Anti-CD11b单克隆抗体对超高分子聚乙烯磨损颗粒诱导骨溶解作用的研究

目的通过建立小鼠颅骨溶解模型,探究anti-CD11b抗体对颗粒诱导骨溶解的作用。方法取10周龄雌性C57BL/6J小鼠32只,平均分为4组,A(空白对照组),切开颅顶皮肤后即缝合,于术后第二天灌胃生理盐水,并尾静脉注射PBS,B[脾酪氨酸激酶(Spleen tyrosine kinase,Syk)抑制剂组]、C(anti-CD11b单克隆抗体组)和D(颗粒组)组于颅骨骨膜外移植20μg超高分子聚乙烯磨损颗粒后缝合,B组术后第2天起以15 mg/kg灌胃Syk抑制剂,尾静脉注射PBS,C组术后第2天起尾静脉注射anti-CD11b单克隆抗体,2 g/kg,灌胃生理盐水,D组术后第二天起每日灌胃生理盐水,尾静脉注射PBS。两周后颈椎脱臼法处死小鼠,摘眼球取血测血清肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)值,取颅骨做显微CT重建并测骨体积分数,取颅骨骨膜进行western blot分析。结果建模小鼠全部存活,空白对照组、anti-CD11b单克隆抗体组及Syk抑制剂组血清TNF-α值均低于颗粒组(P<0.05);空白对照组、anti-CD11b单克隆抗体组与Syk抑制剂组骨体积分数均高于颗粒组(P<0.05);Syk抑制剂组及anti-CD11b单克隆抗体组Erk活性、c-fos及NFATc1表达均低于颗粒组而高于空白对照组(P<0.05)。结论 AntiCD11b单克隆抗体及Syk抑制剂均对颗粒诱导骨溶解具有抑制作用,CD11b分子通过激活Syk通路而发挥促破骨细胞分化作用。

Mac-1在破骨细胞分化中的作用

目的:探究巨噬细胞分化抗原1(Mac-1)分子在核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导的破骨细胞分化中作用的分子机制。方法:取4周龄C57BL/6J小鼠脾细胞,用RANKL及巨噬细胞集落刺激因子(MCSF)诱导,同时用抗CD11b及抗CD18的特异性抗体进行处理,1周后对细胞核和细胞骨架进行染色;用抗CD11b抗体、干扰CD11b基因的慢病毒及其对照空载病毒处理RANKL诱导的破骨细胞,1周后对细胞进行免疫荧光染色;取4周龄C57BL/6J小鼠脾细胞用RANKL及M-CSF诱导,同时用抗CD11b抗体、干扰CD11b的慢病毒及其对照空载病毒分别进行处理,1周后提取总蛋白进行Western blot检测。结果:CD11b抗体组和双抗体组的多核细胞形成率低于对照组和CD18抗体组,双抗体组和CD11b抗体组之间多核细胞形成率的差异不具有统计学显著性;免疫荧光双标结果显示病毒组的CD11b、Syk及NFATc1表达强度均低于对照病毒组,CD11b抗体组的CD11b、Syk及NFATc1表达强度均低于对照组;Western blot结果显示,CD11b抗体组的CD11b、Syk、NFATc1、c-Fos及p-ERK/ERK水平均低于对照组,病毒组的CD11b、Syk、NFATc1、c-Fos及p-ERK/ERK水平均低于对照病毒组。结论:Mac-1分子中CD11b亚基对破骨细胞分化具有促进作用。该分子通过激活下游Syk通路,上调c-Fos,增加ERK活性,最终上调NFATc1而促进破骨细胞的分化。

TRPV4离子通道在RANKL诱导的破骨细胞分化中的作用

破骨细胞(osteoclast,OC)来源于血液单核-巨噬细胞系统,其以多核细胞形式发挥作用。破骨细胞在分化过程中受多种信号通路的调控,其中,由核因子受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-κB,RANK)及其配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)以及骨保护素(osteoprotegefin,OPG)组成的RANK-RANKL-OPG系统起到关键作用,而该通路的调控效应主要通过Ca2+-NFATc1信号轴实现。瞬时感受器电位香草酸受体4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)是瞬时感受器电位通道(transient receptor potential,TRP)超家族的成员,该通道介导的钙离子内流维持了破骨细胞内钙离子浓度,确保了RANKL介导的NFATc1调控的基因转录,在破骨细胞的终末期分化中发挥着关键作用。因此,全面了解TRPV4离子通道将有助于临床更好地分析各种骨代谢性疾病的病因及发病机制,进而为治疗提供理论依据。

Fe_2O_3-HNTs杂化材料的制备及其对环氧树脂涂层性能的影响

通过化学沉淀法实现了纳米三氧化二铁(Fe_2O_3)在埃洛石纳米管(HNTs)表面的均匀负载,得到相应的Fe_2O_3-HNTs杂化材料。通过X射线衍射仪(XRD)、热重分析仪(TGA)以及扫描电子显微镜(SEM)等对负载效果进行了表征。然后利用硅烷偶联剂KH560对Fe_2O_3-HNTs杂化材料进行表面改性处理,并与环氧树脂复合,制得Fe_2O_3-HNTs/EP复合涂层。通过摩擦磨损试验、电化学阻抗谱(EIS)测试分析了该复合涂层的耐磨性及耐蚀性。结果表明:与纯环氧树脂涂层相比,Fe_2O_3-HNTs/EP复合涂层在耐磨性,韧性,抗腐蚀介质渗透等方面都有所提高。

