尼洛替尼治疗伴V299L突变的慢性髓性白血病二例

本研究提高对尼洛替尼治疗伊马替尼耐药伴V299L突变的慢性髓系白血病(chronic myeloid leukemia,CML)患者的临床认识。收集我院2例伴V299L突变的CML患者尼洛替尼治疗前后的骨髓标本,采用巢式PCR扩增并测序的方法检测ABL突变,分析临床特征。结果表明,2例伊马替尼耐药的CML患者均发生V299L突变,1例经尼洛替尼治疗6个月后V299L突变转为阴性,并取得完全血液学缓解;另1例经尼洛替尼治疗7个月后V299L突变转为阴性,并取得明显分子学缓解。结论:尼洛替尼治疗伊马替尼耐药伴V299L突变的CML患者安全性和疗效令人满意。

噬血细胞性淋巴组织细胞增多症患者血清中新蝶呤的检测及意义

本研究通过检测噬血细胞性淋巴组织细胞增多症(HLH)患者外周血血清中新蝶呤(Npt)水平,探讨其在HLH中的意义。应用酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测20例HLH患者治疗前后和15例正常对照者外周血血清Npt水平及sCD25水平。结果显示,HLH组诊断时血清Npt和sCD25水平分别较正常对照组明显升高(P<0.0001)。HLH组患者治疗后血清Npt和sCD25水平分别较治疗前明显下降(P<0.0001)。将治疗前后Npt水平与sCD25水平分别进行相关性分析,发现两者具有显著相关性(治疗前r=0.81,P<0.05;治疗后r=0.65,P<0.05);与此同时,治疗前Npt水平与血清铁蛋白亦有显著相关性(r=0.55,P<0.05)。结论:血清Npt可能在HLH的发病机制中起着重要作用,其水平的升高对疾病的早期诊断及病情评估具有重要意义。

miR-148b参与调控弥漫性大B细胞淋巴瘤药物敏感性的机制

目的:探讨mi R-148b是否通过调控Ezrin来调节弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞的药物敏感性。方法:诱导建立人DLBCL耐药细胞株CRL2631/CHOP,实时荧光定量PCR检测CRL2631细胞和CRL2631/CHOP细胞的miR-148b表达,Western blot检测2组细胞的Ezrin蛋白表达;采用双荧光素酶实验检测miR-148b与Ezrin的靶向结合情况;采用miRNA模拟/干扰技术和CCK-8方法检测CRL2631/CHOP细胞和CRL2631细胞对CHOP的敏感性。结果:CRL2631/CHOP细胞mi R-148b表达水平显著低于CRL2631细胞(P=0.001);CRL2631/CHOP细胞Ezrin蛋白表达水平显著高于CRL2631细胞(P<0.05);双荧光素酶实验结果显示,Ezrin是miR-148b的直接靶基因;转染mi R-148b mimic后,CRL2631/CHOP细胞的Ezrin和MDR-1蛋白表达量下降(P<0.05),而CRL2631/CHOP细胞对CHOP敏感性增加(P<0.05);转染miR-148b inhibitor后,CRL2631细胞的Ezrin和MDR-1蛋白表达量上升(P<0.05),而CRL2631细胞对CHOP敏感性下降(P<0.05)。结论:mi R-148b通过调控Ezrin影响DLBCL细胞对CHOP的敏感性。

4-1BBL单克隆抗体激发U937细胞NF-κB的核转位及4-1BBL/CD28同型异构分子共定位

本研究探讨共刺激分子4-1BBL逆向信号在人急性单核细胞白血病细胞株U937中的分子机制。选择U937细胞株作为靶细胞,与鼠抗人4-1BBL激发型单克隆抗体1F1(mAb 1F1)共培养。应用激光共聚焦显微镜观察U937细胞株上NF-κB核转位及4-1BBL分子与CD28同型异构分子(CD28i)的共定位;使用流式细胞术及RTPCR检测U937细胞4-1BBL和CD28i的分子表达。结果表明:U937细胞经mAb 1F1刺激后,出现明显的NF-κB核内转位及细胞膜上4-1BBL与CD28i分子的共定位。结论:介导U937细胞生长的4-1BBL逆向信号的传导与NF-κB的核转位相关;CD28i分子可能参与了4-1BBL逆向信号的传导。

慢性粒-单核细胞白血病患者SRSF2基因突变的研究

目的探讨精氨酸／丝氨酸丰富剪接因子2（SRSF2）基因在慢性粒一单核细胞白血病（CMML）患者中的突变情况及其临床意义。方法采用PCR结合测序方法检测20例CMML患者中SRSF2基因突变情况。结果20例CMML患者中4例（20％）伴有SRSF2基因突变，突变全部发生在P95位点，2例为P95L，1例为P95R，1例为P95H。突变组及野生组的临床指标差异均无统计学意义（P值均〉0．05）。结论SRSF2基因突变在CMML中的发生率不高，突变可能与疾病预后差有关，并可能成为CMML新的诊断标志和治疗靶点。

