少数民族人群无偿献血意愿及满意度调查

目的了解云南傣族自治州地区,尤其是少数民族无偿献血意愿及满意度,为当地血站更好地开展无偿献血工作提供数据支持,摸索建立适合少数民族地区的血液保障机制。方法2016年8月,采用偶遇抽样的方法,在景洪市献血屋、街头、超市随机发放调查问卷702份。结果被调查人群献血率13.9%,其中汉族、傣族、哈尼族献血率分别为17.8%,7.3%,10.0%(P<0.05)。被调查的未献血者人群中,不同民族献血意愿、献血意愿影响因素尚不具有统计学差异。73.0%被调查者表示有意愿献血。但最终未献血的原因中,44.5%表示不符合条件(少数民族52.5%vs.汉族38.7%,P<0.01)。除此之外,献血顾虑因素前3项还包括约25.9%担心感染疾病(少数民族16.7%vs.汉族32.5%,P<0.01)、22.6%对过程不放心(少数民族16.1%vs.汉族27.2%,P<0.05)。献血者满意度调查表明约50%献血者对无偿献血过程中的服务满意度评价为一般。结论进一步调研少数民族与汉族存在献血差异的原因。加大无偿献血知识宣传教育力度,营造良好社会氛围;改善无偿献血服务,从而建设稳定的献血者队伍。

中国5个地区献血人群HCV基因型分布及进化分析

目的了解国内不同地区献血人群中HCV基因型、亚型分布及系统发育情况以及不同地区人群中HCV流行病毒株。方法收集来自重庆、新疆乌鲁木齐、河南洛阳、四川绵阳和广西柳州5地无偿献血人群的抗-HCV阳性血浆标本802(人)份,采用逆转录巢式PCR对其HCV core基因片段扩增并测序;应用MEGA 6.0软件构建HCV分子进化树并对其做基因分型,用Arlequin和DNAsp软件对不同地区不同HCV基因型做群体动力学研究。采用SPSSStatistics17.0软来分析HCV基因亚型和人口统计学特征的相关性。结果 5个地区献血者抗-HCV阳性血浆标本获得HCV core基因片段成功扩增的比例为52.24%(419/892),其中重庆为47.37%(116/247)、乌鲁木齐为54.17%(104/192)、绵阳为64.35%(74/115)、洛阳为38.95%(67/172)、柳州为76.32%(58/76);所有阳性PCR产物经双向测序后均获得核苷酸序列,共检测出8个HCV基因亚型:HCV-1a 0.72%(3/419)、1b 59.90%(251/419),2a 16.95%(71/419),3a 4.53%(19/419)、3b 3.82%(16/419),6a 12.41%(52/419)、6e 0.95%(4/419)、6n 0.72%(3/419),未检测到HCV-4和5型。5地献血人群中比例较高的2种HCV基因亚型:重庆为1b 46.55%(54/116)、6a18.97%(22/52),乌鲁木齐为1b 67.62%(71/104)、2a 21.90%(22/104)、洛阳为1b 64.18%(43/67)、2a 29.85%(20/67),绵阳为1b 80.00%(60/75)、2a 10.67%(8/75),柳州为1b 41.38%(24/58)、6a 36.21%(21/58)。HCV基因亚型和年龄、民族之间有明显的差异(P<0.05)。结论本组我国5个地区献血人群HCV基因亚型丰度较高,以1b为主,2a次之,其余呈散在分布或未检出;不同地区人群的优势基因型均以1b比例为最高,其次分别是2a或6a。HCV基因亚型和年龄、民族存在相关性。

巴贝西虫实时荧光PCR检测方法初步建立及牡丹江市无偿献血者中巴贝西虫流行情况调查

目的建立一种筛查多种可感染人巴贝西虫（包括Babesia.microti,B.divergens,B.venatorum,Babesia.sp EU1,Babesia_sp._XXB/Hangzhou等）的实时荧光PCR检测方法;用实时荧光PCR和间接免疫荧光检测（IFA）2种方法分别对牡丹江市无偿献血者血样进行核酸和血清学检测,评估其对当地输血安全的风险。方法从Gen Bank下载我国可感染人巴贝西虫的18S r RNA基因序列,并根据序列共同部分设计引物,用引物验标准质粒并优化实验条件,建立实时荧光PCR检测方法。将1 971份无偿献血者的血液标本离心,使其分离成红细胞和血浆2个部分：1971份红细胞标本混样（10份/pool）,用已建立的实时荧光PCR进行核酸检测,阳性混样池再拆分检测;其中1 000份血浆标本用IFA法进行B.microti Ig G检测。结果经琼脂糖凝胶电泳和一代测序验证,标准质粒构建成功且实验条件已经优化,成功建立了实时荧光PCR检测方法,重复性良好,最低检测下限为9.69×102copies/m L;1 971份红细胞样本巴贝西虫核酸检测结果均为阴性;1 000份血浆样本B.microti Ig G血清学检测结果显示共13例阳性（阳性率1.3%）,其中8例（0.8%）滴度为1∶64,5例（0.5%）滴度为1∶128。结论本研究成功建立了一种筛查多种感染人巴贝西虫的实时荧光PCR核酸检测方法;标本检测结果显示牡丹江地区有既往B.microti感染,提示巴贝西虫已经对该地区血液安全造成一定威胁,但风险大小有待进一步评估。

