大鼠垂体的形态学研究及其细胞分布特点

目的 研究大鼠垂体大体、光镜、超微结构下的特点 ,为神经内分泌学研究奠定基础。方法 使用灌注固定、光镜切片计数分析、选择性取材切片的透射电子显微镜技术。结果 大鼠垂体的位置及大体形态与人类迥异 ;光镜计数嗜酸、嗜碱、嫌色细胞各部位的比例不同 ;超微结构表明腺垂体靠近硬膜侧以促甲状腺激素细胞、促肾上腺素细胞多见 ,围绕神经垂体两侧以生长激素细胞为主 ,中间主要是促泌乳素细胞、促生长激素细胞 ,腺垂体的血液供应外侧明显少于内侧。结论 大鼠垂体具有鲜明的自身特点 ,对其形态学的细致研究将与之相关的科研工作打下坚实的基础。

基因治疗的安全性评价

基因治疗的安全性日益引起重视。基因作为一种全新的药物 ,其安全性的评价具有特异性。

多聚物PVP载体人生长激素基因在去垂体鼠体内表达的实验研究

目的以人工合成多聚物5%聚乙烯吡咯烷酮(PVP)为基因治疗载体,研究人生长激素基因骨骼肌肌肉注射方法在生长激素(GH)缺乏症模型鼠中的表达。方法选用人GH基因的真核表达载体pCEP-hGH与PVP混合,采用不同剂量胫前肌肌肉注射方法,1～4周时取注射部位肌肉,匀浆后采用PCR、RT-PCR方法分别检测hGH载体、hGHmRNA,采用放射免疫法检测血清中hGH。结果构建的真核表达载体经酶切、PCR、测序鉴定正确,各组hGH载体骨骼肌肌肉注射后PCR、RT-PCR均为阳性,100μg、300μg剂量组4周内血清均得到表达,呈缓慢上升趋势。300μg剂量组表达大于100μg剂量组,差异有极显著意义。结论应用PVP作载体,在去垂体鼠内骨骼肌肌肉注射hGH基因,能获得较长期的表达。

钾离子通道和肿瘤关系研究进展

钾离子通道是细胞膜上一类特殊的亲水性蛋白质微孔道，广泛存在于各组织的细胞膜表面，是机体内最为复杂的一大类离子通道，在不同的组织细胞中执行着重要的生物功能。K^＋通道在所有可兴奋性和非兴奋性细胞的重要信号传导过程中扮演着重要角色，其家族成员在调节神经递质释放、心率、胰岛素分泌、神经细胞分泌、上皮细胞电传导、骨骼肌收缩以及细胞容积的过程中发挥了重要作用。

钾离子通道阻断剂对肿瘤细胞增殖和凋亡的影响

化疗是人胶质瘤手术切除之后的诸多治疗环节中重要的一环,但是至今疗效难以令人满意。钾离子通道是广泛存在的膜通道蛋白,有实验证实其阻断剂可以抑制肿瘤细胞的增殖,对凋亡和细胞周期等亦产生影响。本文对钾离子通道及其阻断剂对肿瘤细胞的影响等做了重点阐述。

生长激素缺乏性侏儒症基因治疗前瞻性研究:重组人生长激素非病毒载体基因治疗体内实验安全性观察

目的:研究携带重组人生长激素(hGH)基因非病毒载体pNMG3骨骼肌注射方法的急性期安全性。方法:实验于2001/2002在哈尔滨医科大学神经外科研究所和哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室进行。用纯化裸露质粒pNMG3向幼鼠胫前肌不同剂量单次注射,两周内不同时间RT-PCR检测转录,RI-A检测血清hGH蛋白表达,局部注射部位组织病检,测定血清中谷草转氨酶(GOT)和肌酐检测肝功、肾功。结果:30～480μgpNMG3剂量组肌肉注射两周后RT-PCR,RIA检测结果阳性;7.5～480.0μg剂量组两周后少数见脾组织细胞轻度至中度增多;各组GOT、肌酐无明显变化。120μg剂量组病理检查4h可见肌注部位明显白细胞浸润、脾组织细胞增生,3d时心肌炎性细胞浸润,以上变化随时间延长而减轻,两周后仅少数见脾组织细胞轻度至中度增多。结论:7.5～480.0μg剂量组肌肉注射是安全的;超急性期纯化裸露质粒肌肉注射局部肌肉、心肌、脾受累明显,但是可逆的。

