小型猪在颞骨解剖及手术培训中的教学应用初探

目的 探索利用小型猪开展颞骨解剖及活体手术培训的方法,提出利用小型猪开展颞骨解剖及手术培训的新思路。方法 对小型猪尸头标本进行系统的颞骨解剖研究,优化解剖方法和流程,评估将其作为颞骨解剖培训标本的可行性。对活体小型猪模拟开展耳外科手术,优化活体手术模拟流程。结果 小型猪中耳、内耳结构与人类相似,其颞骨标本可用于低年资医生颞骨解剖培训,活体小型猪可用于开展中耳、内耳手术培训,为耳外科医生手术培训提供新路径。结论 小型猪可用于颞骨解剖及活体手术培训,在耳外科医生培训中具有教学价值。

遗传性耳聋基因治疗临床指南

遗传性耳聋是一种常见的遗传性疾病,新生儿的发病率为1‰~3‰。患者终身携带致病突变,导致不可逆性耳聋,至今尚无临床可用的治疗药物。在部分遗传性耳聋动物模型中,基因治疗已被证实为潜在有效的治疗方法。国内外已开展了多项遗传性耳聋基因治疗的临床试验。其中,由东南大学附属中大医院牵头,联合国内多家医院成功开展的遗传性耳聋基因治疗临床试验,取得了显著的疗效,并积累了丰富的经验。为规范遗传性耳聋基因治疗并提供临床研究指导,全国多家医院的耳科专家讨论制定了遗传性耳聋基因治疗临床指南,内容涵盖了伦理审查、遗传性耳聋的诊断和入组标准、临床前准备、药物、疗效与安全性评估标准、术后言语康复等。本指南将为耳聋基因治疗的临床诊疗提供规范的理论和技术指导。

耳毒性物质复合噪声致听力损失的研究进展

耳毒性物质与噪声是导致感音神经性耳聋的两类重要因素,影响日益严重。日常环境中影响更为严重和常见的是多因素的联合暴露,致使听力损失逐年提高。本文就耳毒性物质复合噪声致听力损失的研究进展进行文献综述,就耳毒性物质与噪声分类及介绍、复合听力损失流行病学研究、动物实验与机制分析、防治研究进行介绍,总结现有研究成果、不足及未来方向,对于了解复合听力损失现状,指导防治及下一步研究方向具有重要意义。

大龄语前聋患者人工耳蜗植入术后的研究进展

大龄语前聋者,指习得语言能力前患重度或极重度耳聋并且人工耳蜗植入时年龄偏大的患者。大龄语前聋患者术后康复效果较适龄幼儿患者差,其术后的评估以及康复效果的影响因素是研究重点。所以,本文就大龄语前聋患者人工耳蜗植入术后康复的评估方法和相关影响因素等方面的研究进展加以综述。

胞外囊泡DNA中5-羟甲基胞嘧啶分子标志物对突发性聋的疗效预判研究

目的 突发性聋(sudden sensorineural hearing loss, SSNHL)是一种急性感音神经性聋,部分患者治疗效果较差,目前无有效疗效预测指标。5-羟甲基胞嘧啶(5hmC)是一种稳定的表观遗传标志,因其在不同身体状态下富集含量不同的特点可作为预测疗效的生物标志物,本研究通过寻找5hmC标志物,探索其对SSNHL疗效进行预测的可能性。方法 选取2021年7月—2023年6月中国人民解放军总医院海南医院耳鼻咽喉头颈外科收治的SSNHL患者57例,其中男性26例、女性31例;根据治疗前后的听力结果将患者分为有效组27例和无效组30例。使用队列研究方法,寻找5hmC富集水平与SSNHL疗效之间的相关性。利用5hmC-Seal技术在患者治疗前的血浆胞外囊泡DNA中生成全基因组5hmC谱,比较两组不同治疗效果的5hmC谱,筛选出有价值的5hmC标志物,并进行相关功能和传导通路的初步探索。结果 共鉴定出11个5hmC标志物来预测治疗结果(曲线下面积为0.998),预测准确性较高。GO功能分析表明,调节GTPase活性、神经元投射发育、神经细胞发育等信号通路可能与内耳疾病的发病机制有关。结论 SSNHL治疗有效组和无效组的5hmC谱存在明显差异,胞外囊泡DNA来源的5hmC有可能作为有效的表观遗传生物标志物,用于SSNHL的微创疗效预测。

