基于生物信息学筛选宫颈癌血管生成基因及构建预后模型

利用生物信息学方法筛选与宫颈癌发生、发展和预后相关的血管生成相关基因(angiogenesis related gene,ARG),并进行相关预后风险模型的构建与验证。首先,从TCGA数据库中检索宫颈癌患者的表达谱和临床特征,并提取差异表达的ARG;其次,采用Lasso Cox回归筛选预后ARG,构建相关预后模型;再次,使用GSE52903和GSE44001数据集进行外部验证;最后,利用基因集富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)探讨宫颈癌预后机制。筛选结果显示,共获得15个预后ARG,分别为EFNA1、ITGA5、EPHB4、NRP1、CDH5、PLAU、BMP6、DLL4、JUN、CA9、MMP1、BAIAP2L1、SERPINF1、F2RL1和FGFR2。GSE52903和GSE44001数据集的Kaplan-Meier生存曲线显示,高风险组的总生存期(overall survival,OS)(P=0.005)和无病生存期(disease-free survival,DFS)(P<0.001)显著低于低风险组。受试者操作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析结果显示,GSE52903验证集在1年、3年和5年的曲线下面积(area under the curve,AUC)值分别为0.84、0.77和0.73,C-指数为0.72;GSE44001验证集在1年、3年和5年的AUC值分别为0.71、0.72和0.70,C-指数为0.70,说明该模型对患者预后具有很强的预测效能。GSEA分析富集的通路主要涉及DNA复制、细胞外基质(extracellular matrix,ECM)受体相互作用、补体和凝血级联等,这些过程与宫颈癌发生、发展紧密相关。以上结果表明,这15个关键ARG可能是宫颈癌预后潜在的生物标志物。

m6A修饰促进宫颈癌的增殖和迁移并调控PD⁃L1表达

目的:探索N6‑甲基腺嘌呤(m6A)修饰相关基因甲基转移酶14(METTL14)和YTH结构域家族蛋白1(YTHDF1)对宫颈癌细胞增殖、迁移和凋亡能力的影响,并探讨其与细胞程序性死亡‑配体1(PD‑L1)表达的相关性。方法:通过免疫组织化学技术分析METTL14、YTHDF1和PD‑L1在宫颈癌组织和正常宫颈组织中的表达水平。采用小干扰RNA(si‑RNA)敲低宫颈癌细胞中METTL14、YTHDF1基因的表达,实时荧光定量PCR(qPCR)验证敲低效果。敲低METTL14、YTHDF1后,CCK‑8实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移能力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,qPCR和蛋白质印迹法(Western blot)检测PD‑L1 mRNA和蛋白表达。结果:免疫组化结果显示,METTL14、YTHDF1和PD‑L1在宫颈癌组织中高表达。敲低METTL14和YTHDF1基因表达后,宫颈癌细胞的增殖和迁移能力明显抑制,凋亡增加,PD‑L1 mRNA和蛋白表达水平也随之下调。结论:m6A甲基化修饰可通过调控宫颈癌细胞中PD‑L1的表达来影响宫颈癌细胞的增殖、迁移和凋亡。

角鲨烯环氧酶对宫颈鳞癌细胞增殖、凋亡及迁移侵袭的影响

目的探究角鲨烯环氧酶(squalene epoxidase,SQLE)在宫颈鳞癌中的作用及其分子机制。方法首先利用GEPIA和HPA数据库分析SQLE在宫颈鳞癌与正常宫颈组织中mRNA及蛋白质表达差异,运用UALCAN数据库探讨SQLE与宫颈鳞癌临床病理特征的相关性,然后通过GEPIA数据库评估高表达SQLE mRNA的宫颈鳞癌患者的OS和DFS,最后以Siha细胞为研究对象,以siRNA抑制SQLE基因的表达及转染重组质粒促进SQLE的表达,观察SQLE基因对Siha细胞增殖、凋亡及迁移侵袭的影响,qRT-PCR法检测SQLE mRNA表达,Western blot检测Bax、Bcl-2、Vimentin、E-cadherin、PI3K、Akt、p-PI3K和p-Akt蛋白水平。结果SQLE mRNA和蛋白水平在宫颈鳞癌组织中较正常组织中高表达(P<0.05),且SQLE mRNA高表达的宫颈鳞癌患者的OS明显缩短(P<0.05)。SQLE在宫颈鳞癌StageⅣ期的表达明显高于Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期(P<0.01);SQLE在淋巴结转移N1组的表达明显高于N0组(P<0.01)。干扰SQLE能够明显抑制Siha细胞增殖、迁移侵袭及促进其凋亡(P<0.01),过表达SQLE时结果与之相反。干扰SQLE时Siha细胞Bcl-2、Vimentin、p-PI3K和p-Akt蛋白表达降低,Bax、E-cadherin蛋白表达增加,且Bcl-2/Bax比值明显减少(P<0.05,P<0.01),过表达SQLE时结果与之相反。结论SQLE在人宫颈鳞癌中高表达,SQLE可能通过调控PI3K/Akt信号通路诱导Siha细胞增殖、迁移侵袭并抑制其凋亡。

