兽医外科与手术学教学新方式的探讨

兽医外科与手术学是一门应用性极强的学科,掌握该门课程需要学生拥有较高的综合素质。然而传统的教学模式,以灌输式教育为主,教学效果不甚理想。通过课堂教学、实验教学、实践教学、技能大赛中提高及适应社会5个方面对该门学科的教学新方式进行了探究与讨论,旨在提高兽医外科与手术学的教学质量,不断向社会输送高水平人才。

采用同位素稀释高效液相色谱-串联质谱法同时测定银杏叶中5种黄曲霉毒素的研究

建立了一种能够同时测定银杏叶中5种黄曲霉毒素(黄曲霉毒素B_1、黄曲霉毒素B_2、黄曲霉毒素G_1、黄曲霉毒素G_2及黄曲霉毒素M_1)的高效液相色谱-串联质谱定量分析方法。检测结果表明:5种黄曲霉毒素的检测限及定量限范围分别为0.15~0.80μg/kg和0.50~1.50μg/kg;线性范围在0.5~100.0 ng/mL时,R^2≥0.9990;高、中、低加标回收率分别为85.98%~95.21%、88.92%~98.15%和75.34%~87.09%,相对标准偏差≤13.55%。该方法具有检测速度快、灵敏度及回收率高等优点,能用于同时测定银杏叶中5种黄曲霉毒素的含量。

执业兽医制度下《小动物疾病学》课程教学改革与实践

小动物疾病学是培养学生宠物临床实践技能的重要环节,是将兽医学基础理论与宠物临床实际操作相结合的关键课程之一,在兽医专业教学中占有重要地位,在全国农业院校中均受到重视。本文介绍了小动物疾病学课程的现状、课程改革的必要性以及改革与实践,提高了学生对该门课的兴趣和修课率,也提高了毕业生执业兽医资格考试该门课程的得分率和整个考试的通过率,为国家培养新的兽医体制下的合格宠物医疗人才。

T-2毒素和HT-2毒素检测方法的研究进展

T-2毒素和HT-2毒素属于单端孢霉烯族毒素。T-2毒素是A类单端孢霉烯族毒素中毒性最强的一种真菌毒素,HT-2毒素为T-2毒素在体内与体外最为主要的代谢产物,二者在自然界中分布广泛。对T-2毒素和HT-2毒素检测方法的研究进展进行综述,对二者常见检测方法的优点和缺点进行分析,以期为T-2毒素和HT-2毒素检测方法的科学选择提供参考。

基于云技术的教学动物医院远程交互教学平台设计与实践

通过系统化分析现有教学动物医院在实践教学过程中面临的问题,以云技术为基础设计了交互式教学平台。平台通过临床信息数字化,以及LIS、HIS、PACS平台整合与音视频交互,克服了动物医学临床实践教学时间与空间的限制,实现了教学、临床实践和病例档案建设无缝对接,产生了一定的教学效果和社会反响,为大学生创新创业搭建了一个重要平台。

如何将小动物临床技术融入《兽医外科学》

《兽医外科学》是兽医专业本科教育的必修课程之一,具有较强的实践性和应用性。《兽医外科学》在传统教育模式下,无法向社会输送小动物临床专业型人才。因此,在《兽医外科学》的教育过程中,应注重小动物医学专业人才的培养,提高学生的学习兴趣,增强学生的实践能力,为兽医行业输送合格的毕业生。

Keap1-Nrf2/ARE信号通路抗氧化机制及抗氧化剂的研究进展

Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1)-核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路参与抵抗外界氧化应激反应,不仅是抵御氧化损伤的重要防御系统,也是增强机体抗氧化能力的关键信号通路。许多疾病如糖尿病、呼吸系统疾病、癌症、神经退行性疾病和炎症等,均与氧化损伤相关。这些疾病会导致Keap1-Nrf2/ARE信号通路发生紊乱,进而产生严重后果。抗氧化剂可通过调节Keap1-Nrf2/ARE通路,增强机体抗氧化能力,从而减轻氧化损伤。常见的抗氧化剂包括植物多酚类、含硫化合物类和含硒化合物类等,不同抗氧化剂在Keap1-Nrf2/ARE信号通路中发挥不同的作用。论文通过阐述Keap1-Nrf2/ARE分子结构,并分析该通路发挥抗氧化作用的机制,进而讨论不同种类的抗氧化剂通过Keap1-Nrf2/ARE信号通路调节机体抵抗氧化损伤的分子机制,明确Keap1-Nrf2/ARE信号通路在机体里发挥的重要生物学作用。