垂体性侏儒症的基因治疗与进展

对于垂体性侏儒症 ,目前临床上使用的体外重组人生长激素替代治疗疗效有一定限制。近年来基因治疗垂体性侏儒症的研究已开始并取得了一定成效。本文从基因治疗的体外试验。

脑创伤后神经元细胞内游离钙的变化及其影响因素(英文)

目的:研究液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内游离钙(犤Ca2+犦i)的变化,探讨尼莫地平D-2氨基戊酸(D-2-amino-5-phosphono-valericacid,D-AP-5)和亚低温对创伤后细胞内犤Ca2+犦i的影响及其机制。方法:以Fluo-3/AM为细胞内钙离子的荧光指示剂,用激光共聚焦显微镜测定液压冲击伤时体外培养的单个大鼠神经细胞内游离钙(犤Ca2+犦i)的变化。结果:液压冲击伤后脑皮质细胞内游离Ca2+迅速升高,24h达高峰,随后逐渐下降,48h仍维持较高水平犤(411.29±52.46),(396.53±51.32)nmol/L犦,尼莫地平,D-AP-5于各时相关均降低细胞内犤Ca2+犦i,其中Nimodipine10h内应用最佳犤6h:(98.65±15.65)nmol/L犦,D-AP-5于1～10h应用较好而亚低温30min内显著降低细胞内犤Ca2+犦i(t=13.74,P<0.001),最佳时机在伤后15min内,伤后1h以上无效。结论:创伤后神经元细胞内钙超载,尼莫地平、D-AP-5和亚低温均降低细胞内犤Ca2+犦i,但各自最佳时间窗不同,揭示对创伤后神经细胞Ca2+超载应注意综合治疗,并选定各自作用最佳时间窗。

自发性硬脊膜外血肿的诊断和治疗策略

目的探讨自发性硬脊膜外血肿的临床特征、治疗及影响预后的因素。方法对16例自发性硬脊膜外血肿患者的临床特征、手术治疗时机以及手术后神经功能恢复情况进行回顾总结,并结合文献分析影响预后的因素。所有自发性硬脊膜外血肿患者均行MRI检查。结果16例患者的硬脊膜外血肿分别位于下颈段(2例)、颈胸段(6例)、胸段(7例)及胸腰段(1例)。MRI检查T1WI表现为等信号或略高信号,T2WI以高信号为主,其中可见混杂低信号。12例施行手术治疗的患者中10例预后良好;4例保守治疗者中3例神经功能完全恢复。结论脊髓MRI检查是诊断自发性硬脊膜外血肿的首选方法,早期诊断和外科手术治疗是恢复神经功能、提高疗效的关键。手术疗效主要与自发性硬脊膜外血肿患者手术前的神经功能缺损程度和手术间隔时间有关;症状较轻者在密切观察下可予以保守治疗,其神经功能的恢复主要取决于神经功能缺损程度。目的探讨自发性硬脊膜外血肿的临床特征、治疗及影响预后的因素。方法对16例自发性硬脊膜外血肿患者的临床特征、手术治疗时机以及手术后神经功能恢复情况进行回顾总结,并结合文献分析影响预后的因素。所有自发性硬脊膜外血肿患者均行MRI检查。结果16例患者的硬脊膜外血肿分别位于下颈段(2例)、颈胸段(6例)、胸段(7例)及胸腰段(1例)。MRI检查T1WI表现为等信号或略高信号,T2WI以高信号为主,其中可见混杂低信号。12例施行手术治疗的患者中10例预后良好;4例保守治疗者中3例神经功能完全恢复。结论脊髓MRI检查是诊断自发性硬脊膜外血肿的首选方法,早期诊断和外科手术治疗是恢复神经功能、提高疗效的关键。手术疗效主要与自发性硬脊膜外血肿患者手术前的神经功能缺损程度和手术间隔时间有关;症状较轻者在密切观察下可予以保守治疗,其神经功能的恢复主要取决于神经功能缺损程度。