影响倒闸操作安全的行为因素及对策

变电站的安全对电力生产的安全有着至关重要的影响,倒闸操作是变电站安全生产重要的一环,关系着变电运行的安全性与经济性。文章分析了在各项规章制度严格细化的情况下,影响倒闸操作安全的"人"的行为因素,并提出针对这些不安全因素的相应对策,强调抓安全的关键是"以人为本"。

浅谈变电站有效开展事故预想

近年来,电力系统的规模愈来愈大,电压等级愈来愈高,而作为电网中枢的变电站也越来越重要。电网事故的发生将造成巨大的经济损失,影响对用户的正常供电,甚至危及人身和设备安全,事故情况下,需要值班人员迅速、准确的进行处理,隔离故障设备,限制事故的发展,尽快恢复无故障设备的运行,恢复电网运行方式和对重要负荷用户的供电。事故处理是变电站值班人员最重要的工作之一,而开展事故预想、反事故演习活动,是增强值班人员事故情况下应变能力的一种既有效又必要的手段。如何开展事故预想,则是我们值得重视和探讨的问题。

安罗替尼对宫颈癌细胞增殖和迁移与侵袭的影响及作用机制

目的 研究安罗替尼对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法 取对数生长期宫颈癌SiHa细胞,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)实验根据半数抑制浓度(IC50)确定安罗替尼实验浓度,将SiHa细胞分为对照组(0μmol/L)、低浓度组(5μmol/L)、中浓度组(10μmol/L)、高浓度组(20μmol/L)。以平板克隆实验、细胞划痕实验和Transwell侵袭实验检测安罗替尼对SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的影响。以Western blot法检测血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMP)-9、上皮钙黏附素(E-cadherin)、无翅型MMTV整合位点家族成员1(Wnt1)和β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。结果 CCK-8实验显示安罗替尼能够剂量依赖性抑制SiHa细胞的增殖,作用24、48和72 h的IC50分别为(26.96±2.25)、(13.59±1.13)和(9.27±0.75)μmol/L。平板克隆实验显示,处理SiHa细胞48 h后,对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组细胞克隆形成率分别为(62.05±7.88)%、(39.96±5.10)%、(24.02±4.98)%和(15.14±3.03)%。与对照组相比,低、中、高浓度组SiHa细胞克隆率显著降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。随着药物剂量的增加,SiHa细胞克隆率也逐渐减小,具有剂量依赖性,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验显示,对照组、低浓度组、中浓度组细胞迁移率分别为(72.03±5.40)%、(56.98±6.55)%和(41.33±7.02)%。与对照组相比,低浓度组、中浓度组SiHa细胞迁移率显著下降,差异均有统计学意义(P均<0.05),随着药物剂量的增加,SiHa细胞迁移率也逐渐减小,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell细胞侵袭实验结果显示,对照组、低浓度组、中浓度组和高浓度组侵袭细胞数分别为(180±10)、(125±10)、(78±8)和(30±5)个,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,低浓度组和高浓度组的E-cadherin蛋白表达升高,VEGF、MMP-9、Wnt1和β-catenin的蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论 安罗替尼可能通过Wnt/β-catenin通路发挥抑制SiHa细胞增殖、迁移和侵袭的作用。

“妈妈,我也想吃!”

最近每天我们在家吃晚饭时,在幼儿园吃过晚饭的俏俏总说:“妈妈,我也想吃!”有时我们怕孩子饿着,就让他吃一些。一天晚上,俏俏吃了半碗饭、4块排骨和一些菜,还喝了一碗粥。我跟爸爸都惊地问他:“你在幼儿园吃饭了吗?”尽管孩子说吃了,但这食量总让我们觉得孩子在幼儿园没吃饱,会不会不好意思添饭?种种疑问充斥在我和爸爸的脑海中。