小探头超声内镜在小直径低级别直肠神经内分泌肿瘤内镜手术中的应用

目的评价小探头超声内镜(EUS)指导小直径(最大直径小于1 cm)低级别(G1级)直肠神经内分泌肿瘤(R-NEN)治疗的应用价值,为其临床应用和进一步研究提供循证医学证据和线索。方法回顾性分析2014年1月至2020年12月在本中心行内镜治疗的85例小直径低级别(G1级)R-NEN患者的临床资料,根据内镜治疗前是否行EUS检查将患者分为EUS组(37例)和对照组(48例)。比较2组患者内镜治疗后的切缘阳性率、并发症发生率、复发率、住院时间、住院费用、内镜治疗方式等指标。结果EUS组患者切缘阳性率显著低于对照组(P<0.05)。2组患者并发症发生率、肿瘤复发率、住院时间及住院费用比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。2组患者内镜治疗方式比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论对小直径低级别(G1级)R-NEN术前进行小探头EUS检查评估病变深度,并根据其结果选择内镜手术方式,可明显降低切缘肿瘤的残留风险。

肝硬化患者TIPS术后肠道菌群特征性改变及其与临床指标的相关性研究

目的比较既往行颈静脉肝内门体分流术(transjugular intrahepat portosystemic stent-shunt,TIPS)手术的肝硬化患者与未经TIPS手术的肝硬化患者的肠道菌群,探索在肝硬化患者中,TIPS手术与肠道菌群的关系,为基于肠道菌群干预改善肝硬化TIPS手术预后提供新思路。方法行TIPS手术的肝硬化患者为手术组,未经TIPS手术的肝硬化患者为对照组,收集患者大便标本行16S rRNA测序分析,并分析肠道菌群与临床指标相关性。结果两组患者在性别、年龄、体重指数(BMI)、病因等基线资料上均无显著差异(P>0.05),但临床血清学指标(如HGB,RBC,ALP,ALB,TBIL,PT,INR,APTT,UREA等)有显著差异(P<0.05)。手术组与对照组相比,α多样性无统计学差异(P>0.05),β多样性差异明显(P<0.01),手术组Bacteroides(拟杆菌属)明显增多(P<0.01),而对照组Bifidobacterium(双歧杆菌属)明显增多(P<0.05)。肠道菌群功能预测分析显示,手术组较对照组D-谷氨酰胺和D-谷氨酸代谢显著上升(P<0.05),次级胆汁酸生物合成(P<0.05)也显著上升。临床指标与菌群相关性分析中发现,总胆红素(TBIL)及直接胆红素(DBIL)与Bacteroides(拟杆菌属)、次级胆汁酸代谢通路显著相关。结论肝硬化TIPS术后患者肝硬化对照者相比,肠道菌群存在特征性改变,Bacteroides(拟杆菌属)可能参与胆汁酸代谢调控进而影响TIPS术后血胆红素水平升高。

鼓室注射治疗梅尼埃病的研究进展

鼓室内药物注射是治疗梅尼埃病眩晕发作的主要方法之一,然而其疗效在个体间存在较大差异,可能与药物进入内耳的效率不同有关。此外,鼓室内注射氨基糖苷类药物会存在感音神经性耳聋的风险。因此,改进鼓室内药物注射方式的药物递送效率和安全性一直是本领域研究的热点。采用新型纳米生物材料构建的药物递送系统显示出较好的应用前景,有望通过单次微量给药,在实现眩晕症状控制的同时降低药物不良反应的发生率。文章综述了两种常用药物,即庆大霉素和地塞米松治疗梅尼埃病的给药方式以及作用机制,为研发用于梅尼埃病治疗的鼓室注射药物新剂型提供参考。