乙烯雌酚诱发大鼠泌乳素腺瘤动物模型的建立

目的建立大鼠泌乳素腺瘤动物模型,观察大鼠不同性别、用药时间和去势等因素对其发生的影响。方法将Wistar大鼠分为注射乙烯雌酚(DES)的雌性鼠试验组、去势鼠试验组和雄性鼠试验组,每组内设对照组。分别于第2,4,8和12周时观察大鼠脑垂体重量及血清泌乳素(PRL)水平和垂体组织病理学改变。结果雌性组和去势组8周时大鼠均形成腺瘤,血清PRL水平达高峰。雄性组12周时大鼠均形成腺瘤,PRL水平和垂体重量随着DES作用时间的延长而持续增高。结论腹腔注射DES可以引起Wistar大鼠泌乳素腺瘤的形成,是一种制作简便、可靠的动物模型,大鼠性别、是否去势对其形成无明显影响。

白黎芦醇对GH3细胞增殖和PRL合成的影响

目的探讨白黎芦醇对垂体腺瘤GH3细胞增殖和泌乳素合成的影响,及其对雌激素的拮抗作用。方法在无血清无酚红的培养条件下,白黎芦醇单独或与雌二醇联合作用于GH3细胞,用MTT法测定细胞增殖,用免疫荧光法、RT-PCR和Western印迹法测定泌乳素的表达情况。结果白黎芦醇对GH3细胞增殖具有刺激和抑制双相作用,呈时间-剂量依赖性。并且白黎芦醇使GH3细胞中PRL阳性细胞比例下降。同时,白黎芦醇抑制泌乳素的合成。白黎芦醇对雌二醇诱发的细胞增殖和泌乳素合成均有拮抗作用,但对泌乳素合成的拮抗作用较强,而雌二醇刺激细胞增殖作用较其诱发泌乳素合成作用强。结论白黎芦醇对GH3细胞增殖和泌乳素合成均有抑制作用,从两方面发挥着抗肿瘤作用。

白黎芦醇对GH3细胞生长和泌乳素合成分泌的抑制作用及其与雌激素受体的关系

目的探讨白黎芦醇(RE)对垂体腺瘤GH3细胞增殖和泌乳素(PRL)合成分泌的影响,及其与雌激素受体(ERs)的关系。方法RE作用于GH3细胞,用免疫荧光法和Western印迹法测定ERs的表达情况,分别用ELISA法和Western印迹法测定培养基内和细胞内PRL水平,用MTT法测定细胞增殖,同时观察了雌二醇(E2)和特异性雌激素受体激动剂对RE的拮抗作用。结果RE改变ERs表达水平,减少PRL合成分泌,抑制GH3细胞增殖,E2和特异性雌激素受体激动剂对RE有拮抗作用。结论RE通过ERs抑制PRL合成、分泌及细胞增殖,从而发挥抗肿瘤作用,两种效应的信号转导途径不尽相同。

垂体结核2例报告

为探讨垂体结核的诊断、临床治疗的方法和经验,回顾性地分析了2例垂体结核病人的临床表现和影像学特点,并复习鞍区结核的有关文献,认为增强MRI显示出垂体结核时垂体柄增粗及瘤周硬膜明显强化,这有助于与垂体腺瘤进行鉴别诊断。经蝶显微外科手术是垂体结核的首选治疗手段,术后应予以抗结核治疗。

小儿硬膜下积液的诊治(附43例分析)

目的探讨小儿硬膜下积液的个体化诊断及治疗。方法对43例硬膜下积液患儿均通过CT或MRI结合患儿的临床表现做出诊断与治疗,并采用CT或MRI进行随访6个月至1年。结果 36例行保守治疗,其中32例痊愈,4例效果不佳改行手术治疗。11例行手术治疗,其中5例行囟门穿刺治疗,6例钻孔引流术治疗(2例效果不佳改行硬膜下-腹腔分流术治疗),10例痊愈,1例好转出院。本组无死亡病例。结论根据小儿的生理特点、影像学及临床表现对小儿硬膜下积液患者做出正确诊断,严格控制手术指征,依据积液的量及特点采取个体化的治疗方案,可获得满意疗效。

大鼠胚胎垂体生长激素细胞的体外诱导研究

目的探讨地塞米松和生长激素释放激素(GHRH)对大鼠胚胎垂体生长激素(GH)细胞分化的作用,为将来选择性细胞移植治疗生长激素缺乏症(GHD)奠定基础。方法利用免疫组织化学方法和放射免疫分析方法,在大鼠胚胎垂体组织的原代培养中,对糖皮质激素诱导GH细胞分化的最佳浓度、诱导GH细胞发生分化所需要的最短时间以及GHRH在大鼠胚胎垂体细胞分化中的作用进行实验研究。结果地塞米松诱导GH细胞分化的最佳浓度为50nmol/L(P<0.01)。体外培养的胚胎垂体细胞经地塞米松诱导16h,GH细胞开始分化,诱导48h,分化更明显,上清液中GH水平也明显增加(P<0.01);当GHRH的浓度达到10-7mol/L时,可以增强地塞米松对GH细胞的诱导分化作用,明显提高GH细胞的百分比和GH的分泌量(P<0.01)。结论地塞米松可以诱导生长激素前体细胞最终分化为具有功能活性的GH细胞,GHRH与地塞米松发挥协同作用,调节GH细胞的分化与GH分泌。

