藜麦FLS基因家族的鉴定、表达及DNA变异分析

【目的】黄酮醇合成酶(FLS)是石竹目植物中多酚类次生代谢的关键酶,为探究FLS基因在藜麦生长发育中的功能,对FLS基因家族进行鉴定和表达分析。【方法】利用生物信息学分析网站,鉴定出CqFLS家族成员,分析其基因结构、蛋白的理化性质、二级结构、三级结构、启动子顺式元件以及系统进化关系等,并通过基因克隆、构建表达载体的方法分析其蛋白表达情况。【结果】共鉴定出3个CqFLSs基因,不均匀分布在2条染色体上,CqFLSs启动子区域包含水杨酸、脱落酸、茉莉酸甲酯和干旱诱导等元件;CqFLS2.1g发现多处InDel和SNP变异,在ch0128871893、28871125、28872881处编码核苷酸删除,且均注释为上游效应,未检测到移码突变;FLS家族系统进化树分析可知,与其他两个基因相比,CqFLS2.1g与CqFLS1.1g、CqFLS3.10g处于不同分支,表达水平也存在差异,CqFLS2.1g可能发生分化;同时,基因表达分析表明,3个CqFLSs基因在青白1号籽粒中整体表达量高于青黑1号和贡扎4号。对克隆出的CqFLS1.1g用0.3 mmol/L的IPTG诱导,在20℃和37℃的条件下均可成功表达。【结论】CqFLS1.1g在花的形成以及籽粒发育过程中发挥作用,而CqFLS2.1g则主要参与藜麦籽粒的形成,CqFLS的表达具有组织特异性,在藜麦生长发育过程中发挥重要的作用。

现代信息技术与英语教学的有效整合

英语教师充分发挥现代信息技术的优势,创设良好的教学情境,激发学生学习兴趣,鼓励学生主动参与学习,培养学生的自主学习能力,优化课堂教学过程,提高课堂效率,从而实现现代信息技术与英语教学的有效整合。

粒用高粱glutelin基因的表达与进化分析

高粱glutelin是一种储藏蛋白,存在于水稻、玉米等禾谷类作物的籽粒中,是不溶于纯水、中性的盐溶液或酒精,但溶于稀碱或稀酸的蛋白质总称。为进一步研究高粱glutelin功能,改善籽粒品质提供基础,通过BLAST Phytozome数据库获得高粱glutelin的DNA和氨基酸序列数据,结合生物信息学方法鉴定到SbGLUA1(So⁃bic.001G143700)、SbGLUA2(Sobic.009G017600)、SbGLUB4(Sobic.009G007100)基因,并对高粱glutelin基因家族信息、基因结构、系统进化树、glutelin不同基因型各组织表达以及glutelin蛋白质理化性质、跨膜、二级结构、三级结构、蛋白互作关系进行分析。结果表明,glutelin蛋白大多不是分泌性蛋白,是亲水蛋白且流动性较差,SbGLUB4的二级结构主要是无规则卷曲和α-螺旋。glutelin蛋白结构域分析结果显示,大多蛋白较为保守;高粱glutelin与小麦谷蛋白同源性较高。SbGLUB4为种子专性表达,且随种子成熟度程度的增加而增加;各基因表达在品种间存在差异,IS22204较Laohanye略高;SbGLUA2在种子、穗等多个器官表达。STRING预测互作蛋白显示,SbGLUB4与多个种子储藏蛋白结构基因及调节基因(如MYB和bHLH)互作,而SbGLUA2与DNA解旋酶、重组酶等互作,推测可能是其功能发生了变化。

