PCR-ELISA检测端粒酶活性的方法及其在人体肿瘤中的应用

目的 :介绍PCR -ELISA端粒酶活性测定方法 ,并对不同组织来源肿瘤端粒酶活性检测结果进行分析。方法 :采用PCR -ELISA端粒酶活性检测方法对299例不同组织来源肿瘤端粒酶活性进行检测。结果 :本组结果显示PCR -ELISA端粒酶活性测定方法在敏感性与特异性方面与国外报道的同位素方法结果一致。在多种人类恶性肿瘤组织中可检出端粒酶活性 ,而与各种肿瘤对应的正常组织及良性病变中则多为阴性。结论 :本组结果提示PCR -ELISA法为一高敏感的半定量评价端粒酶活性的方法 。

肺癌端粒酶活性与临床相关性研究

最近研究表明，端粒酶活化是正常细胞向恶性细胞演化过程中一个至关重要的步骤。对大量不同组织来源恶性肿瘤的研究结果都显示在较高程度上表达端粒酶活性。因此，端粒酶活性有可能成为肿瘤恶性程度评价的一个普适性标志物。端粒酶与肿瘤临床相关性的研究表明，不同组织类...

粘附分子CD44在膀胱癌中的表达

目的 :探讨粘附分子CD44在膀胱移行细胞癌中的表达形式。方法 :应用逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)及Southern印渍杂交方法 ,检测CD44基因在25例膀胱癌和15例非癌膀胱粘膜组织中的表达。结果 :全部膀胱癌和非癌膀胱粘膜组织均表达482bp 的标准型CD44 ,但84 %的膀胱癌组织中同时表达复杂的CD44V异构体 ,其中16例 (64 % )表达约650bp的带型 ,13例 (52 % )表达约1250bp的带型 ,14例 (56 % )表达约1600bp的带型 ,7例 (28 % )表达约720bp的带型。此外 ,在1例膀胱癌组织中检测到大于2000bp 的带型。CD44V在膀胱癌组织中的表达随着分化程度的不良而降低 ,差别有显著性。结论 :多数膀胱癌组织中存在变异型CD44V ,表达形式复杂多样。

硫代修饰型反义寡核苷酸抑制肺癌细胞系端粒酶活性及增殖的研究

目的 了解人肺癌细胞系的端粒酶活性情况。探讨硫代修饰型端粒酶RNA反义寡核苷酸封阻端粒酶RNA ,对癌细胞代谢、生长的抑制作用。方法 采用端粒酶PCRELISA方法检测 8种体外培养人肺癌细胞系端粒酶活性。合成端粒酶RNA的反义硫代寡核苷酸 (6聚体、9聚体、1 2聚体 )和随机序列寡核苷酸 ,分别导入LTEP a 2细胞系 ,作用 72h。采用端粒酶PCRELISA方法检测端粒酶活性、四甲基偶氮唑盐 (MTT)光吸收法检测琥珀酸脱氢酶 (SDH)活性并做细胞增殖计数。结果 8种人肺癌细胞系端粒酶活性均呈不同程度阳性表达。 3种端粒酶RNA反义寡核苷酸对LTEP a 2细胞端粒酶活性、SDH活性及生长增殖均有抑制作用并随浓度升高而增强。 3种反义寡核苷酸 5～ 40μmol/L对细胞端粒酶活性、SDH活性和增殖的抑制率分别为 2 5 7%～ 84 0 %、1 9.4%～ 74.7%和1 4 8%～ 72 .5 %。硫代修饰随机序列寡核苷酸对细胞端粒酶活性、SDH活性及生长增殖无明显抑制作用 ,与 3种反义寡核苷酸抑制作用比较差异有非常显著性意义 (P <0 .0 1 )。结论 人肺癌细胞系呈端粒酶阳性表达 ,反义寡核苷酸可抑制端粒酶活性 。

白细胞介素1对Ⅱ型胶原诱导类风湿性关节炎模型的影响

目的 以Ⅱ型胶原（ｔｙｐｅ Ⅱｃｏｌｌａｇｅｎ，ＣⅡ） 免疫接种ＤＢＡ／１ 小鼠，诱发其多发性关节炎发生，并以白细胞介素１（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ －１，ＩＬ－ １）皮内注射，观察ＩＬ－ １ 对关节炎发生的影响。方法 采用ＣⅡ加弗氏完全佐剂（ｃｏｍｐｌｅｔｅｆｒｅｕｎｄ○ｓ ａｄｊｕｖａｎｔ，ＣＦＡ） 给小鼠行皮内注射，并于ＣⅡ免疫接种后第１８ 天开始，给部分小鼠皮内注射ＩＬ－ １，观察其发病情况。采用ＥＬＩＳＡ 方法检测血清抗ＣⅡ抗体，并对疾病的发生及严重程度进行组织病理学分析。结果 所有接种ＣⅡ和ＣＦＡ 的小鼠均发生了多发性关节炎，而只接种ＣＦＡ 的对照组小鼠无一发病。发病小鼠血清中有高水平的抗ＣⅡ抗体产生。组织学分析结果显示，经ＩＬ－１ 处理的小鼠病变部位病理学改变较未处理者更为严重。结论 ＣⅡ可诱发ＤＢＡ／１ 小鼠产生胶原诱导的关节炎（ｃｏｌｌａｇｅｎｉｎｄｕｃｅｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ，ＣＩＡ） 。ＩＬ－ １ 有促进关节炎形成过程中的各种炎性事件发生的作用。