油菜茎基溃疡病菌LAMP-HNB检测方法的建立

油菜茎基溃疡病菌是油菜上最严重的真菌病害之一,是我国重要的检疫性有害生物。因此为防范其危害我国油菜产业生产安全,建立油菜茎基溃疡病菌的快速筛查方法具有重要意义。基于环介导等温扩增法(LAMP),以ITS(内转录间隔区)为靶序列并结合指示剂羟基萘酚蓝(HNB)建立了一种基于颜色判定的简单、快速和灵敏的油菜茎基溃疡病菌的快速检测方法,并对其特异性、灵敏性进行评价以及实际样品进行检测。结果显示,该方法在62℃等温条件下仅需80 min即可通过肉眼直接目测试验结果。LAMP-HNB法与标准PCR检测方法对比显示其具有良好的特异性以及更高的灵敏度,利用该方法对10批油菜籽样品进行检测,共检出5批阳性样品,与标准中PCR检测方法结果一致。该方法的建立为油菜茎基溃疡病菌的检疫鉴定提供了新途径。

利用DNA条形码对10种苍耳属杂草的鉴定

使用ITS、ITS2、psbA-trnH、rbcL和matK等序列对截获的10种苍耳属(Xanthium)杂草进行扩增测序,比较各序列的扩增和测序效率,采用最近距离法和相似性搜索算法评价不同序列的鉴定效率。采用最佳鉴定序列计算种间K2P距离并构建系统进化树。结果表明,ITS、psbA-trnH2个序列的扩增效率和鉴定效率最高;ITS序列的种间变异最大,其次是psbA-trnH序列,matK序列的种间变异最小;ITS序列的NeighborJoining(NJ)树可明显地将不同苍耳属杂草种分开;psbA-trnH序列可明显地将国内苍耳种和检疫性苍耳种分开。说明利用DNA条形码能够准确地鉴别苍耳属杂草,ITS和psbA-trnH序列是鉴别苍耳属杂草较理想的条形码组合。该研究结果为苍耳属杂草的分子鉴别提供了科学依据与新的思路。

一步法逆转录重组酶聚合酶常温扩增技术(RT-RPA)检测大豆花叶病毒

大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV)是一种在全世界广泛分布并且破坏性极大的植物病毒,可以导致大豆产量骤减以及种质的衰退,为此,建立了快速灵敏的一步法逆转录重组酶聚合酶扩增检测技术(RT-RPA),利用该技术可以快速、准确、有效地检测大豆中携带的SMV。根据Gen Bank数据库中SMV的外壳蛋白基因序列,设计RPA特异性引物,采用SMV、BPMV、SBMV、Ar MV及TRSV共5种病毒进行RT-RPA特异性验证;并设计5个模板浓度梯度,验证RT-RPA方法的灵敏性。结果显示,建立的RT-RPA检测方法能够从SMV样品中检测到154 bp的特异性条带;特异性验证试验表明除SMV能检测到特异性条带以外,其他4种病毒BPMV、SBMV、Ar MV及TRSV均未检测到条带;RT-RPA检测SMV的灵敏度达到10-4稀释度。综上所述,本研究建立的RT-RPA方法检测SMV特异性强、灵敏度高,无需特殊的仪器设备,适合实验室或者现场快速检测。

trnH-psbA序列作为DNA条形码在苍耳属杂草鉴定中的应用

以 trnH－psbA序列作为 DNA 条形码，对从国外截获的9种苍耳属杂草及1种国内苍耳进行物种鉴定研究。采用 DNeasy Plant Mini Kit 试剂盒进行总 DNA 的提取，应用通用引物对其 trnH－psbA 基因进行PCR扩增，测序得到10种苍耳属杂草的 trnH－psbA序列，并利用 MEGA 7．0软件进行比对分析构建系统进化树。结果显示：苍耳属杂草 trnH－psbA基因序列共有543个位点，其中有53个变异位点，31个变异信息位点，22个单突变位点，30个碱基缺失；种间遗传距离为0～0．093，种内无遗传差异；进化树显示10个苍耳物种均处于独立分支，能够利用该条形码对苍耳属杂草进行区分鉴定。

