全自动阴道分泌物分析系统复检规则制订及验证的多中心研究

目的制订并验证GMD-S600全自动阴道分泌物分析系统的复检规则。方法收集来自5家医院检验科2021年7月至2022年7月的4155份女性阴道拭子,其中3407份用于全自动分析系统复检规则的建立,748份用于复检规则的验证。所有标本通过GMD-S600分析系统检测、人工湿片和革兰染色显微镜镜检(简称联合镜检结果),对细菌性阴道病(BV)、外阴阴道假丝酵母菌病(VVC)、滴虫性阴道炎(TV)等疾病项目进行检测分析。以联合镜检结果为标准,筛选出全自动分析系统的复检规则,再通过国际通用复检规则评估指标进行验证。结果(1)联合镜检结果显示,建立复检规则的3407份标本中BV阳性率为10.86%(370份),VVC阳性率为17.38%(592份),TV阳性率为1.29%(44份),总阳性率为26.74%。(2)以联合镜检结果为标准,最终选定37条复检规则及附加其中22条规则强制显微镜检查的条件。应用规则后,BV、VVC、TV的假阴性率和灵敏度分别为3.40%、68.65%,5.22%、69.98%,0.21%、84.44%;显微镜镜检复查率为23.10%。(3)应用748份标本复检规则验证,BV、VVC、TV假阴性率分别为4.81%、3.61%、0.00%,镜检复查率为22.19%。(4)仪器镜检与人工湿片镜检白细胞等级偏差超出一致性界限外的百分率为4.81%。结论多中心研究制订的37条复检规则及附加22条镜检条件适用于临床对BV、VVC、TV疾病的初筛,能有效控制检测项目的假阴性率及假阳性率,且触发规则后的人工干预率及显微镜复检率均可被接受;仪器计数白细胞半定量结果基本可信。该研究结果可应用于同型号检测系统,但还需结合实验室实际使用情况对相关规则进行周期性验证调整。

PDCA循环法对急诊标本周转时间合格率的影响

目的探讨运用PDCA循环法后,急诊检验标本周转时间(TAT)合格率的变化。方法统计分析西北妇女儿童医院医学检验中心2022年1月至4月共8455例急诊标本报告,统计标本TAT合格率并采用鱼骨图分析不合格原因及处理措施;统计运用PDCA循环法后2022年5月至2023年1月共20140例急诊标本报告,比较PDCA循环法实施前后急诊标本TAT合格率的变化。结果PDCA实施后,急诊标本TAT合格率高于PDCA实施前,差异有高度统计学意义(P<0.001)。其中不同急诊项目中,除免疫发光外,急诊血常规、尿常规、粪常规、血凝四项和生化标本TAT合格率均较PDCA循环前升高,差异有高度统计学意义(P<0.001)。结论通过PDCA循环管理法,西北妇女儿童医院医学检验中心急诊标本TAT合格率得到了明显提升,这不仅提升了检验效率和临床服务,同时对急、危重患者的及时救治具有重要意义。

2013～2014年甘肃省吸烟者高血压患病现况调查

目的了解甘肃省2013~2014年吸烟者高血压患病状况。方法按照多阶段分层整群抽样的原则抽样,对样本进行问卷调查、体格检查、血压测量等。结果此次调查共计15 430例,高血压患者3993例,患病率25.88%。男性和女性高血压患病率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。不吸烟者共11 758例,高血压患病率24.79%;每天都吸烟者3003例,高血压患病率30.57%;偶尔吸烟者669例,高血压患病率23.92%。每天都吸烟者高血压患病率高于不吸和偶尔吸烟者,差异有统计学意义(P均<0.05)。吸烟时间少于6个月的人群,高血压患病率为17.98%;6~12个月,高血压患病率为20.51%;1年以上者,高血压患病率为30.35%。吸烟1年以上高血压患病率高于吸烟时间<6个月,差异有统计学意义(P<0.05)。高血压患者开始吸烟年龄、累计吸烟时间、接触二手烟时间高于正常人群,数值为[(25.03±9.06)年vs.(22.93±6.71)年]、[(29.34±14.36)vs.(19.97±14.35)年]和[(5.23±2.21)年vs.(4.49±2.38)年],差异有统计学意义(P均<0.05)。结论甘肃省吸烟频率和年限较高人群高血压患病率较高,需进一步加强对吸烟的控制和干预。