油菜叶片营养物质含量和防御酶活性与其对黄宽条跳甲抗性的关系

春油菜是内蒙古地区主要的油料作物,黄宽条跳甲Phyllotreta humilis Weise是春油菜苗期的重要害虫。实验室通过前期研究筛选了2个抗虫品种(‘大黄油菜’和‘太空蒙Ⅳ’)和1个感虫品种(‘青油14’),研究了不同品种油菜营养物质含量和防御酶活性与其对黄宽条跳甲抗性的关系。结果显示,不同抗虫性品种油菜苗期受黄宽条跳甲为害程度为:‘青油14’>‘大黄油菜’>‘太空蒙Ⅳ’,为害最高峰时为害指数分别为0.60>0.46>0.35。3个品种油菜可溶性糖含量为‘青油14’(5.24 mg/g)>‘大黄油菜’(5.10 mg/g)>‘太空蒙Ⅳ’(3.87 mg/g),可溶性糖含量越低,抗虫性越强;叶绿素则与之相反,含量越高抗虫性越强,3个品种油菜叶绿素含量分别为‘青油14’(0.49 mg/g)<‘大黄油菜’(0.78 mg/g)<‘太空蒙Ⅳ’(0.95 mg/g),且差异显著;可溶性蛋白与抗虫性没有明显的相关性。防御酶方面,苯丙氨酸解氨酶(PAL)、过氧化物酶(POD)的活性与抗虫性密切相关,抗虫品种酶活性显著大于感虫品种;多酚氧化酶(PPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性与抗虫性关系不明显。抗虫品种‘太空蒙Ⅳ’胰蛋白酶抑制剂(TI)活性是‘青油14’的1.85倍,胰凝乳蛋白酶抑制剂(CI)活性不同品种间没有差异。油菜对黄宽条跳甲的抗虫性与油菜叶片可溶性糖和叶绿素含量有关,苯丙氨酸解氨酶(PAL)和过氧化物酶(POD)对抗虫性影响大,胰蛋白酶抑制剂活性越高,油菜抗虫性越强。

高粱的玉米黄质环氧化酶基因SbZEP表达与DNA变异分析

类胡萝卜素是维生素A的前体,是决定高粱籽粒营养品质的关键因素。为改良高粱籽粒营养品质,研究利用生物信息学和分子生物学试验方法对参试高粱类胡萝卜素中叶黄素循环的玉米黄质环氧化酶基因进行表达与DNA变异分析。结果表明,SbZEP为亲水性蛋白,亚细胞定位于内质网和叶绿体上;二级结构则以α-螺旋和无规则卷曲为主,SbZEP蛋白三级结构与预测一致,可信度高达90%;系统进化树分析表明,ZEP蛋白划分为6组,高粱与谷子的ZEP基因同源关系更近,同时在演化上有双子叶与单子叶的演化分隔。顺式作用元件分析表明,SbZEP含有光响应以及防御和应激响应元件,可能参与光反应和防御反应过程。高粱叶片发育过程中SbZEP基因的表达量明显增加;SbZEP在高粱种子、胚珠和茎表达水平较高;DNA重测序数据分析表明,SbZEP存在非同义突变,在不同品系对应不同位点的突变,可能与类胡萝卜素的合成与降解相关。