颅中窝入路颞骨岩部胆脂瘤切除与面神经功能保护

目的 探讨经颅中窝入路颞骨岩部胆脂瘤切除的手术适应证、手术要点及面、听功能保护。方法 回顾性分析2006年1月至2021年1月我科经颅中窝入路手术治疗的颞骨岩部胆脂瘤病例的临床症状、体征、影像学特点、面神经修复方法、面、听功能保护、手术效果,总结分析颅中窝入路颞骨岩部胆脂瘤切除手术的适应证及手术要点。结果 接受颞骨岩部胆脂瘤外科切除的186例病例中,有56例患者采用颅中窝或颅中窝-乳突联合入路的手术方式。该组患者常见的临床症状分别为:听力下降(54/56,96.4%),面神经麻痹(42/56,75.0%)及耳漏(30/56,53.6%)。依据Sanna分型:迷路上型39例(69.6%),广泛型11例(19.6%),岩尖型6例(10.7%)。术前47例患者存在骨导听力,其中22例术后保留骨导听力,骨导听力保留率46.8%。手术涉及面神经的有36例(64.3%),其中20例行面神经减压术,1例行面神经端端吻合术,15例行面神经改道吻合术。术前面神经功能按House-Braekmann(H-B)法分级:Ⅰ级14例,Ⅱ级3例,Ⅲ级3例,Ⅳ级4例,V级10例,Ⅵ级22例。术后面神经功能H-B分级:Ⅰ级15例,Ⅱ级11例,Ⅲ级11例,Ⅳ级9例,V级1例,Ⅵ级9例。术后随访2-16年,1例患者术后5年复发,再次行手术切除。所有患者术后未发生硬膜外出血、颅内感染等并发症。结论 颅中窝入路是彻底切除迷路上、岩尖及部分广泛型岩部胆脂瘤、同时保留功能正常面神经和残留听力的最佳选择。面神经受损的患者可以依据损伤部位和程度的不同,采取减压、改道吻合或神经桥接移植以重建面神经功能。通过颅中窝入路切除岩部胆脂瘤,部分患者的听力有可能保留。

间隙前抑制耳后肌反射应用于小型猪模型

目的 应用小型猪作为研究对象,分别应用耳后肌反射(Post-Auricular Muscle Response, PAMR)与眨眼反射(Eye-Blink Response, EBR)测量间隙前抑制惊跳反射(Gap-induced inhibition of the Acoustic Startle, GPIAS),从而确定PAMR可成为测量GPIAS的方法,为耳鸣模型验证提供更加敏感、客观的方法。方法 选取3只3月龄大小的雄性小猪,分别应用PAMR以及EBR进行5次耳鸣模型行为范式—GPIAS的检测。应用SPSS21.0软件进行统计分析。结果 每只小型猪PAMR在no-gap情况下幅值均大于给予gap时的情况;每只小型猪EBR“no-gap”幅值大于“gap”时,但多数无统计学意义,且出现了gap幅值大于no-gap幅值的情况;进行GN Ratio(gap/no-gap)的计算后比较发现PAMR的ratio值均稳定小于1,EBR的值波动较大且出现>1的情况。结论 PAMR可以稳定且客观地反映耳鸣行为学检测范式GPIAS,表明PAMR可以成为小型猪耳鸣动物模型检测的方法,为后续阐明耳鸣的机制奠定了基础。

小型猪模型麻醉方法和麻醉效果相关因素研究进展

小型猪是一种理想的大动物模型,因为其解剖学、生理学等与人类有较大的相似性,已广泛应用于生物医学研究中,为了保证动物实验质量和遵循动物福利伦理原则以及避免动物在实验过程中的损耗,作者从小型猪在科学研究中的麻醉方法、麻醉效果的影响因素、生命体征的监测方法进行综述,旨在为生物医学研究中建立有效的动物疾病模型提供参考。