非骨水泥型与骨水泥型胫骨平台假体在人工全膝关节置换中的中短期临床疗效比较

背景:目前,骨水泥型全膝关节置换术仍是全膝关节置换(total knee arthroplasty, TKA)的金标准,但随着假体制造工艺的提高,尤其是小梁金属在关节假体中的应用,逐渐克服了早期非骨水泥型TKA缺点,理论可获得更高的生存率,但其临床效果尚存争议。目的:比较非骨水泥钽金属一体化胫骨平台(tantalum monoblock tibial component, TMT)与骨水泥型胫骨平台在全膝关节置换中的中短期临床疗效。方法:回顾性研究2012年7月至2016年7月获得随访的440例因膝关节骨关节炎选用同系列股骨假体的TKA患者术后临床效果,其中,234例患者选用TMT,共350个膝关节;206例患者选用骨水泥型胫骨平台假体,共332个膝关节;比较分析两组术后关节活动度、KSS评分、VAS评分、WOMAC评分、SF-36评分、术后X线评价、并发症及中短期假体生存率。结果:两组术后ROM、KSS、VAS、WOMAC、SF-36等评分比较无统计学差异(P> 0.05); TMT组假体周围关节感染(periprosthetic joint infection, PJI)发生率较骨水泥组低(P=0.03),术后其他并发症及假体生存率方面两组间无统计学差异(P>0.05);末次影像学检查两组均未见>1 mm或进行性发展的透亮线,TMT组术后早期透亮线逐渐消失,展现出良好的骨长入特性;两组胫骨平台β角(胫骨假体内翻角)、δ角(胫骨假体后倾角)无统计学差异(P>0.05)。结论:与骨水泥型胫骨平台比较,TMT并未增加TKA术后膝关节早期功能锻炼的失败率,二者在临床效果、影像学评价等方面无统计学差异;但应用TMT的患者PJI发生率较低,并展现出良好的骨长入特性,因而理论上可获得更高的长期假体生存率。

CD11b表达与人工髋关节置换术后无菌性松动的相关性分析

目的:分析髋关节周围滑膜组织CD11b表达水平与人工髋关节置换术后无菌性松动的相关性。方法:以2006年5月至2016年5月于西京医院接受人工髋关节置换的患者为研究对象,对其髋关节周围滑膜组织进行CD11b免疫组化染色,并随访术后5年和10年无菌性松动的发生情况,通过单因素分析及logistic回归分析讨论CD11b表达与无菌性松动之间的相关性。结果:共300例患者纳入研究,全部获得随访,CD11b表达阳性患者163例,阳性率为54.33%;术后5年松动患者29例,术后5年无菌性松动发生率为9.67%;术后10年无菌性松动患者49例,术后10年无菌性松动发生率为16.33%;单因素分析结果表明CD11b表达阳性患者5年及10年松动率均高于CD11b表达阴性患者(P<0.05);logistic回归分析结果表明CD11b过表达是髋关节置换术后无菌性松动发生的危险因素。结论:髋关节周围滑膜组织CD11b过表达是人工髋关节置换术后无菌性松动发生的危险因素,该分子或可作为无菌性松动的辅助诊断指标及潜在治疗靶点。

巨噬细胞分化抗原-1通过脾酪氨酸激酶通路促进破骨细胞分化

目的探讨巨噬细胞分化抗原-1（Mac-1）分子在核因子-κB受体活化因子配体（RANKL）诱导下破骨细胞分化中的作用。方法用RANKL及巨噬细胞集落刺激因子（M-CSF）诱导C57BL/J6小鼠脾细胞，并使用抗CD11b及CD18抗体进行处理，1周后进行抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色，测定细胞TRAP染色阳性率并进行统计学分析；用相同方法于载有骨片的96孔板上培养破骨细胞，利用抗CD11b、CD18抗体，干扰CD11b基因表达的慢病毒及其对照空载病毒转染，对骨片进行扫描电镜拍照并计算骨陷窝面积；提取各组细胞总核糖核酸（RNA）并进行反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR），测定各组蛋白质对应信使RNA（mRNA）表达水平。结果对照组、抗CD11b抗体组、抗CD18抗体组及双抗体组平均每孔TRAP阳性细胞数分别为（29.5±4.7）、（17.1±3.8）个（P＝0.026）、（26.2±5.1）个（P＝0.124）、（19.4±4.3）个（P＝0.018），骨陷窝面积分别为（6.1±3.4）、（2.2±1.1）10－2 mm2/片（P＝0.011）、（5.8±2.9）10－2 mm2/片（P＝0.124）、（2.4±1.3）10－2 mm2/片（P＝0.027），对照病毒组及病毒转染组骨陷窝面积分别为（5.6±3.2）、（1.3±0.9）10－2 mm2/片（P＝0.006）；相对于对照组和抗CD18抗体组，抗CD11b抗体处理的两组活化T细胞核因子-1（NFATc1）、脾酪氨酸激酶（Syk）和c-Fos mRNA表达下调。与对照病毒组比较，病毒转染组NFATc1、Syk和c-Fos mRNA表达下调。结论Mac-1分子通过其亚基CD11b上调Syk与c-Fos，促进NFATc1的表达，最终发挥促破骨细胞分化效应，而CD18亚基不具备促进作用。

非骨水泥型全膝关节置换术的临床应用进展

目前,膝关节健康对人们生活质量的影响越来越大,而全膝关节置换术对终末期膝关节骨性关节炎的疗效已得到肯定。近年来,骨水泥型膝关节假体置换仍为主流术式,但已有多项研究证实了骨水泥和无菌性松动之间的联系,因此非骨水泥型假体设计应运而生。非骨水泥型假体的研究进展迅速,但在临床治疗中仍有一定的局限性,其临床生存率等各项指标还有待进一步考察。