我国转基因食品标识制度完善对策

在转基因食品争议越来越大的今天,为保护我国利益,保护消费者知情权及选择权,完善我国转基因食品标识制度十分重要。本文综述了世界范围内主要国家(地区)的转基因食品标识制度,结合我国目前转基因食品标识制度现状,从标识目录范围、阈值设置以及阴性标识管理等方面提出建议和对策。

广东口岸首次截获南非金盏草

3月10日，湛江检验检疫局从澳大利亚进口的大麦中截获多种有害生物，其中一种杂草经专家鉴定，确定其为南非金盏草。此为广东口岸首次截获。

进境美洲大豆检疫性有害杂草与其外观品质性状相关性分析

本文应用相关性分析方法,对16船进境美洲大豆(阿根廷、巴西、美国、乌拉圭)所携带检疫性有害杂草的检出率及含量与其外观品质性状进行相关性分析,结果显示阿根廷大豆检疫性有害杂草检出率与破碎粒呈显著负相关(R=-0.777*);美国大豆检疫性有害杂草检出率与杂质呈极显著正相关(R=0.876**);阿根廷大豆检疫性有害杂草含量与损伤粒呈极显著正相关(R=0.954**);美国大豆检疫性有害杂草含量与破碎粒(R=0.811*)、损伤粒(R=0.771*)呈显著正相关。阿根廷大豆破碎粒、杂质和损伤粒之间均呈显著正相关,美国大豆破碎粒与损伤粒呈极显著正相关。巴西、乌拉圭大豆各项目之间均无显著相关性。

湛江口岸进口油菜籽杂草疫情及检疫对策

对2010-2015年间湛江口岸进口油菜籽携带杂草疫情进行分析,从疫情监管、防控和检疫鉴定方法等方面对进口油菜籽杂草的检疫措施进行了讨论,并对今后的检疫对策提出了建议。

双重DPO-RT-PCR检测南方菜豆花叶病毒及烟草环斑病毒

南方菜豆花叶病毒及烟草环斑病毒是中国进境植物检疫性有害生物,属于大豆种传病害,为提高在进口大豆中两种病毒的检出率,本研究针对SBMV及TRSV基因组中的保守序列,分别设计特异性DPO引物,建立了一种快速检测这两种植物病毒的双重DPO-RT-PCR方法,并对该方法的特异性、灵敏度及退火温度敏感性等性能进行评价。结果表明:该方法能准确地从10种植物病毒中鉴定出SBMV及TRSV,表现出良好的特异性,且检测灵敏度可达0.02 ng·μL^(-1),退火温度为在45~65℃时该方法检测结果无明显差异,表现出对退火温度不敏感的特性。研究结果为进出境植物病毒的高通量检测提供了新的思路。

湛江关区鲜菠萝产业发展及出口对策探讨

菠萝是湛江雷州半岛的重要经济作物,菠萝产业已经成为当地支柱产业之一。本文分析了湛江关区鲜菠萝产业发展现状及出口情况,针对其中存在的问题提出对策建议,以期提升湛江鲜菠萝出口的水平,促进广东湛江菠萝产业快速、稳健发展。

杂草疫情分析在大豆产地溯源中的辅助性应用研究

中国是进口大豆主要消费国,近15年,累计进口大豆90 875万t。由于各国大豆品质不一,征税标准不同,国际大豆贸易中的掺假行为日益凸显。为了进一步完善大豆溯源技术,本研究对2005-2019年进口大豆中携带杂草籽的种类、截获频次、来源国等信息进行整合分析,采用主成分分析和聚类分析方法提取累计贡献率高的主成分,并分析各类杂草是否存在地域差异。结果显示:确定杂草种类981种,其中单一来源国杂草251种。主成分分析提取的前2个因子贡献率达95.41%,可反映进口大豆中携带杂草疫情的绝大多数信息。以上述2个因子为分类变量,对综合因子得分前100的杂草进行聚类分析的结果显示,进口大豆携带的部分杂草地域特征明显,杂草种类与地理位置密切相关,按其来源特征可分为一般性杂草、南美区和北美区3类。如圆叶牵牛(Ipomoea purpurea)等24种杂草在南美洲国家进口大豆中截获率更高,而苘麻(Abutilon theophrasti)等14种杂草在北美洲国家进口大豆中则更加常见,可为进口大豆产地溯源提供辅助性指标,为商品归类属性鉴别业务提供参考依据。