临床兽医学研究技术的课程改革与探讨

临床兽医学研究技术在兽医研究生和本科生的教育过程中非常重要,掌握这门课程与兽医人才的培养息息相关。通过分析临床兽医学研究技术教学方式的现状以及存在的问题,有针对性得提出相关改革方案并加以探讨,表明该课程的教学方式要随着时代的发展步步改革,以理论结合实际,在老师合理的引导下,提高学生的创新实践意识、自主学习的意识、沟通交流能力,为社会培养出二十一世纪具有创新精神的综合型兽医人才具有重要的意义。

基于cox3基因分析蛇源裂头蚴种系发育关系

为分析野生蛇源裂头蚴与其它绦虫的种群遗传关系,本研究采集湖南省8个地区野生蛇肌肉中的裂头蚴,采用PCR方法对其线粒体cox3基因序列进行扩增、测序及分析。结果显示,湖南省8个裂头蚴分离株cox3基因核苷酸部分序列长度均为342 bp,其cox3基因核苷酸同源性为98.2%~100.0%,种内遗传差异性为0~1.8%,与其它科绦虫cox3基因核苷酸同源性为63.4%~73.9%,种间遗传差异较大,为26.1%~36.6%。cox3基因的系统进化分析结果显示,湖南省8个裂头蚴分离株与已知猬迭宫绦虫位于同一分支,与其它绦虫所属分支相隔较远。上述结果表明,蛇源裂头蚴线粒体cox3基因序列种内差异远低于种间差异,可以作为研究蛇源裂头蚴种系遗传变异的分子标记。本研究为蛇源裂头蚴的分子流行病学及其群体遗传研究奠定了基础。

犬乳头瘤病毒研究概况

犬病毒性乳头瘤(Canine viral papillomatosis)是由犬乳头瘤病毒(Canine papillomavirus,CPV)引起的一种犬传染病,主要感染犬皮肤和黏膜的鳞状上皮(如口腔、唇周、生殖器及皮肤),表现为疣或“花椰菜样”的乳头状瘤,恶化时可转化为鳞状细胞癌。目前国内外对于该病毒的基础、预防及临床研究甚少,对该病毒及所致疾病的认识不足,因此,对CPV的基本生物学特性、现有报道的流行情况、临床症状、检测方法以及目前预防性疫苗研发状况进行综述,为未来深入研究CPV理论基础、临床检测和疫苗研发提供参考。

T-2毒素致猪肾细胞损伤及氧化应激相关机理的研究

试验旨在研究T-2毒素对猪肾细胞(PK15)的毒性作用及其氧化应激反应。用不同浓度的T-2毒素处理细胞,通过MTT法检测细胞活性、测定细胞内乳酸脱氢酶(LDH)释放率及苏木素伊红(HE)染色观察细胞形态变化评估T-2毒素对细胞的毒性作用;通过检测细胞内的活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量及谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性,评估不同剂量T-2毒素对细胞氧化应激水平的影响;检测Nrf2-ARE信号通路相关基因Nrf2、Keap1、GPx-1、Nqo1及Hmox1 mRNA的表达水平,分析T-2毒素对该信号通路的影响。结果表明,PK15细胞活性呈毒素剂量依赖性下降(P<0.05),LDH释放率呈毒素剂量依赖性上调(P<0.05);随T-2毒素剂量升高,细胞间隙逐渐增加,细胞固缩,细胞数量也随之减少。细胞内ROS阳性细胞率呈剂量依赖性升高,且T-2毒素为100 nmol/L时,ROS阳性细胞率显著高于其他剂量组(P<0.05);细胞内MDA含量与GPx活性呈毒素剂量依赖性升高(P<0.05),而GSH含量呈毒素剂量依赖性下降(P<0.05)。20、50及100 nmol/L的T-2毒素可显著上调Keap1、Gpx-1及Nqo1基因mRNA的相对表达量(P<0.05),且50 nmol/L的相对表达量最高。T-2毒素对K15细胞有毒性作用,可诱导其氧化损伤,且该氧化应激过程受Nrf2-AER信号通路调控。

犬圆环病毒检测和致病性的研究进展

犬圆环病毒(Canine circovirus,Canine CV)是2012年首次在美国报道的一种新型哺乳动物圆环病毒。之后,意大利、德国和中国陆续报道检测到该病毒。目前已证实Canine CV可引起犬发生坏死性血管炎和淋巴结肉芽肿,临床表现为出血性腹泻和呕吐等,但该病毒的致病机理尚不清楚。文中主要对Canine CV的检测和致病性研究进展进行综述,为Canine CV的流行病学调查和致病机理研究等提供参考。