不同杀虫剂对油菜萝卜蚜的毒力、作用机制及在油菜叶片的残留

为有效防治油菜萝卜蚜,科学合理使用药剂,研究不同种类杀虫剂对油菜萝卜蚜(Lipaphis erysimi)的毒力及作用机制,并调查2种杀虫剂拌种后在芥菜型油菜叶片的残留。结果表明,供试的有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂对萝卜蚜的毒力大于拟除虫菊酯类和烟碱类杀虫剂,12种杀虫剂中毒力最大的是灭多威和乐果,致死中浓度(LC_(50))为3.152 mg/L和3.452 mg/L,拟除虫菊酯类杀虫剂中高效氯氰菊酯毒力最大,LC_(50)为10.741 mg/L,氰戊菊酯最小LC_(50)为30.938 mg/L,噻虫嗪和吡虫啉对萝卜蚜的LC_(50)为15.460 mg/L和30.385 mg/L。有机磷和氨基甲酸酯类杀虫剂对萝卜蚜乙酰胆碱酯酶(AChE)有抑制作用,乐果抑制作用最强,抑制中浓度(I_(50))为1.97×10^(-5)mol/L,三唑磷毒力最小,I_(50)为15.51×10^(-5)mol/L。抑制中时间(IT_(50))乐果最小为0.21 min,三唑磷最大IT_(50)最大,为8.30 min。5种拟除虫菊酯类杀虫剂均表现出对萝卜蚜腺苷三磷酸酶(ATPase)不同程度的抑制。当浓度为1×10^(-4)mol/L时,联苯菊酯对萝卜蚜Na^(+)-K^(+)-ATPase的抑制作用最强,抑制率为31.65%,溴氰菊酯对Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase抑制最强,抑制率为38.60%。5种菊酯类杀虫剂都会降低萝卜蚜线粒体膜的流动性从而进一步影响昆虫体内酶活性,且存在一定的剂量浓度效应关系,当浓度为1×10^(-4)mol/L时,高效氯氰菊酯对萝卜蚜线粒体膜流动性影响最大,偏振度P值为0.289;氰戊菊酯影响最小,偏振度P为0.263。毒死蜱和噻虫嗪分别拌种油菜种子后会存在一定的残留期并进一步降低蚜虫危害程度,油菜出苗1周时这两种杀虫剂在叶片含量都达到最高,之后随时间延长含量逐渐降低,到出苗第5周后在叶片中未检测到这两种药剂。合适剂量不同类型的农药对于抑制蚜虫活性,降低虫口密度,具有重要的指导意义。

中医辨证施护对溃疡性结肠炎患者的影响

目的:观察中医辨证施护对溃疡性结肠炎患者的影响。方法:按照随机平行对照研究方法,将符合标准的120例溃疡性结肠炎患者分为两组各60例,对照组采取常规药物治疗与护理,观察组在对照组基础上予中医辨证施护,治疗4周,观察护理前后中医证候积分、中医证候疗效、Baron内镜下溃疡愈合评分。结果:护理前后,通过中医证候积分、中医证候疗效、Baron内镜评分变化情况等方面比较,观察组疗效均优于对照组(P﹤0.05)。结论:中医辨证施护对溃疡性结肠炎患者的干预疗效显著。

高粱ClC基因家族鉴定、表达与DNA变异分析

氯离子通道蛋白(ClC)是存在于生物体细胞膜上一类分布极其广泛的阴离子通道,在抗盐胁迫等多种生理过程中发挥着非常重要的作用。使用生物信息学方法在高粱基因组中鉴定出10个SbClCs基因,对SbClCs基因家族进行基因组鉴定、启动子、保守基序、系统进化树和基因表达分析。结果显示:SbClCs基因家族主要分布在SBI-01、SBI-03、SBI-04、SBI-06、SBI-07、SBI-10共6条染色体上;SbClCs蛋白均为疏水蛋白且流动性较好,多为质膜上的分泌性蛋白,其二级结构主要为无规则卷曲和α-螺旋;基因蛋白结构域分析结果显示,相对较为保守的结构域是Voltage gated和CBS pair voltage gated ClC uk bac,ClC家族成员在蛋白上也都是比较保守的;分析SbClCs基因启动子顺式作用元件后发现都存在光响应元件(Sp1,G-box),除了SbClCg1基因外,其他基因的启动子区均存在干旱诱导相关MYB结合位点(MBS);系统进化树分析显示,高粱ClC与玉米、水稻亲缘关系更近;基因表达热图分析表明,SbClCc3、SbClCa基因对于高粱的耐盐胁迫和抗逆性起着重要的作用;选择进化分析表明,ClC蛋白质编码基因还受纯化选择作用。本研究初步分析了高粱10个氯离子转运蛋白基因的结构与表达,为进一步研究用SbClCs进行遗传转化与分子育种提供了基础。

