12(P<0.01)及LC3-Ⅱ(P<0.01),且能极显著下调PCV2拷贝数(P<0.01)。结果表明,PCV2感染PK-15通过激活PERK/eIF2α通路诱导细胞自噬,过表达P58IPK通过抑制PERK通路抑制PCV2诱导的细胞自噬,从而抑制病毒复制。 展开更多
关键词 P58IPK 内质网应激 细胞自噬 PERK PCV2 ATG12
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猪Beclin1基因调控伪狂犬病病毒诱导细胞自噬和凋亡的机制分析 被引量:5
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作者 胡林 南良康 +6 位作者 张敏 许苏童 杨了寒 李帅峰 王凯 刘正飞 张淑君 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1274-1281,共8页
旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感... 旨在研究伪狂犬病病毒(PRV)感染后细胞自噬和凋亡情况,进一步分析鉴定PRV感染条件下与Beclin1互作的猪宿主凋亡家族蛋白。利用免疫印迹(WB)方法检测PRV感染细胞的自噬水平;利用流式细胞术探讨凋亡水平;最后利用免疫共沉淀试验分析PRV感染PK-15细胞中Beclin1与Bcl-2和Bcl-xL的结合水平。结果显示,PRV感染导致LC3-Ⅱ的表达明显增多,而P62显著下降,且AKT(S473)磷酸化水平显著减少;其次,PRV感染诱导细胞凋亡且显著上调剪切型Caspase-9/8的表达水平;最后,免疫共沉淀结果显示PRV感染条件下Beclin1能与Bcl-2和Bcl-xL结合,但结合的水平明显降低。PRV感染诱导的细胞自噬可能依赖于PI3K-Ⅰ/AKT信号通路,PRV感染可能同时激活了线粒体凋亡途经和死亡受体途经从而诱导细胞凋亡,而PRV感染诱导的细胞自噬和细胞凋亡可能通过抑制Beclin1和Bcl-2、Bcl-xL结合而相互关联。 展开更多
关键词 PRV 细胞自噬 细胞凋亡 BECLIN1
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动物繁殖学本科教学综合性实验改革——生殖激素篇 被引量:2
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作者 伏彭辉 杨了寒 +3 位作者 刘利萍 卫小峰 王玲 周沛 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 CAS 2014年第1期108-109,共2页
为进一步提高动物繁殖学实验教学质量,加强理论基础和提升学生实践动手能力,必须对现行本科教学实验进行深层次改革。笔者以生殖激素部分的内容为突破口,创建了一个集合同期发情技术、发情鉴定技术、超数排卵技术等多项实用繁殖技术的... 为进一步提高动物繁殖学实验教学质量,加强理论基础和提升学生实践动手能力,必须对现行本科教学实验进行深层次改革。笔者以生殖激素部分的内容为突破口,创建了一个集合同期发情技术、发情鉴定技术、超数排卵技术等多项实用繁殖技术的综合性实验,并在近2年的教学实施中取得了显著的效果。本文就此综合性实验做出了详细的阐述,以望能起到抛砖引玉的作用。 展开更多
关键词 动物繁殖学 实验教学改革 生殖激素 同期发情 发情鉴定 超数排卵
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