彝良小草坝乌天麻对东莨菪碱所致记忆障碍模型小鼠的影响及机制研究

目的研究彝良小草坝乌天麻提取物对东莨菪碱所致记忆障碍模型小鼠的影响,为阐明天麻道地性及临床应用价值提供实验依据。方法采用腹腔注射东莨菪碱建立小鼠记忆障碍模型,将ICR小鼠随机分为6组:空白组、模型组、石杉碱甲组、小草坝乌天麻水提物低、中、高剂量组。通过Morris水迷宫实验观察彝良小草坝乌天麻对小鼠记忆的影响差异,并测定海马、皮层组织的乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AchE)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)的活性。结果小草坝天麻水提物能缩短东莨菪碱所致记忆获得障碍模型小鼠的逃避潜伏期及搜索距离(P<0.05),明显增加目标象限时间百分比(P<0.01),提高小鼠脑组织中的乙酰胆碱含量(P<0.01)和SOD活力(P<0.05),降低小鼠脑组织中的MDA含量(P<0.01)。结论小草坝天麻水提物能明显改善模型小鼠的记忆获得能力,其作用与增强胆碱能神经系统功能及增强抗氧化能力有关。

彝良乌天麻最佳采收期初步研究

目的:明确彝良乌天麻的最佳采收期。方法:当年3月采用"三下窝"的方式栽培乌天麻,分别于当年10月、11月和翌年3月采收,测定产量,采用UPLC测定天麻素和对羟基苯甲醇的含量,苯酚-浓硫酸法测定天麻多糖的含量。结果:11月采收的乌天麻天麻素、天麻素和对羟基苯甲醇总含量最高,分别达到了5.813 mg/g和5.951 mg/g,与10月和翌年3月采收的乌天麻存在极显著差异(P<0.01);11月采收的乌天麻多糖含量为21.321 mg/g,显著高于10月和翌年3月(P<0.05)。结论:以乌天麻产量、天麻素、天麻素和对羟基苯甲醇的总含量及天麻多糖作为评价指标,彝良乌天麻的最佳采收期应为11月。研究结果为彝良乌天麻合理采收提供了理论依据。

蜜环菌胞外酶和多糖含量变化规律研究

目的:比较高卢蜜环菌M1、M2两菌株胞外酶活性、菌丝多糖变化规律及菌株生长量,初步筛选出优良菌株。方法:利用改良PDA固体培养基培养菌株M1和M2,采用十字交叉法测定生长量,ABTS法及DNS显色法检测胞外酶活性,用浓硫酸-苯酚法对二者多糖含量进行测定。结果:M1菌株生长速度快,菌索粗壮,分支较多,长势较好。木聚糖酶是蜜环菌主要作用的胞外酶,其活力远高于纤维素酶、漆酶和果胶酶,M1菌株的木聚糖酶活力更高。M1和M2菌丝体多糖含量最高分别为38.958 mg/g和32.717 mg/g,多糖的累积与其分泌的胞外酶漆酶、木聚糖酶活力呈现显著相关性。结论:通过对M1、M2两菌株生长量、胞外酶活力及菌丝体多糖的比较和分析,初步认为M1为优势菌株。

4株蜜环菌菌株鉴定及其对彝良乌天麻产质量的影响

为了保证乌天麻栽培品质提高乌天麻产量,筛选适合彝良小草坝乌天麻伴栽的蜜环菌菌株,该研究选择了4株不同的蜜环菌菌株,首先对其r DNA-ITS、β-tubulin和EF1-α基因片段扩增,并进行系统发育分析,同时采用"三下窝"的方式栽培乌天麻于当年11月采收。测定乌天麻产量并对乌天麻进行简单的蒸制加工,烘干后的粉末使用UPLC测定天麻素和对羟基苯甲醇的含量,苯酚-浓硫酸法测定天麻多糖的含量。结果表明4株蜜环菌菌株为高卢蜜环菌族Armillaria gallica,但伴栽的乌天麻产量和有效成分含量存在差异,在天麻产量方面,M3菌株伴栽的天麻箭麻产量最低,M1箭麻产量最高为0.981 kg·m^-2;在有效成分含量方面,M1菌株伴栽的天麻天麻素质量分数为0.581%,天麻素和对羟基苯甲醇的总量0.595%,二者均高于其他菌株,而天麻多糖质量分数为2.132%,与M3菌株的含量相近,高于M2,M4。以乌天麻产量、天麻素、天麻素和对羟基苯甲醇的总含量及多糖含量作为评价指标,结合蜜环菌的系统发育筛选出彝良乌天麻伴栽的最适菌株为M1,研究结果为彝良乌天麻高产优质、规范化栽培提供了理论依据。