辨证施护消化性溃疡观察

目的:观察中医辨证施护在消化性溃疡患者的应用效果。方法:选择经胃镜检查确诊的60例消化性溃疡住院患者,随机分为观察组和对照组各30例,观察组给予中医辨证施护,对照组给予一般常规护理,疗程结束后观察评价两组患者的临床症状积分、GIQLI量表各项评分、护理效果。结果:观察组患者的消化道症状中上腹胀满、胃灼热与漕杂、反酸嗳气、恶心呕吐等症状积分(0.51±0.38、0.40±0.48、0.73±0.54、0.30±0.23)均明显低于对照组(P<0.05),GIQLI量表自觉症状、社会活动状态、心理情绪状态、总积分(58.46±4.73、17.21±2.09、23.07±2.55、27.21±2.10、124.85±3.51)评分高于对照组(P<0.05);观察组总有效率90.00%高于对照组总有效率76.67%,差异有显著性(P<0.05)。结论:中医辨证施护可改善消化性溃疡患者临床症状,改善社会活动状态、心理情绪状态,提高患者生活质量,提临床疗效。

一类时间分数阶偏微分方程的同伦分析Sumudu变换解法

本文主要研究同伦分析Sumudu变换方法在求解一类Caputo时间分数阶偏微分方程中的应用。数值算例表明该方法具有较好的准确性和简便性。

高粱杂交种籽粒中功能元素含量差异及相关性分析

利用ICP-MS测定了12个高粱杂交种籽粒中的Fe、Zn、Se、Mn等元素含量,进行了品种差异显著性比较和相关性分析,为创制优质的高粱种质资源和组配杂交种提供理论依据。结果表明,在12个杂交种中,晋杂15号4种功能元素的含量普遍较高,其中,Zn、Se、Mn的含量最高,623A×014-33晚和晋杂20号的Fe含量较高,6A×33的Fe、Zn、Se含量较低;不同品种间Zn元素含量差异显著,而Fe、Se、Mn含量的差异未达显著水平;Fe、Zn、Mn和Cu元素间存在极显著正相关,有协同吸收或运输作用,Fe与Se、Cd和As元素间存在负相关,As与Zn和Se间存在极显著正相关。

高粱MYC基因家族序列、表达模式及自然等位变异分析

高粱蚜(Melanaphis sacchari)和丝轴黑粉菌(Sporisorium reilianum)侵染高粱,导致其生长发育受阻、产量和品质下降。采用生物信息学分析和分子生物学方法,研究高粱发育过程及病虫发生下的MYC基因表达模式变化与自然等位DNA变异,为选育抗逆、高产和优质高粱品种提供参考。结果表明,高粱基因组含28个MYC基因,不均匀分布在10条染色体上,基本螺旋-环-螺旋_MYC_N(basic helix-loop-helix_MYC_N,bHLH_MYC_N)与螺旋-环-螺旋(helix-loop-helix,HLH)结构域是高粱MYC基因的保守结构域。基因表达分析显示,SbbHLH35.7g在叶片中表达水平最高;SbAbaIn在早期籽粒中表达强;SbMYC2.1g在成熟花粉中表达水平高。在抗、感蚜品系5叶期叶片中,显著诱导表达的是SbAbaIn、SbLHW.4g和SbLHW.2g。SbbHLH35.7g在穗组织表达水平最高,且受丝轴黑粉菌侵染显著诱导表达。SbMYCs启动子区包含脱落酸、水杨酸、茉莉酸甲酯和干旱诱导等相关元件,使其更好地响应逆境胁迫。通过分析全基因组重测序数据,鉴定到SbMYCs关键的单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)或插入缺失标记(insertion-deletion,INDEL)变异。SbAbaIn与TIFY结构域蛋白等互作,SbbHLH35.7g与多药剂外泵蛋白(multidrug efflux transporter,MDR)和核转运蛋白(imporin)等互作。高粱蚜和丝轴黑粉菌侵染分别诱导SbAbaIn和SbbHLH35.7g表达,SbAbaIn通过茉莉酸(jasmonic acid,JA)途径诱导相关基因表达,增强抗虫性;SbbHLH35.7g可能通过解毒途径提高抗病性。