乙醇对结核分枝杆菌M_r 38000蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的促进作用

目的:探讨乙醇促进结核分枝杆菌Mr38000蛋白 的可溶性表达,并获得可溶性的Mr38000重组蛋白.方法: 采用聚合酶链反应(PCR)从结核分枝杆菌H37Rv基因组中 扩增出Mr38000蛋白的编码基因,用限制性内切酶消化后插 入载体pGEX 4T 2中,将重组质粒转化大肠杆菌BL21,在乙 醇添加剂存在下,经IPTG诱导,表达GST 38融合蛋白;聚丙 烯酰胺凝胶电泳(SDS PAGE)分析融合蛋白的相对分子质量 及表达形式,免疫印迹法鉴定融合蛋白的活性.结果:经PCR 扩增后证实为Mr38000蛋白的基因,成功构建了具有正确基 因序列的重组表达载体,在大肠杆菌BL21中诱导表达融合蛋 白约占菌体总蛋白的18%.在乙醇存在下,可溶性目的蛋白的 表达量约是无乙醇时的5倍.结论:在原核表达中乙醇作为一 种添加剂可以促进结核分枝杆菌Mr38000蛋白在大肠杆菌 BL21中的可溶性表达.

以结核分枝杆菌38kD重组蛋白为抗原的血清学诊断

目的克隆表达结核分枝杆菌38kD抗原基因,并以此蛋白为抗原,进行分枝杆菌的血清学诊断。方法采用PCR自结核分枝杆菌基因组DNA中扩增38kD抗原基因,经测序鉴定正确后,克隆于pGEX-4T-2表达载体,转化大肠杆菌BL21进行诱导表达,利用GSTrapFF蛋白柱纯化表达产物,经ELISA检测其抗原的灵敏度与特异性。结果目的蛋白表达量约占菌体总蛋白量的28%,ELISA检测灵敏度为79.8%,特异性为99.0%。结论重组38kD抗原可用于结核分枝杆菌的诊断。

结核分枝杆菌重组蛋白的制备及抗原性分析

目的:克隆表达结核分枝杆菌Mr16×103和Mr38×103重组蛋白,测定其抗原性和特异性.方法:利用聚合酶链反应自结核分枝杆菌基因组DNA扩增Mr16×103和Mr38×103抗原基因,经测序鉴定后克隆于pGEX4T2表达载体,转化于大肠杆菌BL21菌株进行诱导表达,利用GSTrapFF蛋白柱纯化表达产物,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)检测其抗原性与特异性.结果:携带重组质粒的菌株经诱导产生的表达量分别为42%和18%;Mr16×103和Mr38×103蛋白量分别为:688mg/L和217mg/L.其中Mr16×103蛋白作为包被抗原ELISA法检测的灵敏度为67.0%,特异性为100%,准确性为84.0%;Mr38×103蛋白作为包被抗原ELISA检测的灵敏度为79.8%,特异性为99%,准确性为89.7%.结论:以Mr16×103,Mr38×103重组蛋白为抗原具有良好的抗原性和特异性,可用于结核分枝杆菌诊断方法的建立及临床诊断.

间断小剂量尿激酶治疗肺栓塞临床观察

目的 :评价间断小剂量尿激酶溶栓治疗肺栓塞的疗效及安全性。方法:选择42例诊断肺栓塞患者随机分为两组:尿激酶(UK)组给予静脉滴注尿激酶,10 000 U/(kg·次),每天1次,按100 000 U/h滴注,治疗时间为7 d;重组组织型纤溶酶原激活剂(rt-PA)组给予静脉滴注rt-PA,50 mg/2h,只用1次。两组治疗后第8、14天超声心动图评价右心室的功能,CT肺动脉造影评价改善肺血管缺损面积。评价两组不良反应(包括死亡、出血、再发)。结果:治疗8、14 d两组在改善右心室功能及肺血管缺损面积差异无显著性(P>0.05),UK组出血发生率少于rt-PA组。结论:间断小剂量尿激酶溶栓方案治疗肺栓塞与rt-PA方案有相同的疗效。

血清ICTP、ALP联合测定对骨肿瘤的诊断价值

目的:探讨血清Ⅰ型胶原羧基吡啶末端肽(ICTP)及碱性磷酸酶(ALP)联合测定对骨肿瘤的诊断价值。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和化学连续监测法测定骨肿瘤患者血清ICTP与ALP的水平。结果:恶性骨肿瘤患者血清ICTP、ALP水平明显高于良性骨肿瘤患者及正常对照组,P<0.01。ICTP和ALP对骨肿瘤的敏感性分别为78.9%,57.9%;特异性分别为85.1%,74.5%。经受试者工作特征曲线(ROC)分析,并联试验测定的特异性为80.9%,敏感性为89.5%,与单项测定指标相比,其敏感性相差显著,P<0.01。结论:血清ICTP与ALP联合检测对于骨肿瘤的诊断具有较高的应用价值。