Waardenburg综合征患者螺旋神经节细胞数量分布特征的分析

目的本研究旨在研究Waardenburg综合征(Waardenburg Syndrome,WS)患者的耳蜗中螺旋神经节细胞(spiral ganglion neuron,SGN)的数量与非综合征性感音神经性聋(Nonsyndromic sensorineural hearing loss,NS)患者相比是否具有差异,以及耳蜗不同位置之间的数量分布差异。方法本研究采用横断面研究,收集2000年至2020年间就诊于中国人民解放军总医院行人工耳蜗植入的WS患者,收集患者相关信息,包括植入年龄、植入侧别、植入电极型号以及人工耳蜗植入术中的电刺激复合动作电位(Electrical compound action potential,ECAP)测量数据以及其幅值增长曲线(amplitude growth function,AGF)。为控制植入年龄,植入电极类型等混杂因素带来的偏倚,制定对照组患者纳入标准,通过采用窗函数的计算方式,应用Matlab(R2016a)计算两组中不同刺激电极的slope值。依据刺激电极在耳蜗中的位置,将电极分为近蜗顶组,中间组以及近蜗底组,应用采用t检验比较两组患者中不同位置之间的slope值。结果依据纳入以及排除标准,最终纳入16名WS患者以及16名NS患者,经两独立样本t检验证实两组之间具有可比性。WS患者与NS患者的总体slope具有显著差异(P=0.007<0.05;Cohen's d=1.022>1),在不同位置中,以中间组以及近蜗底组的slope值具有显著差异(P=0.001<0.05;P=0.026<0.05,Co⁃hen's d=1.302>1;Cohen's d=0.828>0.8)。结论WS患者SGN的数量明显少于NS患者,并且在耳蜗的不同位置数量改变不同,尤其以底回以及中回的数量改变尤为显著。

MITF致病性突变与Waardenburg综合征临床表型相关性分析

目的本研究旨在初步探索MITF致病性突变中突变类型、突变位点与临床表型之间的关系,为基因诊断提供参考依据并进一步研究Waardenburg综合征(Waardenburg syndrome,WS)患者临床表现高度异质性的内在原因。方法以关键词“Waardenburg syndrome”、“MITF”、以及“Waardenburg综合征”进行文献检索,于PubMed数据库以及CNKI数据库检索1995年至2021年11月10日间的文献,并依据纳入以及排除标准进行文献筛选。收集并整理文献中家系成员的临床表型。同时在ClinicalVariant数据库中进行MITF致病性突变位点检索。建立MITF致病性突变位点的数据库。基于MITF蛋白结构以及功能的改变,将突变类型进一步分组。并以广义估计方程(generalized estimating equations,GEE)的分析方法,探索突变类型以及临床表型之间的相关性。结果经过文献筛选,最终纳入文献28篇,并结合ClinicalVariant数据库,建立了包含58例致病性突变位点的MITF致病性突变数据库。其中MITF致病性突变中以无义突变为主,各外显子中均可出现,而错义突变的突变位点则集中于外显子7,8,主要影响bHLH结构的编码区进而影响MITF蛋白的功能,导致疾病的出现。在突变位点以及临床表型的关系中,核定位信号结构阈的氨基酸(Amino Acid,AA)替代与虹膜异色、听力下降(P=0、P=0)具有相关性,HLH结构阈的AA替代与虹膜异色、面部雀斑、头发颜色异常、听力下降(P=0.013、P=0.025、P=0、P=0)具有相关性。通过突变类型与临床表型相关性的探索,进一步证实bHLH-Zip结构阈以及其包含的核定位信号在MITF的作用过程中的重要作用。结论MITF致病性突变中错义突变多发生于其特征性结构阈bHLH-Zip的编码区进而影响MITF的功能,最终导致疾病的出现。错义突变位于核定位信号编码区时,WS患者更易出现听力下降。

不同病变胃粘膜端粒酶活性及其亚单位的检测

目的：探讨端粒酶及其亚单位（ＴＰ１、ｈＴＲ、ｈＴＲＴ）在胃粘膜癌变过程中的作用。方法：端粒酶的检测采用端粒末端重复序列扩增技术（ｔｅｌｏｍｅｒｉｃ ｒｅｐｅａｔ ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌ，ＴＲＡＰ），端粒酶亚单位的检测采用ＲＴ－ＰＣＲ法。结果：端粒酶阳性检出率在慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生、异型增生及胃癌中分别为２４．６％（１４／５７）、３８．９％（７／１８）、３７．５％（３／８）及９２．３％（６０／６５），正常胃粘膜未检测到端粒酶活性，与以上各病变组织有显著性差异（Ｐ＜０．０５～０．０１），而慢性萎缩性胃炎、肠上皮化生和异型增生组织中端粒酶阳性率亦明显低于胃癌组织（Ｐ＜０．０１）；端粒酶的表达与临床病理指标无相关性；ＲＴ－ＰＣＲ定性检测发现端粒酶亚单位ｈＴＲ和ＴＰ１在大多数胃粘膜中都有表达，而ｈＴＲＴ主要在胃癌及部分癌前组织中表达，且在胃癌中ｈＴＲＴ的表达与端粒酶活性之间具有明显的相关性（Ｐ＜０．０１）。结论：端粒酶不仅在胃癌组织中高表达，在部分癌前组织中也有表达。提示端粒酶在胃癌的发生过程中可能具有重要作用；端粒酶亚单位ｈＴＲＴ不仅可能作为胃癌的诊断指标，而且还可能作为胃癌基因治疗的靶?