一例泰迪犬血小板减少症的诊疗体会

对于犬猫而言,血小板减少症主要表现为循环血液中血小板数量下降,是犬最常见的自发性出血的病因之一,在临床中也是一种常见的获得性凝血障碍。文章对一例泰迪犬血小板减少症的诊断和治疗过程进行阐述和探讨,为临床上类似病例的诊断和治疗提供参考。

饲料中不同脂肪含量对浏阳黑山羊肝功能的影响

[目的]旨在探索饲料中不同脂肪含量对本地浏阳黑山羊肝功能相关生化指标的影响。[方法]选取健康的浏阳黑山羊15只,分为对照组、高脂组Ⅰ和高脂组Ⅱ。根据国际标准方法检测饲料中的脂肪含量,并配制不同脂肪含量的饲料饲喂浏阳黑山羊,其中,对照组饲料中脂肪含量为3.8%,高脂组Ⅰ饲料中脂肪含量为15.2%,高脂组Ⅱ饲料中脂肪含量为7.6%。分别于饲喂后的第0天、第15天、第30天采集血液样本,并检测血清中丙氨酸转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、血清总蛋白(TP)、甘油三酯(TG)和胆固醇(TC)含量。[结果]在饲喂不同脂肪含量饲料30 d后,高脂组Ⅰ与高脂组Ⅱ山羊体重均显著升高(P<0.05),而试验前后对照组山羊体重无显著差异(P>0.05)。血清生化检测结果显示,与对照组比较,高脂组Ⅰ浏阳黑山羊血清中AST、ALP、TP含量显著升高(P<0.05),而ALT、TC及TG含量无显著差异(P>0.05)。高脂组Ⅱ浏阳黑山羊血清中ALT、AST、ALP、TC含量显著升高(P<0.05),TP含量无显著差异(P>0.05),而TG含量显著(P<0.05)下降。[结论]饲料中添加脂肪可促进山羊增重,但添加过多会引起山羊肝功能相关生化指标异常。该试验可为确定饲料中脂肪含量的合理配比提供参考。

混合阳离子固相萃取净化结合UPLC-MS/MS测定蘑菇及生物样本中鹅膏肽类毒素

建立了一种混合阳离子固相萃取净化结合超高效液相色谱串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定蘑菇、尿液及血浆中α-鹅膏毒肽、β-鹅膏毒肽、γ-鹅膏毒肽、二羟鬼笔毒肽和羧基二羟鬼笔毒肽的方法。对于蘑菇样本,烘干粉碎后纯水超声提取,经混合阳离子柱(MCX)净化;对于尿液和血浆样本,乙腈提取后,经PRi ME MCX柱净化。净化的样本以甲醇和5 mmol/L甲酸铵水溶液为流动相,在ACQUITY UPLC BEH C_(18)色谱柱上进行分离,电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式检测,基质匹配外标法定量。结果表明,5种鹅膏肽类毒素在0.5~1000μg/L范围内均呈良好的线性关系,相关系数R^(2)>0.999。方法检出限为0.1~0.5μg/kg(μg/L),定量限为0.5~1.0μg/kg(μg/L);3个加标浓度下的平均回收率为79.1%~103.5%,相对标准偏差(RSD)为0.2%~9.6%。该方法适用于含鹅膏毒肽蘑菇中毒的确证与临床诊断。

T-2毒素的理化特性及其对家禽的毒害作用

T-2毒素是A类单端孢霉稀族毒素中毒性最强的一种真菌毒素,是多种镰刀菌的次级代谢产物,并广泛存在于谷物和动物饲料当中,T-2毒素也成为当前研究的热门课题之一。禽类对T-2毒素比较敏感,摄入剂量和接触时间不同会产生不同的毒性效应。根据不同的接触时间,禽类会出现急、慢性毒性作用,另一方面,T-2毒素能够引起禽类不同系统的毒性,包括消化系统毒性、免疫系统毒性、生殖系统毒性、神经系统毒性等。本文着重论述了T-2毒素的相关信息以及其对禽类的毒性作用。

对T-2毒素造成细胞凋亡的研究探索

T-2可引起细胞发生毒性作用，抑制DNA、RNA及蛋白质合成，还可造成细胞活性下降，细胞内LDH、ALT外漏。T-2可诱导DNA损伤，进而导致DNA碎片化，而DNA碎片化是检测细胞凋亡的指标之一。对于细胞凋亡的机制，尚未研究透彻，但已发现与细胞凋亡相关的蛋白有Caspases家族、Bcl-2家族、p53蛋白等。