藜麦生长素结合蛋白基因ABP1的鉴定与表达分析

生长素结合蛋白ABP1已被证实具有生长素受体功能。以拟南芥(Arabidopsis thaliana)的ABP1为基础,通过BLAST筛选藜麦的ABP1基因、蛋白质序列,并结合生物信息学方法对其理化性质以及亚细胞定位、二级和三级结构、蛋白序列的motif及domain、系统进化树、启动子顺式作用元件进行了分析。结果显示:藜麦基因组有2个编码ABP1基因CqABP1.7g和CqABP1.17g,位于Chr07和Chr17,等电点为6.03到6.35,蛋白质中脂肪族侧链氨基酸含量的相对值为90.88%到96.22%,且亚细胞定位在细胞质、内质网上;二级结构以延伸链、无规则卷曲和α-螺旋为主。藜麦的ABP1与甜菜的同源关系更近,在进化上出现了单双子叶的分化。CqABP1.17g在藜麦花中高水平表达,而CqABP1.7g在籽粒发育过程高水平表达;在CqABP1.17g中发现多个插入缺失(INDEL)变异,CqABP1.7g中只发现1个INDEl变异,未检测到移码突变;预测的互作蛋白有生长素外排载体、鸟嘌呤核苷酸交换因子SPIKE1、含CRIB结构域的蛋白等。该研究结果为进一步探讨CqABP1s基因功能,调控藜麦生长发育提供一定的理论基础与试验依据。

药剂拌种对春油菜幼苗生长及主要害虫虫口密度的影响

通过盆栽和大田试验,研究吡虫啉、毒死蜱、丁硫克百威和氟虫腈4种药剂拌种对油菜苗期生长及油菜主要害虫虫口密度的影响。结果表明:药剂拌种对油菜出苗时间、出苗率无显著影响,毒死蜱和丁硫克百威对根长有显著的促进生长作用,除氟虫腈外其他3个药剂处理可显著促进苗高生长。在幼苗期,吡虫啉和毒死蜱拌种可显著降低黄宽条跳甲虫口密度,且与其他药剂及对照相比较差异显著;在生长期4种药剂处理都可降低萝卜蚜的虫口密度,与对照相比都有显著差异,其中吡虫啉拌种对萝卜蚜虫口密度影响最大;而对小菜蛾虫口密度的影响则以吡虫啉最大,毒死蜱影响最小。

开展“学做合一”英语教学模式的有效策略

针对高职英语教学现状,以"学做合一"的内涵为切入点,探寻"学做合一"教学模式的运用策略。

“学做合一”英语教学模式在高职院校的应用探索

"学做合一"的英语教学模式实现了理论知识教育和实践能力培养及职业素质提高的有机统一。本文阐述了"学做合一"英语教学模式的应用原则,探究了英语教学中"学做合一"教学模式的实际应用。

论亚瑟王传奇故事对英美文学的影响

亚瑟王的传奇故事在欧洲广为流传，它反映了理想化的骑士生活，遥远的、梦幻般的故事使其具有一层神秘的色彩，是欧洲文学史上最早出现的浪漫主义文学。亚瑟王作为大不列颠国王，是一个神秘人物，关于他的英雄传奇有很多版本。在世代相传中，故事的真实性已无从考证，但是凯尔特神话中的英勇和智慧形象以及他所代表的圆桌骑士精神，已成为一种民族精神的象征，在英美乃至整个西欧都有一定的影响。传奇故事的内容丰富、生动，成为英美文学中不可缺少的部分，对后世文学产生了很大的影响。