免疫抑制小鼠侵袭性肺烟曲霉菌病动物模型的建立及病理分析

目的:建立侵袭性肺烟曲霉菌病动物模型,探讨免 疫抑制宿主曲霉菌病致病机制.方法:以甲基强的松龙为免 疫抑制剂,造成小鼠免疫抑制,对腹腔巨噬细胞和脾细胞进行 计数.双侧鼻孔滴注烟曲霉菌孢子引起侵袭性肺烟曲霉菌病, 不同时间点处死小鼠,进行组织培养及病理分析.结果:糖皮 质激素注射后小鼠免疫细胞数量急剧下降,腹腔巨噬细胞数 量明显减少[(6.33±1.76)×106vs(3.18±0.57)×106, P<0.01],脾细胞和外周血淋巴细胞数量下降(P<0.01);病 理切片可见免疫抑制小鼠感染烟曲霉菌后肺组织大量烟曲 霉菌聚积,组织坏死,形成肺脓肿.结论:成功建立了免疫抑 制小鼠侵袭性肺烟曲霉菌病动物模型,为研究免疫抑制宿主 易于感染烟曲霉菌的致病机制以及疾病的发生发展奠定基 础.

阿片受体激动剂对缺血/再灌注心肌的保护作用

近来,随着溶栓和介入治疗的发展,AMI再灌注成功率显著提高。但是,血管再通时随之可能会发生缺血心肌的再灌注损伤。已证实缺血预处理(IPC)可产生心肌保护作用。而阿片受体激动剂通过激活心肌阿片受体能模拟缺血预处理对心脏的保护作用,心肌阿片受体激活能产生早期时相和后时相的心肌保护作用,信号途径涉及Gi/Go、蛋白激酶C、酪氨酸激酶和ATP敏感钾离子通道等。另外,阿片受体激动药对缺血/再灌注心肌也可产生直接的保护作用。但其作用机制有待于进一步的研究。

化学发光免疫法分析孕妇血清甲状腺球蛋白抗体浓度分布及其对甲状腺球蛋白水平检测的影响研究

目的分析孕妇人群中甲状腺球蛋白抗体(thyroglobulin antibody,TgAb)的阳性率以及其体内不同浓度的TgAb对甲状腺球蛋白(thyroglobulin,Tg)检测的影响。方法回顾性分析2020年10月~2021年12月在西北妇女儿童医院门诊孕检的68955例孕妇血清TgAb和Tg的结果,并收集240份不同浓度TgAb的孕妇血清,进行Tg确证血清回收实验,分析不同浓度TgAb对Tg检测的影响。结果依据西门子检测系统的阳性结果判读标准(TgAb≥60IU/ml),68955例孕妇TgAb阳性率为15.47%(10665/68955),且TgAb阳性率随着孕妇年龄增长呈增高趋势(χ^(2)=101.931,P<0.001)。按照TgAb(IU/ml)<60(阴性),60~200,201~300,301~400,401~500和>500进行分组,其对应的Tg检测浓度(ng/ml)范围分别为11.26(2.87~43.80),3.40(0.13~63.95),3.15(0.15~70.70),0.60(0.13~50.92),0.59(0.14~64.22)和0.74(0.14~14.82)。Tg检测浓度与TgAb水平呈负相关(r=-0.504,P<0.001)。按照上述分组,其对应的Tg确证血清回收率分别为102.10%(81.09%~106.05%),97.03%(43.15%~109.29%),95.57%(41.67%~106.20%),84.57%(33.41%~105.25%),66.97%(29.33%~104.50%)和65.98%(21.70%~98.56%)。Tg确证血清回收率与TgAb水平呈负相关(r=-0.565,P<0.001)。Tg确证血清回收率小于80%的占比分别为0%(0/40),27.5%(11/40),35%(14/40),42.5%(17/40),62.5%(25/40)和67.5%(27/40)。孕妇不同TgAb浓度血清的Tg确证血清回收率小于80%的百分率差异有统计学意义(χ^(2)=51.134,P<0.001),且随着TgAb浓度的增高,呈增高趋势(χ^(2)=48.363,P<0.001)。结论当孕妇体内TgAb为阴性时,Tg的检测结果无影响;当TgAb阳性时,会干扰Tg检测,使其结果偏低,且浓度越高对Tg的干扰越强。由于孕妇群体TgAb阳性率较高,建议临床进行Tg检测时同时联合检测TgAb综合判断。