RNA剪接分子突变和髓系血液肿瘤

近年来，随着JAK2、FLT3、NPM1、c—kit以及C／EBP等基因突变的发现，对血液系统肿瘤的本质、预后以及靶向治疗已经有了较为深入的认识。人体细胞的蛋白质合成是一个复杂过程，主要包括复制、转录和翻译三个步骤。而转录后修饰对蛋白质的完整性、多样性和稳定性有重要意义，它发生在转录和翻译过程之间，其关键步骤是RNA剪接，选择性剪接通过改变外显子的组成保证了基因的多样性，

血清新蝶呤与腺苷脱氨酶在继发性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症患者中的临床意义

目的 探讨继发性噬血细胞性淋巴组织细胞增多症（sHLH）患者血清中新蝶呤（Npt）及腺苷脱氨酶（ADA）的水平及临床意义.方法 收集39例初诊sHLH患者血清及其中10例治疗后获得临床缓解患者的血清和15例健康人的血清.采用ELISA方法检测血清Npt水平,用速率法测定血清ADA活性.结果 39例初诊sHLH患者血清Npt水平及ADA活性均显著高于正常对照组[Npt：（164.6±90.0）nmol/L比（7.9±3.6） nmol/L; ADA：（117.2±70.2） U/L比（11.6±4.0） U/L;P值均＜0.001].10例获得临床缓解的sHLH患者治疗后血清Npt水平及ADA活性均较治疗前显著下降[Npt：（17.5±10.9） nmol/L比（170.6±117.9） nmol/L;ADA：（22.5±15.5） U/L比（98.8±52.6）U/L;P值均＜0.05].sHLH患者血清Npt水平与血清可溶性IL-2受体（sCD25）及铁蛋白呈正相关（r =0.526、0.507）,血清ADA活性与乳酸脱氢酶呈正相关（r=0.646）.血清Npt以148.1nmol/L为最佳临界值时,其判断淋巴瘤相关噬血细胞性淋巴组织细胞增多症（LAHS）的敏感度和特异度分别为70.0％和78.9％;ADA以103.1 U/L为最佳临界值时,其判断LAHS的敏感度和特异度分别为75.0％和84.2％;Npt和ADA联合检测的敏感度为90.0％,特异度为94.7％.结论 血清Npt和ADA在sHLH患者的诊断及疗效评估等方面具有重要意义.Npt和ADA可以为疑似LAHS患者提供新的参考指标.

血清可溶性白细胞介素-2受体在急性白血病的表达及临床意义

目的:探讨血清可溶性白细胞介素-2受体sCD25在急性白血病(AL)的表达及其临床意义。方法:收集127例AL患者外周血清标本,以10例正常体检者为对照,ELISA法检测2组血清sCD25水平。收集患者细胞遗传学/分子遗传学数据、骨髓原始细胞百分比、白细胞计数(WBC)、血小板计数、乳酸脱氢酶(LDH)、血清铁蛋白(SF)、血沉,并对患者进行随访。结果:1初诊AL患者血清sCD25水平明显高于对照组(P<0.01);2初诊AL患者中AML-M3患者血清sCD25水平明显低于M2及非M2/3组(P<0.05),初诊患者中低/中危组+标危组血清sCD25水平明显低于高危组(P<0.05);3治疗后完全缓解(CR)的AL患者血清sCD25水平明显低于初诊AL患者(P<0.01);4初诊AL患者血清sCD25水平与WBC、LDH、SF均呈正相关;5低sCD25组(sCD25<2 000pg/ml)与中sCD25组(2 000≤sCD25≤4 000pg/ml)的总生存期差异无统计学意义(P=0.507),但2组均较高sCD25组(sCD25>4 000pg/ml)具有更长的总生存期(均P<0.05)。结论:血清sCD25在AL患者的病情活动、疗效评估及预后等方面具有重要的临床意义。

儿童传染性单核细胞增多症与急性化脓性扁桃体炎早期鉴别指标及相关性分析

目的探讨儿童传染性单核细胞增多症(IM)与急性化脓性扁桃体炎(AST)的早期鉴别指标及相关性,为临床诊断提供参考依据。方法选取2021年1月—2022年6月温州医科大学附属第二医院收治的IM儿童130例(IM组)和AST儿童100例(对照组)作为研究对象。对2组患儿的临床资料及实验室相关检测指标水平进行分析比较,通过ROC曲线分析联合多个指标对IM早期诊断的价值,使用Spearman相关性分析分析各实验室指标之间的相关性。结果临床表现上,IM组体温<39℃、眼睑浮肿、颈部淋巴结肿大、扁桃体分泌物占比均明显高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。感染早期,IM组CRP、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)、单核细胞与淋巴细胞比值(MLR)、CD4^(+)/CD8^(+)值、前白蛋白(PA)、C反应蛋白与前白蛋白比值(CRP/PA)、C反应蛋白与白蛋白比值(CAR)均低于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。IM治疗后,CRP、WBC、MLR、CRP/PA及CAR水平均下降,NLR与PA水平升高,与治疗前比较差异有统计学意义(P<0.05),而ALB水平治疗前后差异无统计学意义。ROC曲线显示,联合检测的AUC为0.988,均高于单独检测。NLR与CRP、CAR呈正相关关系(r=0.431、0.433,均P<0.05);CRP/PA与NLR呈正相关关系(r=0.443,P<0.05),与PA呈负相关关系(r=-0.340,P<0.05)。结论IM与AST的早期鉴别难度较大,易出现误诊情况,可通过CRP、NLR、MLR、CD4^(+)/CD8^(+)、PA、CRP/PA和CAR等实验室指标及临床表现(体温<39℃、眼睑浮肿、颈部淋巴结肿大、扁桃体分泌物)进行评估与比较,联合运用各指标对IM早期诊断与疗效评估具有较大的应用价值,可为临床提供辅助。

CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞在急性白血病患者中的变化

目的通过分析急性白血病患者发病时以及缓解时外周血CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的数量以及功能变化,进一步了解急性白血病患者免疫功能状态。方法使用流式细胞分析外周血CD3^-CD56^+NK细胞及CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的数量,同时分析上述两群细胞内的干扰素表达水平来评估细胞的功能。结果CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞数量在急性白血病发病时显著增加,经化疗获得完全缓解后数量又下降到正常健康人水平,并且无论在发病时还是缓解时CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞内干扰素水平均明显下降。CD3^-CD56^+NK细胞的变化有所不同,在发病时数量以及功能改变均不明显,而在疾病缓解时,急性淋巴细胞白血病患者CD3^-CD56^+NK细胞的数量下降明显,急性髓系白血病患者CD3^-CD56^+NK细胞的功能下降明显。结论急性白血病患者发病时可能产生免疫反应,但免疫细胞功能缺陷可能参与疾病的发生进展,其中CD3^+CD56^+NKT样淋巴细胞的变化可能与疾病的关系更密切,且急性髓系白血病患者免疫细胞功能异常更明显。

长链非编码RNA-CRNDE在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及功能研究

目的:探讨LncRNA-CRNDE在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者中的表达及临床意义。方法:通过SYBR GreenⅠ荧光实时定量聚合酶链反应(RQ-PCR)方法,检测69例初发DLBCL患者和21例淋巴结反应性增生(RLH)患者外周血中LncRNA-CRNDE的表达量,分析LncRNA-CRNDE的表达量与临床特征之间的关系。结果:(1)69例DLBCL患者外周血中LncRNA-CRNDE的表达量明显高于RLH组(P<0.01);(2)DLBCL组患者治疗后LncRNA-CRNDE的表达量较治疗前明显下降(P<0.01);(3)DLBCL患者中LncRNA-CRNDE的表达与患者B症状(发热、消瘦、盗汗等全身症状)、Ann Arbor分期、国际预后指数(IPI)及化疗敏感性有关(P<0.01);(4)DLBCL患者中高表达LncRNA-CRNDE组的中位无进展生存时间较低表达组明显缩短(P<0.01);(5)Cox回归分析显示,LncRNA-CRNDE的表达及化疗敏感性是影响DLBCL患者预后的独立危险因素(P<0.01)。结论:LncRNA-CRNDE高表达与DLBCL预后不良相关,LncRNA-CRNDE未来可作为预测DLBCL患者预后的生物标志物。

血管紧张素Ⅱ及血管内皮生长因子在急性髓系白血病中的表达及临床意义

目的探讨血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)和血管内皮生长因子(VEGF)在急性髓系白血病中的表达及临床意义。方法通过RQ-PCR方法检测AngⅡ与VEGF基因的表达量。分别比较初发组、CR组、NR组及对照组之间AngⅡ与VEGF基因的表达量的差异。结果AML初发组及NR组骨髓中AngⅡ与VEGF基因表达量明显高于对照组(P<0.01),初发组和NR组相比无统计学意义(P>0.05);CR组的AngⅡ及VEGF表达量较初发组明显下降,与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。在年龄、性别、白细胞、血红蛋白、血小板及FAB分型上,AngⅡ与VEGF基因高、低表达组之间差异无统计学意义(P>0.05)。55例AML患者AngⅡ和VEGF基因高、低表达组之间的CR率及总生存时间差异无统计学意义(P>0.05)。初发AML患者中AngⅡmRNA与VEGFmRNA之间的表达量呈正相关(r=0.28,P<0.01)。结论AngⅡ与VEGF可能是AML的独立的预后因子,为通过拮抗AngⅡ与VEGF作为AML的新的靶向治疗提供新的依据。

SRSF2 mutation in patients with chronic myelomonocytic leukemia

Objective To investigate SRSF2 mutations in patients with chronic myelomonocytic leukemia(CMML)and the clinical characteristics of patients with SRSF2mutants.Methods In this study,the frequency of SRSF2mutation in a cohort of 20 patients with CMML was detected by polymerase chain reaction(PCR)followed by