高粱高亲和硝酸盐转运蛋白NRT2/3基因家族鉴定、表达与DNA变异分析

硝态氮是作物吸收无机氮素的主要形态,硝酸盐转运蛋白2(nitrate transporter 2,NRT2)作为高亲和性的转运蛋白,以硝酸盐作为特异性底物,在可利用的硝酸盐受限时,高亲和性转运系统被激活,在硝酸盐吸收、转运过程中发挥着重要作用。大多数NRT2不能单独转运硝酸盐,需在硝酸盐同化相关蛋白2(nitrate assimilation related protein 2,NAR2)的协助下才能完成硝酸盐的吸收或转运。作物氮利用效率受环境条件影响,品种间存在差异,因此培育高氮素利用效率品种有重大意义。高粱(Sorghum bicolor)具有耐贫瘠特性,对土壤中的氮素吸收和利用效率较高。本研究结合高粱基因组数据库对NRT2/3基因家族成员基因结构、染色体定位、理化性质、二级结构与跨膜结构域、信号肽与亚细胞定位、启动子区顺式作用元件、系统进化、单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)的识别与注释及选择压力进行了全面分析。通过生物信息学分析,筛选出5个NRT2s(命名为SbNRT2-1a、2-1b、SbNRT2-2–4)基因和2个NAR2s(SbNRT3-1–2)基因,较谷子略少。分布在3条染色体上,分为4个亚家族,同一亚族中基因结构高度相似;高粱NRT2/3亲水性平均值均为正值,表明均为疏水性蛋白;α-螺旋和无规则卷曲占二级结构总量的比例大于70%;亚细胞定位均在质膜上,其中NRT2s蛋白不含信号肽,NRT3s蛋白含信号肽;进一步对其跨膜结构域进行分析,发现NRT2s家族成员跨膜结构域个数均大于10个,而NRT3s家族成员跨膜结构域个数为2个;高粱与玉米(Zea mays)NRT2/3s的共线性较好;蛋白结构域显示存在MFS_1和NAR2蛋白结构域,可执行高亲和力硝酸盐转运;系统进化树分析可知,高粱与玉米和谷子的NRT2/3基因亲缘关系更近;基因启动子顺式作用元件分析发现,SbNRT2/3基因的启动子区均具有数个植物激素和逆境应答元件,可以响应高粱生长和环境变化;基因表达热图显示低氮条件下在根诱导表达的是SbNRT2-1a、SbNRT2-1b和SbNRT3-1,推测可在高粱根部表达并调控对硝酸盐的吸收或转运过程。在SbNRT2-4和SbNRT2-1a等发现多个非同义SNP变异;选择压力分析表明,高粱NRT2/3基因家族在进化过程中受纯化选择作用。SbNRT2/3基因表达及蚜虫侵染影响与基因在不同组织中的表达分析结果一致,SbNRT2-1b和SbNRT3-1在感染蚜虫品系5-27sug根部表达显著,高粱蚜虫侵染叶片显著降低了SbNRT2-3、SbNRT2-4和SbNRT3-2的表达水平。本研究初步对高粱全基因组NRT2/3基因家族进行鉴定、表达与DNA变异分析,为高粱氮高效研究提供了基础。

吡虫啉拌种对油菜生长及苗期害虫黄宽条跳甲的影响

采用吡虫啉对春油菜种子进行拌种处理,通过室内盆栽和大田试验,研究拌种后吡虫啉对油菜幼苗生长、营养物质及产量的影响,对黄宽条跳甲的防治效果,以及吡虫啉在油菜幼苗叶片内的降解动态。结果表明,吡虫啉拌种对油菜株高和叶面积均有一定的促进作用,对油菜产量有显著增加作用。在幼苗期,吡虫啉对黄宽条跳甲防治效果随时间延长而加强,21天时达到最高的防治效果(60.98%)后下降。吡虫啉在油菜叶片内含量随时间延长逐渐降低。

不同浓度水杨酸处理对迷你黄瓜货架期生理的影响

以迷你黄瓜为试材,研究不同浓度水杨酸(0.02,0.06和0.1 g/L)对其货架期生理的影响。研究表明,水杨酸处理减慢了迷你黄瓜失重率和VC含量的损失,对可溶固形物含量影响不大。0.02 g/L的SA处理抑制了迷你黄瓜MDA含量和相对电导率的升高,减缓了CAT活性和POD活性的降低,延缓了迷你黄瓜货架期的衰老进程。