As_2O_3对胃癌细胞周期及端粒酶活性的影响

目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3 )对SGC 790 1胃癌细胞端粒酶活性及细胞周期的影响及其机制。方法 细胞凋亡、细胞周期分布及相关蛋白的表达采用流式细胞术 ;端粒酶活性的检测采用端粒末端重复序列扩增 ELISA法 (TRAP ELISA) ,端粒酶亚单位mRNA及c mycmRNA的表达采用RT PCR技术。结果 As2 O3 可明显抑制SGC 790 1细胞的生长 ,细胞凋亡率明显增加 ,G0 /G1期细胞减少 ,S和G2 /M期细胞增加 ,Bcl 2、c myc、PCNA蛋白表达减少 ,Bax蛋白表达增加 ,端粒酶活性明显下降 ;端粒酶亚单位hTR和TP1mRNA无明显变化 ,hTRTmRNA表达减少 ,同时 ,c mycmRNA的表达亦减少。结论 As2 O3 对SGC 790 1细胞的抑制作用可能是通过二条途径实现 :一个是诱导细胞凋亡 ,另一个是通过下调hTRTmRNA的表达来下调端粒酶活性 ,其机制有可能与c myc和Bcl 2基因的减少以及Bax基因的增加有关。

人端粒酶蛋白催化亚单位反义基因转染对胃癌细胞恶性表型的逆转作用

目的 探讨人端粒酶蛋白催化亚单位（ｈＴＲＴ）反义基因治疗对胃癌细胞恶性表型的逆转作用。方法 采用基因重组技术，构建ｈＴＲＴ正、反义真核表达载体，采用脂质体法导入ＳＧＣ－７９０１细胞，检测细胞生长曲线、端粒酶活性凋亡、细胞周期、软琼脂中克隆形成率及裸鼠体内成瘤性的变化。结果 成功构建ｈＴＲＴ正、反义真核表达载体，并导入ＳＧＣ－７９０１胃癌细胞株中，获得稳定表达正、反义基因的细胞系７９０１－Ｓ、７９０１－ＡＳ１和７９０１－ＡＳ２。７９０１－ＡＳ１和７９０１－ＡＳ２出现显著生长抑制现象，端粒酶活性明显下降，细胞凋亡增加，异型性减小，Ｇ０／Ｇ１期细胞增加，Ｓ和Ｇ２Ｍ期细胞减少，增殖指数减小，软琼脂中无克隆形成，裸鼠体内成瘤消失。结论ｈＴＲＴ反义基因治疗可以明显抑制ＳＧＣ－７９０１细胞的增殖，部分逆转肿瘤细胞的恶性表型，其机制可能主要是通过诱导细胞分化而非诱导细胞凋亡途径实现的，提示ｈＴＲＴ基因可以作为肿瘤治疗的靶基因。

基于遗传算法的区域雷达网优化布站方法

为提高区域雷达网探测能力和抗综合电子干扰、抗隐身技术与隐身飞机的威胁,抗低空、超低空突防及抗反辐射导弹(ARM)能力,提出了一种基于遗传算法的雷达网优化布站方法.建立区域雷达网优化布站的数学模型,给出遗传算法在该优化问题中的求解过程和步骤,为加快求解速度对遗传算法进行了改进,并进行了雷达组网仿真,将分析结果与应用模拟退火算法计算的结果进行了比较,结果表明该方法能够快速得出多种优化布站方案,并具有易操作性.