后颅窝病变疑难病例6例报告

背景与目的:后颅窝占位病变的术前诊断有时并不容易。本文报告我们日常临床工作中遇到的后颅窝病变中诊断困难的病例并分析其特点。方法:统计哈尔滨医科大学第一临床学院神经外科2004年4月至2006年4月的后颅窝病变手术病例,选择6例诊断困难的病例,分析总结发病方式、临床症状和体征、辅助检查、手术所见和组织学检查。结果:6例病例中,其中3例术前诊断为前庭神经鞘瘤,术后证实为脑膜瘤。1例术前诊断为脑梗塞,术后证实为畸胎瘤。1例术前诊断为脑膜瘤,术后证实为畸胎瘤。1例术前诊断为脑膜瘤,术后证实为黑色素瘤。结论:(1)桥小脑角区脑膜瘤和前庭神经鞘瘤容易混淆。(2)先天性良性肿瘤畸胎瘤容易误诊为其他脑肿瘤或脑梗塞。(3)一些罕见的肿瘤容易误诊,如黑色素瘤。

17β-雌二醇对垂体腺瘤细胞增殖和电压依赖性钾电流的影响

目的 研究 17β 雌二醇 (E2 )对垂体腺瘤GH3细胞增殖和电压依赖性K+ 电流 (IK(V) )的影响 ,探讨IK(V) 与细胞增殖的关系。方法 不同浓度E2作用GH3细胞 ,应用MTT比色法测定细胞增殖 ,流式细胞仪检测细胞周期分布 ,运用全细胞膜片钳技术记录和分析E2对GH3细胞中IK(V) 的作用。结果 E2作用GH3细胞 3d后 ,0 1nmol/L、1nmol/L和 10nmol/LE2组均明显诱导细胞增殖(P <0 0 1) ,并使细胞增殖周期中G0 /G1 期细胞比例下降 ,进入S期细胞增加。E2作用GH3细胞 2 4h后 ,E2以浓度效应关系增加IK(V) 。结论 电压依赖性K+ 通道可能参与E2对GH3细胞的促增殖作用。提示可应用K+ 通道阻断性药物治疗垂体腺瘤。

自体阔韧带替代人工硬脑膜修补后颅窝硬膜缺损的临床应用

目的研究利用自体筋膜替代硬脑膜的可能性。方法对我院2004年6月-2008年6月的15例替代硬脑膜患者进行回顾性分析。结果全部患者均水密缝合,无并发症产生。结论此项技术可极大降低患者的治疗费用,具有较大经济效益,值得推广。

新城疫病毒的分类及治疗胶质瘤研究的进展

脑胶质瘤是人类中枢神经系统中最常见的原发恶性肿瘤,因其致残率、致死率高而被国内外学者广泛研究。传统的手术、放疗及化疗等治疗手段并不能达到满意的治疗效果。近些年各种生物基因治疗不断涌现,其中溶瘤病毒的抗肿瘤作用正在引起学者的广泛关注和研究,新城疫病毒(NDV)的胶质瘤治疗更是研究的热点。现就NDV的发现、溶瘤的结构基础、分类及关于治疗胶质瘤的研究及反向遗传技术的应用等进行总结。

小儿颅脑损伤的临床特点及治疗分析

目的探讨小儿颅脑损伤的临床特点、治疗方法。方法回顾性分析2010年1月至2013年6月收治的61例小儿颅脑损伤的临床资料,其中手术治疗24例,保守治疗37例。结果 61例患儿痊愈46例,好转15例,无植物生存及死亡病例。结论在小儿颅脑损伤的治疗过程中,应结合小儿自身的生理、解剖和病理特点,存在手术适应症的选取术式时强调微创,术中轻柔精细操作,保守治疗者应选取个体化的治疗方案,早期防治并发症。