当归芍药散通过调节ER/NF-ΚΚB/NLRP3缓解卵巢切除小鼠认知功能

目的雌激素下降是导致围绝经期女性认知功能障碍的风险因素,雌激素的缺失大大增加了围绝经期女性罹患阿尔茨海默病(AD)的风险。然而,长期的雌激素代替疗法在安全性上尚存在较大的争议,因此寻找更为安全有效的治疗方法,显得尤为重要。当归芍药散(DSS)是治疗妇人妊娠腹痛的经典方,其对AD也有较好的疗效。近来,研究人员进一步发现,DSS可以改善增加海马雌激素的合成改善雌激素缺乏引起的认知功能缺陷,但其发挥作用的分子机制尚不清楚。本研究旨在探讨DSS发挥改善雌激素缺失模型小鼠认知障碍的分子机制,为中医药治疗神经退行性疾病提供实验依据。方法将75只雌性ICR小鼠随机分为对照组和模型组,通过双侧卵巢摘除法(OVX)建立雌激素缺失动物模型,对照组仅切除卵巢旁附近少量脂肪,随后将模型动物随机分为:OVX组,DSS治疗组(每天3.2和6.4 g·kg-1)和阳性药治疗组(β-雌二醇,E2,每天100μg·kg-1),DSS治疗组给予灌胃治疗,阳性药治疗组给予皮下注射治疗,对照组给予等体积蒸馏水治疗。治疗12周后,通过Morris水迷宫测试、Y迷宫测试及旷场实验观察认知功能,免疫组化染色法观察小鼠海马小胶质细胞和星形胶质细胞激活,ELISA法检测海马炎症因子IL-1β分泌,Western蛋白印迹法检测海马NF-κB、NLRP3、胱天蛋白酶1、ASC、IL-1β及雌激素受体(ER)ERα和ERβ蛋白的表达。结果 DSS可显著缩短OVX小鼠在Morris水迷宫定位航行的逃避潜伏期,增加模型小鼠在Y迷宫三个臂中的交替百分比,增加模型小鼠在旷场中心区域活动的时间,此外,DSS可明显下调OVX小鼠小胶质细胞标志物Iba-1和星形胶质细胞标志物GFAP的表达,下调海马IL-1β的分泌,降低OVX模型小鼠海马p-NF-κB、NF-κB、NLRP3、胱天蛋白酶1、ASC和IL-1β蛋白的表达,此外,DSS还能增加OVX小鼠海马的雌激素受体ERα和ERβ的表达。结论 DSS可能是通过调节海马ER/NF-κB/NLRP3通路发挥缓解雌激素缺乏引起的认知功能缺陷,DSS可能是治疗围绝经期女性认知功能障碍的潜在药物。

奶牛养殖粪水还田对风沙土农田N_(2)O和NO排放的影响

为探究规模化奶牛养殖场粪水农田就近消纳的区域适宜方案,减缓农田温室气体排放,建立田间原位试验,研究奶牛养殖场粪水(液体有机肥)对风沙土N_(2)O和NO排放及青贮玉米产量的影响。试验设5个处理,分别为:不施氮肥对照(CK)、常规化肥(NPK)、奶牛养殖场固体有机肥底肥尿素追肥(SM)、液体有机肥分3次(LMT)和4次施用(LMF)。结果表明:在氮用量250 kg·hm^(-2)水平下,与NPK处理相比,SM处理土壤N_(2)O和NO累积排放量分别降低16.58%和20.31%,LMT处理的降低幅度分别达到39.59%和30.02%,LMF处理则仅降低土壤NO排放量而对N_(2)O排放无显著影响。与LMT处理相比,玉米生长季内LMF处理土壤N_(2)O和NO排放量分别增加了76.92%和13.04%。SM和LMT处理青贮玉米产量和肥料氮利用率与NPK处理无显著差异,而LMF处理则显著降低肥料氮的利用率31.76%。综上,风沙土农田玉米季奶牛养殖场液体有机肥的推荐施用方案为:250 kg·hm^(-2)氮分1次基肥和2次追肥施用,基追比为40%∶20%∶40%,追施时间为玉米拔节期和大喇叭口期。这一方案既可以高效消纳奶牛养殖场粪水,又可降低N_(2)O和NO排放,实现青贮玉米生产与生态环境的双赢。

阿尔兹海默病β淀粉样蛋白形成和沉积的发病机制及中医药干预的可能途径

阿尔兹海默病(Alzheimer’s disease,AD)是以认知功能障碍和记忆损害为主要临床特征的神经退行性疾病,其病因复杂,并缺乏有效的诊断、治疗和预防手段。β淀粉样蛋白(Aβ)被认为是AD治疗的关键靶标。Aβ是AD形成和发展的关键因素,以Aβ为靶标可能是AD预防和治疗的有效策略。中药对减少Aβ生成和沉积、促进Aβ清除方面已取得了系列的研究成果。中医药治疗AD应创新研究思路,以Aβ为靶标,开展方药配伍、临床试验研究,从而提高中医药治疗AD的疗效。

4种阿尔茨海默病动物模型行为学改变及凋亡机制的比较

目的探讨4种常见阿尔茨海默病(AD)动物模型在研究凋亡机制领域中的优势。方法采用4种常见AD模型(东莨菪碱致记忆障碍模型、鹅膏蕈酸致痴呆大鼠模型、快速老化模型、双转基因小鼠模型),利用Morris水迷宫测试动物模型认知能力;免疫印迹检测Bcl-2蛋白表达水平;TUNEL染色检测凋亡水平。结果在凋亡机制研究探讨中,快速老化小鼠(SAM)在Morris水迷宫测试、Bcl-2蛋白表达以及凋亡检测中其正常组与模型组均有显著差异(P<0.05)。结论 SAM模型在老年痴呆凋亡机制中有明显优势,为中药治疗老年痴呆的临床前研究提供指导。