hTRT反义基因对胃癌细胞端粒酶及凋亡相关基因表达的影响

目的:探讨人端粒酶蛋白催化活性亚单位(humantelomerasereversetranscriptase,hTRT)反义基因治疗对胃癌细胞端粒酶及凋亡相关基因表达的影响.方法:采用基因重组的方法,构建hTRT正?反义真核表达载体,并用脂质体导入SGC-7901胃癌细胞株,检测转染细胞增殖能力?细胞周期?端粒酶活性?端粒酶亚单位及bcl-2,c-myc基因表达的变化.结果:成功构建hTRT正?反义真核表达载体,并导入胃癌细胞,筛选出稳定表达正?反义hTRT的阳性克隆7901-S,7901-AS1和7901-AS2.反义细胞增生能力明显减弱,凋亡细胞和G0/G1期细胞增多,增生指数下降,端粒酶活性下降,端粒酶亚单位hTRT的表达减少,而TP1,hTR无明显变化,进一步研究发现bcl-2和c-myc基因的表达在转录和翻译水平均明显下调.结论:hTRT和c-myc,bcl-2基因的调节作用是相互的,反义hTRT基因可以通过下调胃癌细胞hTRT?c-myc?bcl-2基因的表达,一方面降低端粒酶活性,另一方面一定程度增加凋亡细胞的比率,从而抑制细胞的生长.

国内突发性聋临床诊治研究论文的再评价

目的复习国内近5年来有关突发性聋疗效的报道,分析突发性聋诊断和治疗的现状,重点分析1996年中华医学会耳鼻咽喉科学分会制定的诊断和疗效评定标准的执行情况。方法检索中国生物医学文献数据库和中国期刊网医学专题全文数据库,以突发性聋和治疗为关键词检索2000～2004年发表的有关突发性聋诊治的研究文章。依据国际循证医学标准,进行逐篇分析。结果共检出2000-2004年发表的有关突发性聋诊治的研究文章234篇。其中2000-2002年发表的有关突发性聋诊治的研究文章176篇,有关药物疗效的126篇,在关于药物疗效的文章中,以1996年中华医学会耳鼻咽喉科学会在上海制订的诊断和疗效标准为标准的文章26篇,占20.6%,设有对照试验的89篇,占70.6%,其中符合临床随机对照试验(randomized controlled trials,RCT)的36篇约占28.5%。2003-2004年发表的有关突发性聋诊治的研究文章58篇,其中有关药物疗效的25篇,全部均标明以1996年中华医学会耳鼻咽喉科学会在上海制订的诊断和疗效标准为标准。但全部234篇文章设有空白对照试验的0篇,有长期随访记录的文章0篇,做组间均衡性检验的文章0篇,记有不良反应的文章共为6篇,平均疗效最低60.3%,最高94.5%。结论目前国内治疗突发性聋的报道很多,但对其诊断和疗效的评估标准认识不够统一,1996年制定的标准执行情况不容乐观。有必要进行标准修订,而且应该增加治疗原则的制定,有利于规范治疗,指导临床。多中心RCT研究对突发性聋的临床研究非常重要。

Smad5基因敲除小鼠听生理和耳蜗形态实验观察

目的观察Smad5基因敲除小鼠(Smad5+/-)听生理和耳蜗形态改变,探讨Smad5基因是否为一种新的听功能相关基因。方法双盲对照法对Smad5(+/-)和Smad5(+/+)小鼠进行听性脑干诱发电位(ABRs)的听阈检测和耳蜗毛细胞形态观察及毛细胞计数。结果ABR听阈Smad5(+/-)小鼠24周时为90.63±17.65dB(SPL),Smad5(+/+)小鼠为63±19.94dB(SPL),二者差异显著(P<0.01)。耳蜗基底膜铺片显示Smad5(+/-)小鼠内、外毛细胞缺失,其中在底回处尤其突出,Smad5(+/+)小鼠内、外毛细胞少量缺失。Smad5(+/-)与Smad5(+/+)小鼠外毛细胞计数差异有显著性意义(P<0.01),而内毛细胞计数差异无显著意义(P>0.05)。结论Smad5基因敲除导致小鼠中、重度听力下降,耳蜗基底膜毛细胞缺失,以外毛细胞为主。Smad5基因敲除导致毛细胞缺失是Smad5(+/-)小鼠听力损失的原因之一。推测Smad5基因可能是听功能相关基因。