进境油菜籽中苋属杂草籽分离方法研究

苋属杂草是目前分布最广的杂草类群之一。在进境油菜籽中一般携带了大量的苋属杂草籽,其随货物传入我国的风险较高,防控难度大。通过比较不同分离器具对油菜籽中苋属杂草籽的分离效率,为口岸实验室检疫苋属杂草籽提供参考。

花生矮化病毒研究进展

花生矮化病毒是我国进境植物检疫性有害生物,主要侵染花生,也可危害豆科、伞形科、苋科和茄科植物,对寄主植物的整个生长期均可造成影响。该病毒分布于欧洲、北美洲,以及非洲和亚洲的几个国家,在我国局部分布。本文从基本信息、病毒特征、传播途径、寄主范围、地理分布、检测、防治等方面的最新进展进行了综述。

2014—2018年湛江口岸进境大豆疫情分析与建议

本文概述了2014—2018年湛江口岸进境大豆的基本情况,通过对大豆中截获的有害生物名单进行汇总,分析得出截获有害生物319种,5664种次,其中检疫性有害生物34种,707种次,截获频率最高的检疫性有害生物为假高粱和刺蒺藜草。结合新海关新要求,提出应开发智能鉴定系统,研究商品原产地溯源技术,提高进口品质要求的检疫建议,以严防外来疫情传入。

油菜籽中油菜茎基溃疡病菌基因组DNA提取方法对比

比较磁珠法、离心柱法、CTAB法及快速DNA裂解检测试剂对油菜籽中油菜茎基溃疡病菌的检测结果,综合考虑各提取方法的效率及成本。结果显示离心柱法性价比最高,快速DNA裂解检测试剂对油菜籽中油菜茎基溃疡病菌快速筛查具有更佳的应用价值。

油菜茎基溃疡病菌DPO-PCR检测方法的建立

根据油菜茎基溃疡病菌ITS基因序列,设计特异性DPO引物,建立检测油菜茎基溃疡病菌的DPO-PCR检测方法,并对其特异性、灵敏性进行评价。结果显示与常规PCR检测方法相比,DPO-PCR反应对退火温度不敏感,具有更强的特异性。利用该方法对10批油菜籽样品进行检测,共检出5批阳性样品,检测结果与常规PCR一致,为油菜茎基溃疡病菌的检测提供了新方法。

花生矮化病毒和番茄环斑病毒的双重DPO-RT-PCR检测

花生矮化病毒(peanut stunt virus,PSV)和番茄环斑病毒(tomato ringspot virus,To RSV)是我国进境植物检疫性有害生物,存在通过染病大豆传入我国的风险。双启动寡核苷酸引物(dual-priming oligonucleotide,DPO)是一种新型PCR引物,具有特异性高、引物自身及引物间难形成二级结构和对退火温度不敏感等优点(Chun et al.,2007),在多重PCR中引入DPO引物可以有效降低多重PCR体系构建难度,提高多重PCR的特异性。

2005-2019年进境油菜籽携带杂草疫情分析

分析我国2005-2019年从俄罗斯、加拿大、蒙古和澳大利亚4个国家进口的油菜籽中杂草籽截获情况,包括科属种类别、截获种次和截获率,发现主要集中在10类(种)。通过研究各国油菜籽携带杂草疫情,列出截获频率较高的前100种杂草,供一线检疫人员参考,并提出具有针对性的检疫监管建议。

警惕检疫性害虫大洋臀纹粉蚧在中国大陆扩散

大洋臀纹粉蚧(Planococcus minor)是一种近年来入侵我国大陆的检疫性害虫,原仅记载于我国台湾,2008年以来在广西、广东、海南、云南等地被陆续发现。该虫食性杂,为害超过250种水果、经济作物、花卉和园林植物。本文介绍了大洋臀纹粉蚧的基本信息、为害特点、生物学特性、地理分布、寄主范围、国内扩散趋势、口岸截获、风险评估以及防控措施,以期为防止该虫在中国大陆的再次传入及扩散蔓延提供科学依据。

我国进口油菜籽中截获苋属杂草情况概述

我国口岸每年均能截获大量苋属杂草,统计2004—2017年我国口岸在进口油菜籽中截获的苋属杂草种类及种次,结合油菜籽供应国境内及产区苋属植物分布情况,对我国进口油菜籽中苋属杂草的检疫鉴定提出建议。