芝麻素对长春瑞滨诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的影响

[目的]探讨芝麻素对长春瑞滨诱导人肺腺癌A549细胞株凋亡的影响.[方法]选择人肺腺癌A549细胞株进行体外传代培养,制备成浓度为1.0×105个/mL的细胞悬浮液并接种于96孔板中.实验设空白组(加入DMEM培养液)、对照组(加入DMEM培养液及人肺腺癌A549细胞株)、芝麻素组(芝麻素10、20、30、40、50、60、70、80、90、100μg/mL)、长春瑞滨组(长春瑞滨5、10、15、20、25、30、35μg/mL)及联合用药组(加入IC50浓度的芝麻素和长春瑞滨,IC50为后续联合用药组实验药物浓度).空白组加入160μL的DMEM培养液,对照组及实验组各加入160μL已制备好的人肺腺癌A549细胞株悬浮液,待细胞株贴壁后,空白组、对照组及实验组分别加入20μL的生理盐水和20μL各相关浓度的药物.采用MTT法检测细胞增殖能力,利用倒置显微镜及HE染色法观察细胞形态学变化,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况.[结果]在10~100μg/mL质量浓度范围内,低质量浓度的芝麻素具有抑制A549细胞株增殖的作用,IC50质量浓度为40μg/mL;在5~35μg/mL质量浓度范围内,长春瑞滨具有抑制A549细胞株增殖的作用,且随着药物质量浓度升高细胞抑制率升高,IC50质量浓度为20μg/mL;芝麻素与长春瑞滨联合用药对A549细胞株的抑制率明显高于单药用药(P<0.01).倒置显微镜及HE染色法观察结果显示,与对照组比较,芝麻素(40μg/mL)、长春瑞滨(20μg/mL)及联合用药(芝麻素40μg/mL+长春瑞滨20μg/mL)作用于A549细胞株48 h后贴壁细胞数量均明显减少,细胞间连接疏松,贴壁能力减弱,部分细胞体积变小、变圆或呈不规则形,核染色质凝集,细胞膜起泡形成凋亡小体,失去原有肿瘤细胞多角形或梭形形态,且联合用药组较单药组上述变化更为明显.流式细胞仪检测结果显示,药物作用48 h后,芝麻素组(40μg/mL)、长春瑞滨组(20μg/mL)及联合用药组(芝麻素40μg/mL+长春瑞滨20μg/mL)细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01),且联合用药组早期凋亡率明显高于单独用药组(P<0.01).[结论]芝麻素可增强长春瑞滨诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的作用.

PrxⅤ在芝麻素增强吉西他滨诱导的肺癌细胞凋亡中的作用机制

[目的]探讨PrxⅤ在芝麻素增强吉西他滨诱导的人肺腺癌A549细胞凋亡中的作用机制,旨在为肺癌的治疗提供靶点.[方法]取人肺腺癌A549细胞株体外培养48 h,采用MTT法检测不同浓度吉西他滨及芝麻素作用下的A549细胞的存活率,并计算半数抑制浓度.[结果]吉西他滨、芝麻素作用于人肺腺癌A549细胞的半数抑制浓度分别为7、45μmol/L.划痕实验结果显示联合用药组划痕修复率显著低于单用药组(P<0.05,P<0.01).TUNEL染色结果显示联合用药组凋亡细胞数显著高于吉西他滨组和芝麻素组(P<0.01).JC-1荧光探针标记检测结果显示联合用药组细胞中线粒体膜电位降低幅度显著高于吉西他滨组和芝麻素组(P<0.05).荧光探针DCFH-DA检测结果显示吉西他滨组和芝麻素组细胞ROS水平显著低于联合用药组.蛋白印迹实验结果显示吉西他滨和芝麻素均可抑制A549细胞中PrxⅤ表达,联合用药组抑制作用更为显著.[结论]吉西他滨和芝麻素均可抑制人肺腺癌A549细胞的增殖和迁移,且芝麻素可增强吉西他滨的上述作用;吉西他滨可降低PrxⅤ表达,从而减弱PrxⅤ对人肺腺癌A549细胞的保护作用,芝麻素可增强吉西他滨的这一作用;吉西他滨和芝麻素可降低人肺腺癌A549细胞内PrxⅤ表达,升高细胞内ROS水平,降低线粒体膜电位,从而使细胞发生凋亡.