猪流行性腹泻病毒检测方法的研究进展

猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea,PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)引起的一种高度接触性传染病。该疫病的爆发流行,给养猪业造成巨大的经济损失。因此,灵敏、快速检测诊断PEDV感染是实施病毒防控措施的关键环节。本文对于近年来检测PEDV的实验室方法进行了总结,包括病毒分离培养鉴定、病毒电镜形态检查、血清中和试验(SNT)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组织化学(IHC)、间接免疫荧光试验(IFA)、免疫层析法(IC)、核酸原位杂交技术(ISH)、反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)、实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)、逆转录-环介导等温核酸扩增技术(RT-LAMP)、纳米颗粒辅助聚合酶链式反应(nanoPCR)等,并分别介绍了不同检测方法在应用中的优缺点,为有效诊断及防治猪流行性腹泻病毒感染提供技术指导。

稳定干扰IFITM1表达的细胞系建立及对PRV、PCV2、TGEV在细胞内复制的影响

为构建稳定干扰(IFITM1)基因表达的猪空肠上皮细胞系J2-KD(knockdown,KD),并研究干扰IFITM1表达后对伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)感染的影响。应用基因克隆技术,构建pLKO.1-EGFP-Puro-IFITM1重组载体,与慢病毒包装质粒共转染293FT细胞,产生绿色荧光蛋白标记的表达IFITMshRNA的慢病毒,48 h后收集病毒上清。用收获的慢病毒感染猪小肠上皮细胞(J2细胞)后,经过嘌呤霉素筛选及细胞有限稀释法,通过RT-PCR鉴定后,获得稳定干扰IFITM1基因的细胞系,并由MTT法验证干扰IFITM1表达对J2细胞生长无影响,将成功构建的干扰IFITM1表达的J2稳定细胞系命名为J2-KD。分别用PCV2、PRV和TGEV感染J2-KD细胞,用实时荧光定量PCR方法检测病毒的复制情况。结果显示,成功建立了稳定干扰IFITM1表达的J2细胞系(J2-KD);在J2-KD细胞中PCV2和TGEV病毒复制拷贝数出现升高,而PRV出现降低的现象。表明,干扰IFITM1基因明显抑制PRV病毒复制,而促进TGEV和PCV2的复制,这为进一步研究猪源IFITM1蛋白功能及阐明其抗病毒分子机制奠定了基础。

利多卡因硬膜外麻醉对犬生理指标的影响及镇痛效果评估

为研究利多卡因硬膜外麻醉对犬生理指标的影响,以及分析和评估不同剂量利多卡因硬膜外麻醉对犬的镇痛效果,试验选择健康中华田园犬9只,分为空白组、低剂量(利多卡因,2 mg/kg)组、高剂量(利多卡因,4 mg/kg)组,按体重以适量丙泊酚进行诱导麻醉,于腰椎与荐椎结合处穿刺进入硬膜外腔,并分别注入不同剂量的利多卡因或生理盐水,通过其对痛觉刺激的反应和生理指标(体温、心率、呼吸频率)的变化来评估麻醉效果,最终确定利多卡因硬膜外麻醉剂量。结果表明:麻醉5 min后高剂量组犬的体温显著低于低剂量组和空白组(P<0.05);麻醉后25~45 min,高剂量组犬的呼吸频率显著高于低剂量组和空白组(P<0.05)。低剂量组犬麻醉5分钟时,对前肢痛觉刺激后心率较刺激前显著升高(P<0.05),而此时对后肢进行痛觉刺激发现,刺激前后心率无显著变化(P>0.05);至麻醉20分钟时,后肢痛觉刺激后心率较刺激前显著升高(P<0.05)。高剂量组犬麻醉10分钟时,前肢痛觉刺激后心率较刺激前显著升高(P<0.05),而此时对犬的后肢进行痛觉刺激犬的心率与刺激前无显著变化(P>0.05);麻醉45分钟时,对后肢进行痛觉刺激后心率较刺激前显著升高(P<0.05),表明高剂量利多卡因硬膜外麻醉对犬后肢的痛觉反射有一定影响,且该影响能维持一定时间。高剂量组犬的后肢痛觉刺激前后心率变化不显著的持续时间要长于低剂量组,而低剂量组长于空白组。三组犬的前肢在麻醉过程中均有痛觉反射,低剂量组后肢在第20分钟开始出现痛觉反射,而高剂量组犬的后肢于麻醉后第40分钟出现痛觉反射。说明4 mg/kg利多卡因进行硬膜外麻醉具有较好的镇痛效果,可用于犬后肢外科手术中疼痛管理。