人巴贝西虫数字PCR 检测方法的建立及应用

目的建立巴贝西虫数字PCR检测的有效方法,为后续巴贝西虫研究及我国血供安全评估提供技术方法储备和参考数据。方法从GenBank下载我国可感染人巴贝西虫的18S rRNA基因序列,并根据序列共同部分设计引物,建立基于巴贝西虫灵敏度高、可绝对定量的数字PCR检测方法;检测1000(人)份2016年7月19日~2016年8月24日牡丹江市采集的献血者红细胞标本。结果所建立的巴贝西虫数字PCR检测方法重复性良好,可稳定检测单拷贝数核算,应用于献血者标本数字PCR阳性检出率0.2%(2/1000),2例巴贝西虫感染者经间接免疫荧光检测(IFA)结果为阳性,初步判断为无症状感染。结论巴贝西虫数字PCR检测方法具有较高灵敏度和较好稳定性;若能应用于献血者巴贝西虫血液筛查,可减少这类无症状感染对血液安全的威胁。

荧光定量检测梅毒筛查阳性献血者中生殖器溃疡病原体的研究

目的研究梅毒筛查阳性献血者中生殖器溃疡病原体。方法收集梅毒筛查阳性献血者样本和人口地理学信息,提取核酸DNA,利用荧光定量技术检测病原体核酸。结果在1 679份样本中共发现37份梅毒DNA和33份HSV DNA阳性样品,其中HSV-1 20份,HSV-2 13份。梅毒螺旋体DNA阳性率为2.20%,HSV DNA阳性率1.97%其中HSV-1 1.19%和HSV-2 0.77%,并未发现H.ducreyi阳性样本。核酸阳性献血者多为男性,首次献血者,初中及初中以下文化程度。发现2份共感染样本。结论梅毒血液筛查不合格的献血者中存在一定感染生殖器溃疡病原体的风险应引起相关重视。

重庆市医疗机构HIV-1感染者/AIDS病人HIV-1遗传分化和耐药突变研究

目的调查重庆市医疗机构中艾滋病病毒（HIV）1型（HIV-1）感染者/艾滋病（AIDS）病人中的HIV-1基因亚型、群体动力学及耐药性。方法收集2013年12月至2016年4月重庆多家医疗机构HIV-1感染者/AIDS病人血浆,通过提取核糖核酸（RNA）、反转录、巢式聚合酶链式反应（PCR）,系统发育学和群体遗传学的方法,扩增及分析HIV基因组pol区序列,并检测耐药相关突变。结果共收集657份HIV-1感染者/AIDS病人静脉血样本,扩增及测序得到256份有效的pol基因片段,HIV基因亚型分析显示,重庆医疗机构中流行的HIV-1毒株以CRF07BC（43.8%,112份）、CRF01AE（34.8%,89份）为主要基因型;随后依次为CRF08BC（8.2%,21份）、B（3.5%,9份）、CRF5501B（2.7%,7份）、CRF6801B（0.4%,1份）和CRF86BC（0.4%,1份）。检出耐药基因突变者94例（占36.7%）,无耐药基因突变者162例（占63.3%）。不同基因亚型间,pol基因蛋白酶区和反转录酶区的基因突变位点差异无统计学意义（P〉0.05）。对优势群体CRF07BC、CRF01AE和CRF08BC的群体遗传学分析,证实重庆市医疗机构中的HIV-1部分基因型群体正在经历扩张。结论重庆市医疗机构中HIV-1病毒基因突变和重组普遍存在。HIV-1CRF07BC、CRF01AE和CRF08BC基因亚型正在经历缓慢扩张的过程。需持续研究和监控重庆地区HIV-1在感染者中的遗传分化及耐药进展。