酶联免疫法与金标法对梅毒的检测效果比较

目的:探讨梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附法(TP-ELISA)和梅毒螺旋体抗体胶体金法(金标法)的临床适用性评。方法:采用ELISA法(ELISA法1、ELISA法2)及金标法对6373例住院患者的临床术前及输血前血清样本进行初步筛检,初检阳性或弱阳性样本采用TPPA法行确证试验。结果:6373例血清样本中,ELISA法1、ELISA法2及金标法阳性检出分别是68例(1.07%)、66例(1.05%)、58例(0.91%),金标法的阳性检出率与ELISA法1、ELISA法2比较未见统计学差异(P>0.05)。经TPPA确证阳性血清样本共68例,其中ELISA法1、ELISA法2阳性检出62例,金标法58例;ELISA法1的6例阳性样本和ELISA法2的4例阳性样本分别经TPPA法确证阳性为4例、2例,金标法灵敏度是85.29%(58/68),显著低于ELISA法1、ELISA法2的97.06%(66/68)、94.12%(64/68),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ELISA法的具有特异性、灵敏度、阳性确诊率较高,实现自动化分析的优势,适用于术前和输血前血清样本的筛查。金标法的灵敏度较低,但具有特异性高、检出迅速等优点,对健康体检患者大量血清样本及急诊术前初筛实验适用性强。为避免误诊及医疗纠纷,ELISA法和金标法检测阳性样本还须应用TPPA法进行确诊。

代谢型谷氨酸受体1阻滞剂LY367385对NMDA所致神经元损伤的保护作用

目的探讨代谢型谷氨酸受体1在神经系统兴奋性损伤中的作用。方法用代谢型谷氨酸受体1特异性阻滞剂LY367385预处理神经元细胞1 h,加入N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)造成兴奋性损伤;采用甲基噻唑基四唑(MTT)比色实验检测细胞活性; LDH试剂盒检测培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性;转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡指数;免疫共沉淀和免疫印迹实验检测NMDA受体2B亚基(NR2B)和突触后致密物质95(PSD95)相互作用。结果 MTT、LDH和TUNEL实验显示,LY367385能减轻NMDA造成的神经元损伤(P <0. 05);免疫共沉淀和免疫印迹实验显示,NMDA受体与PSD95存在相互关系,LY367385可以减轻兴奋性损伤造成的NMDAR-PSD95表达增高(P <0. 05)。结论 LY367385能够明显减轻NMDA造成的神经元损伤,其机制可能与阻断代谢型谷氨酸受体1可以减少NMDA受体与PSD95连接相关。

围生期孕妇生殖道B族链球菌耐药性变迁及血清型分布研究

目的:了解西安地区孕产妇生殖道B族链球菌(group B Streptococcus,GBS)的血清型分布特征及GBS对常规抗菌药物的耐药谱,为临床预防与治疗提供依据。方法:收集2015年1月—2017年12月在西北妇女儿童医院产科接受产前GBS筛查的孕晚期孕妇阴道拭子培养出的GBS共498株。采用多重聚合酶链反应(PCR)方法测定GBS血清型,并进行药物敏感性试验和表型筛查试验。结果:所有GBS分离株均对青霉素、头孢曲松、万古霉素、利奈唑胺敏感。GBS对红霉素、克林霉素及左氧氟沙星耐药率分别为76.7%、73.5%和58.0%,且红霉素的耐药率呈逐年上升趋势。表型为结构型耐药(cMLSB)的GBS菌株占红霉素耐药菌株的首位(88.2%),而诱导型耐药(iMLSB)和M型耐药菌株仅占耐药株的5.5%和6.3%。最常见的血清型为芋型,其次为玉a型、吁型、玉b型、域型和遇型。结论:淤西安地区孕产妇生殖道GBS定植率与我国其他地区相似或略低;于血清型芋占主要地位;盂红霉素、克林霉素、左氧氟沙星耐药率高于其他地区,且红霉素耐药率呈逐年上升趋势。

结核分枝杆菌P16蛋白的研究进展

P16蛋白是结核分枝杆菌主要的膜蛋白,对该菌的生存力和稳定性起重要的调节作用.P16蛋白主要以9个亚基的寡聚体形式存在,有抗蛋白酶的水解作用;在氨基酸序列有一α-crystallin结构,该结构与P16蛋白的分子伴侣活性密切相关;P16蛋白具有高效、自发的再折叠,再组装能力,具有极强的抗热性.P16蛋白具有较强的免疫原性,可作为预防结核的亚单位疫苗及血清学诊断试剂.