中药临床试验样本量合理优化的探讨

中药临床试验的设计经常涉及到样本量的计算问题。样本量不足则检验效能过低,不易检出已存在的阳性结果,影响试验结果的准确性;样本量过大会造成资源浪费和执行困难,而且不适宜的样本量会有悖于伦理道德。本文比较了大样本试验和小样本试验的优缺点,并从多个角度探讨临床试验样本量设计的优化思路,为中药临床试验设计的样本量选择提供依据。

槲皮素对鹅膏蕈氨酸致痴呆大鼠模型海马神经元的保护作用及机制

目的探讨槲皮素对鹅膏蕈氨酸(IBO)致痴呆大鼠模型海马神经元的保护作用及机制。方法采用Meynert基底核注射IBO建立痴呆大鼠模型。将90只SD雌性大鼠随机分为对照组,模型组,盐酸多奈哌齐组(阳性药组,3 mg·kg-1),槲皮素高、中、低剂量组(100,30,10 mg·kg-1),连续给药4周。采用Morris水迷宫检测大鼠行为学变化;HE染色观察脑组织病理改变;检测大鼠海马组织中乙酰胆碱(Ach)含量与乙酰胆碱转移酶(Ch AT)活性。结果与对照组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期明显延长(P<0.05);大鼠在原平台象限停留时间缩短,站台穿越次数明显减少(P<0.05);大鼠海马区神经元损伤明显;海马组织ACh含量、Ch AT活性均明显降低(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,槲皮素高剂量组的逃避潜伏期明显缩短(P<0.01);槲皮素各给药组对神经元损伤具有一定改善作用,其中槲皮素高剂量组对神经元形态结构改善作用较明显;各给药组的ACh含量、Ch AT活性均有上升趋势,其中槲皮素中剂量组的ACh含量明显升高(P<0.05),槲皮素高剂量组的Ch AT活性显著提升(P<0.01)。结论槲皮素能显著改善IBO致痴呆大鼠模型的认知功能障碍及病理损伤,其作用机制可能与其增加海马区中Ach含量及Ch AT活性有关。

新生小鼠海马神经元培养及形态学观察的优化方法

目的：探讨一种更加优化的体外培养海马神经元及进行形态学观察的方法，为阿尔茨海默病（A D ）神经突触的研究奠定基础。方法选择新出生后0～1 d的C57BL/6J小鼠，断头取双侧海马，采用低浓度胰酶消化加机械分离的方法，使用无血清培养基进行神经元原代培养，培养17 d后利用磷酸钙共沉淀法进行绿色荧光蛋白（GFP ）的转染，于荧光显微镜下观察海马神经元和树突棘形态特征。结果采用此方法进行的海马神经元原代细胞培养，神经元生长良好，转染GFP后可以看到清晰的轴突/树突和树突棘突等典型的神经细胞结构特征。结论此技术方法所培养的海马神经元生长良好，磷酸钙共沉淀法转染GFP后能够更加清晰地观察到神经元及树突棘的形态特征。

基于Matlab GUI的微观化学反应过程可视化设计

基于准经典轨线方法和Matlab的GUI技术,我们开发设计了将a+bc三原子基元化学反应的碰撞过程可视化的动力学模拟程序,详细介绍了准经典轨线方法的基本原理、碰撞过程动力学信息的抽取和图形用户界面制作过程,并以典型反应F+HCl→Cl+HF为例展示了程序运行的结果。该程序可以将原子-双原子分子碰撞过程及碰撞的结果直观生动地通过动画的形式展现出来。学生也可以通过图形用户界面进行人机交互,从多个角度实时观察参与碰撞的原子、分子状态随时间的演化过程及结果。这有助于学生理解基元化学反应复杂的反应机理,加深对微观化学反应过程的感性认识。

补肾益智方有效部位群对M146L细胞分泌β淀粉样蛋白的抑制研究

目的探讨补肾益智方有效部位群对M146L细胞分泌的β淀粉样蛋白的影响,寻找潜在的具有抑制Aβ分泌的中药复方有效群。方法体外培养稳定转染人类阿尔茨海默病(AD)β淀粉样前体蛋白(beta-amyloid protein precursor,APP)基因及突变型早老素1(prsenilin-1,PS1)基因的中华仓鼠卵巢上皮细胞系(M146L),使之高效产生β淀粉样蛋白Aβ1-42,建立Aβ1-42过度表达的细胞模型。加入待筛选的补肾益智方有效提取部位群,用MTT法检测不同浓度的补肾益智方有效提取部位群(0,12.5,50μg/ml)对M146L细胞的毒性作用,应用Western blot免疫印迹方法分别检测突变型PS1M146L和野生型APP751双转染稳定表达CHO细胞系分泌的Aβ1-42的变化。结果不同浓度的补肾益智方有效部位群对M146L存活均无影响,不具有细胞毒作用。其中浓度为12.5μg/ml有效部位群F1和F2对M146L细胞分泌Aβ1-42有抑制作用。结论一定剂量的补肾益智方有效提取部位群对M146L细胞分泌的Aβ1-42有明显的抑制作用,其机制有待进一步研究。

从药物代谢动力学角度探讨中药复方有效性的思路与方法

药物产生药理作用(治疗作用或毒副作用)的前提是达到一定的血药浓度。中药复方可以通过其多种成分间的相互作用,调节某种活性成分的血药浓度,从而使其发挥更好的治疗作用,或者降低其毒副作用。药物代谢动力学可以用来探讨中药复方是如何通过改变药物体内代谢过程以达到更好的疗效。