亚致死浓度溴虫腈和毒死蜱对等钳蠊螨生长繁殖和解毒酶的影响

【目的】害虫综合治理中,化学防治对天敌资源也具有一定的杀伤力。为缓解这一矛盾,本研究旨在探究溴虫腈和毒死蜱亚致死浓度处理对等钳蠊螨Blattisocius dentriticus生长繁殖及解毒酶活性和基因表达量的影响。【方法】利用药膜法处理2-3日龄等钳蠊螨成螨24 h,测定溴虫腈和毒死蜱的亚致死剂量;测定和比较LC 10和LC 30剂量这两种药剂处理后F 0和F 1代的产卵量、产卵期、卵孵化率和雌成螨寿命等生物学特性的变化;通过酶活力分析和RT-PCR分别测定LC 10,LC 30和LC 50剂量下这两种药剂处理后钳蠊螨成螨体内谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)、细胞色素P450(cytochrome P450,CYP450)、羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)酶活力及其基因表达量变化。【结果】溴虫腈和毒死蜱处理24 h对等钳蠊螨成螨的LC 50分别为42.56 mg/L和72.42 mg/L。溴虫腈和毒死蜱LC 10和LC 30剂量处理等钳蠊螨雌成螨后,与对照(清水处理)相比,仅F 0代雌成螨寿命和产卵期显著缩短(P<0.05),而产卵量和卵孵化率无明变化。酶活力测定结果发现,GST,CYP450和CarE的活力在溴虫腈和毒死蜱LC 10和LC 30剂量处理后无明显变化,而LC 50剂量下,上述3种酶的活力均显著增加(P<0.05)。基因表达结果表明,溴虫腈LC 10,LC 30和LC 50剂量处理下2个GST基因(BdGST 3和BdGST 6)、3个CYP450基因(BdCYP 2-4)和5个CarE基因(BdCarE 1-5)表达均显著上调;在毒死蜱这3个剂量处理下3个GST基因(BdGST1,BdGST 3和BdGST 4)、3个CYP450基因(BdCYP2,BdCYP 5和BdCYP 6)和2个CarE基因(BdCarE1和BdCarE 2)表达量均显著上调。【结论】结果表明,LC 10和LC 30剂量的溴虫腈和毒死蜱亚致死剂量会抑制F 0代雌成螨的生长繁殖;LC 10,LC 30和LC 50剂量下这两种药剂可诱导等钳蠊螨GST,CarE和CYP450基因表达;LC 50剂量能明显诱导等钳蠊螨体内GST,CarE和CYP450活性上升。该研究为等钳蠊螨抗性品系的筛选及田间应用提供了理论依据。

等钳蠊螨联苯肼酯抗敏品系对柑橘全爪螨的捕食作用

【目的】探究不同温度下等钳蠊螨(Blattisocius dentriticus Berlese)联苯肼酯抗性品系和敏感品系对柑橘全爪螨(Panonychus citri McGregor)的捕食能力差异。【方法】采用室内生物测定的方法,研究了在16、20、24、28、32℃条件下等钳蠊螨联苯肼酯抗性品系和敏感品系对柑橘全爪螨卵和雌成螨的捕食作用。【结果】等钳蠊螨联苯肼酯抗性品系和敏感品系对柑橘全爪螨卵和雌成螨的捕食量没有显著差异。【结论】联苯肼酯抗性获得并未影响等钳蠊螨对柑橘全爪螨的捕食功能,因此,等钳蠊螨有发展成为生防天敌的潜力。

几种杀虫剂防治柑橘矢尖蚧的田间药效试验

开展几种杀虫剂防治柑橘矢尖蚧的田间药效试验,结果表明,22.4%螺虫乙酯悬浮剂3 500~4 500倍液、20%噻虫嗪·螺虫乙酯悬浮剂A剂3 300倍液和B剂3 300倍液以及25%环氧虫啶可湿性粉剂4 000~2 000倍液对柑橘矢尖蚧的防治效果较好,防效在93.5%~98%之间,可以在生产上轮换使用,以提高防治效果。

巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗性品系生物学特性及其对常用药剂的交互抗性

【目的】明确橘园常用药剂对巴氏新小绥螨Neoseiulus barkeri成螨的致死效应,弄清巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗性品系对柑橘园常用药剂的交互抗性水平及生态适合度变化,为巴氏新小绥螨抗性品系的田间应用提供科学理论依据。【方法】在对巴氏新小绥螨进行致死效应和交互抗性测定的基础上,运用生态学方法对其生物学特性进行评价。【结果】不同药剂对巴氏新小绥螨成螨致死效应存在显著差异。高效氯氟氰菊酯和毒死蜱的致死率最高,校正死亡率分别为97.62%和92.57%;巴氏新小绥螨甲氰菊酯抗性品系螺螨酯、噻虫嗪、乙螨唑、毒死蜱和高效氯氟氰菊酯均存在显著交互抗性,其抗性倍数分别为7.56、10.32、11.45、19.10和45.89倍。生物学特性研究结果表明,与敏感品系相比,甲氰菊酯抗性的获得使其发育历期显著延长,但对捕食量和孵化率影响不显著。哒螨灵、丁氟螨酯和高效氯氟氰菊酯对巴氏新小绥螨抗性品系与敏感品系卵的孵化率具有显著影响,其他常用药剂对巴氏新小绥螨抗性品系与敏感品系卵的孵化率不存在显著影响。【结论】甲氰菊酯抗性获得使巴氏新小绥螨对柑橘园常用药剂表现不同水平的交互抗性;甲氰菊酯抗性获得对巴氏新小绥螨生长、繁殖及捕食均无显著影响,可在田间推广应用。

桔小实蝇钠离子通道基因和P450基因RNAi载体构建及转化

桔小实蝇是重要的柑橘害虫,目前已对多种杀虫剂产生不同程度的抗性,化学防治方法往往效果不理想,近年来植物转基因抗虫育种技术表现出巨大的潜力,这为更好地防治桔小实蝇提供了新思路。本研究为获得桔小实蝇抗性转基因柑橘,对桔小实蝇细胞色素P450基因(cytochrome P450 monoxygenases, P450)和电压门控钠离子通道基因(sodium channel, SC)进行核苷酸序列比对,分别克隆得到片段大小为590 bp和550 bp的P450基因和SC基因的正反目标片段,利用植物表达载体pFGC5941,将基因正反向片段与Intron两端连接,成功构建RNA干扰(RNAi)载体"p FGC-P1F1R1/P2F2"和"pFGC-C1R1/C2R2"。本研究利用XhoⅠ-NcoⅠ、XbaⅠ-Bam HⅠ酶切位点对质粒和载体进行双酶切分析实验,克隆测序得到大小为590 bp和550 bp的两个酶切片段,经核苷酸序列比对分析,验证其与插入片段一致,说明RNAi载体构建成功。通过农杆菌遗传转化体系,将外源重组载体整合到柑橘基因组中,经除草剂筛选、PCR检测分别得到12株转P450基因阳性苗和9株转钠离子通道基因阳性苗,这为后期柑橘抗桔小实蝇效果评价提供了实验材料。