新生儿重症监护室晚发型败血症病原菌变迁及耐药性分析

目的研究新生儿重症监护室(NICU)晚发型败血症(LOS)的病原菌分布、变迁及耐药情况。方法回顾性分析2012年1月至2019年12月NICU收治的223例血培养阳性LOS新生儿的临床资料,分析病原菌逐年变迁特点。结果223例新生儿中男116例、女107例,平均胎龄(31.9±1.2)周,平均出生体质量(1584.1±620.9)g,发生LOS的中位年龄为19.0(13.0~27.0)d,早产儿203例、足月儿20例。共检出234株病原菌,以G^(-)菌检出最多(128株,54.7%),其中肺炎克雷伯杆菌77株;G^(+)菌69株(29.5%);真菌37株(15.8%)。不同年份之间G^(-)菌、G^(+)菌以及真菌检出率差异有统计学意义(P<0.01),G^(-)菌和真菌均以2016年检出率最高,G^(+)菌以2014年检出率最高。G^(+)菌、G^(-)菌及真菌组之间发病时间、剖宫产率、胎膜早破时间>18 h、抗生素暴露率及病死率差异均有统计学意义(P<0.05)。G菌的剖宫产率、病死率较高,发病时间较短;真菌组抗生素暴露率、胎膜早破时间>18 h比例较高。肺炎克雷伯杆菌(34.9%)是引起早产儿LOS最常见致病菌。早产儿和足月儿组之间G^(-)菌、G^(+)菌以及真菌检出率的分布差异无统计学意义(P>0.05)。检出多重耐药菌共109株(46.6%),以ESBLs肠杆菌为主(74株,67.9%)。结论G^(-)菌是NICU中引起LOS的常见病原菌,对常用抗菌药物耐药严重。定期回顾分析NICU中病原菌分布及耐药特点有助于指导抗生素的合理及有效使用。

哺乳期急性乳腺炎病原菌分布及耐药特点

目的了解哺乳期急性化脓性乳腺炎致病菌的分布特征及对常规抗菌药物的耐药谱,为临床治疗提供依据。方法收集2016年1月至2018年12月在西北妇女儿童医院乳腺科因急性化脓性乳腺炎就诊的253例患者的乳腺穿刺脓液进行培养。采用VITEK-2 COMPACT全自动微生物鉴定药敏仪器进行细菌鉴定,并进行药物敏感性实验和表型筛查试验。结果 253例标本共分离出130株致病菌,检出率为51.4%,2016至2018年检出率呈逐年递增趋势(χ^2=6.191,P<0.05);致病菌以金黄色葡萄球菌为主(95.4%),其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率为25.8%,2016至2018年MRSA检出率呈逐年增长趋势(χ^2=11.560,P<0.05);药敏结果提示金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素耐药率较高,分别为90.3%、73.4%和71.0%,对苯唑西林、四环素、甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、庆大霉素耐药率较低,分别为25.0%、19.4%、4.8%和1.6%;对红霉素耐药的分离株中,51株(56.0%)为组成型耐药(cMLSB),35株(38.5%)为诱导型耐药(iMLSB),5株(5.5%)为M型耐药,无L型耐药菌株。结论金黄色葡萄球菌是引起哺乳期急性化脓性乳腺炎的主要致病菌,且MRSA检出率呈逐年上升趋势。金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、克林霉素耐药率较高,且红霉素耐药菌株中iMLSB表型占一定比率,临床医生应根据药敏结果合理使用抗菌药物进行治疗。

哦,原来可以这样写——小学低段“看图写话”案例一则及反思

新“课标”在第一学段写话目标中明确指出：1．对写话有兴趣，写自己想说的话；2．在写话中乐于运用阅读和生活中学到的词语；3．学习使用逗号、句号、问号、感叹号。可见，培养低段学生的写话兴趣是教师的首要任务。

契机,源于一次习作讲评——我的教育叙事

引言：没想到一次普通的作文教学活动,竟解开了好几个结。正如古人所说：＂山重水复疑无路,柳暗花明又一村＂。 一、一次习作讲评 这个单元的课堂作文,主题是：敞开心扉,把自己最想说的心里话在习作里向对方说一说。经过我一番指导,孩子们开始动笔写了起来。或许刚才的启动比较有效,或许这个主题孩子有话可说,