苦参碱对CVB_3感染CMVECs的保护作用

目的:研究苦参碱对CVB_3感染CMVECs的保护作用。方法:采用倒置显微镜观察CMVECs形态,CCK8检测细胞活性,选择苦参碱最佳干预时间点和稀释浓度。在最佳条件下通过免疫荧光法、western blot法检测内皮细胞标志物CD31的表达。结果:苦参碱最佳干预时间点和浓度是:72 h,0.012 5 mg/L。与空白对照组比较,CVB_3组CMVECs形态固缩、变异,内皮细胞标志物CD31表达减少;与CVB_3组比较,CVB_3+苦参碱组CMVECs形态趋于正常,CD31表达增强。结论:苦参碱对CVB_3感染CMVECs具有保护作用,增加内皮细胞功能可能是其作用机制。

丹参化学成分在心血管疾病中的研究进展

丹参作为心血管疾病中的常用中药,其化学成分的药理机制是目前研究的重点之一。本文主要分析、归纳和总结了近年来科研工作者对丹参化学成分在心血管疾病中的相关研究,为丹参化学成分在心血管疾病的临床诊治上提供一定的参考。同时也指出了目前存在的缺陷和今后应该的发展方向。

清心饮对柯萨奇B_3病毒感染心脏微血管内皮细胞的保护作用

目的研究清心饮对柯萨奇B_3病毒(Coxsackievirus B_3,CVB_3)感染心脏微血管内皮细胞(cardiac microvascular endothelial cells,CMVECs)的保护作用。方法采用RT-PCR检测CVB_3 RNA,应用倒置显微镜观察CMVECs形态,CCK8检测细胞活性,选择清心饮最佳干预时间点和稀释浓度。在最佳条件下通过免疫荧光法、Western blot法检测内皮细胞标志物CD31,间充质细胞标志物a-SMA的表达。结果 CVB_3能在CMVECs中持续性复制,清心饮最佳干预时间点和浓度分别是72 h和20%含药血清。与空白组比较,CVB_3组CMVECs形态固缩、变异,CD31表达减弱,a-SMA表达增强;与空白血清组比较,清心饮血清组CMVECs形态趋于正常,CD31表达增强,a-SMA表达减弱。结论清心饮可抑制CVB_3感染CMVECs发生内皮细胞转分化,对CMVECs具有保护作用。

清心饮抑制CVB3感染心脏内皮细胞发生EndMT的作用机制研究

目的探讨清心饮含药血清通过调控Pyk2-PI3K-AKT信号通路抑制柯萨奇B3病毒(CVB_3)感染心脏微血管内皮细胞(CMVECs)向间充质细胞转分化(EndMT)的作用。方法选取稳定培养的心脏CMVECs,以100TCID_(50)CVB_3进行感染,采用20%清心饮含药血清进行干预(期间设立Pyk2抑制剂-TAE226和PI3K抑制剂-LY294002进行干预)。通过免疫荧光(IF)、蛋白质印迹(Western blot)、聚合酶链式反应(PCR)等实验方法检测内皮细胞标志物血小板/内皮细胞粘附分子-1(CD31)和间充质细胞标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA),富含脯氨酸的酪氨酸激酶2(Pyk2)、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)蛋白及基因的表达。结果与空白对照组比较,模型组CD31蛋白表达下调,α-SMA蛋白表达上调(P<0.05),Pyk2,PI3K,AKT蛋白均表达下调(P<0.05)。与空白血清组比较,20%清心饮含药血清组CD31蛋白表达上调,α-SMA蛋白表达下调(P<0.05);Pyk2,PI3K,AKT表达上调(P<0.05)。与20%清心饮含药血清组比较,Pyk2抑制剂组PI3K,AKT表达下调(P<0.05),CD31蛋白表达下调,α-SMA蛋白表达上调(P<0.05);PI3K抑制剂组AKT表达下调(P<0.05),CD31蛋白表达下调,α-SMA蛋白表达上调(P<0.05),而Pyk2表达无明显变化(P>0.05)。通过PCR亦发现,Pyk2,PI3K,AKT mRNA与Western blot法蛋白表达趋势一致。结论20%清心饮含药血清可通过调控Pyk2-PI3K-AKT信号通路抑制CVB_3感染CMVECs发生EndMT。