冰草生长繁殖对温度、水分和刈割的响应

以无性系植物冰草为研究对象,通过综合分析冰草的生物量分配、表型可塑性及光合效率对不同温度、水分、刈割及其交互作用的响应机制,揭示气候变化下草地无性系植物在不同水热环境下的生存策略。结果表明:(1)增温抑制冰草的生长繁殖。增温环境下,冰草株高、生物量、分蘖数均有所降低,仅在水分适中(土壤田间持水量70%)时能够维持叶片数与叶面积不减少;增温中水处理中,冰草可通过提高净光合速率、蒸腾速率及气孔导度来保持光合产物及生物量的积累;中度刈割与70%的土壤田间持水量产生协同效应,可维持冰草光合作用,促进补偿生长。(2)干旱(土壤田间持水量35%)是抑制冰草生长繁殖的最主要因素,所有环境中干旱均使冰草的叶片数、叶面积、分蘖数与生物量显著下降(P<0.05);非干旱土壤(土壤田间持水量70%和100%)常温环境中,刈割促进冰草分蘖,更多的叶片促进光合作用及生物量积累,有利于冰草的生长繁殖;水分过多(土壤田间持水量100%)在常温环境下促进冰草地上生物量积累,在增温环境下反而产生抑制。综上所述,随着气候变暖与土壤干旱,冰草生活力迅速下降,应适时进行水分及刈割调节,缓解环境胁迫对冰草生长与繁殖的抑制作用。

肿瘤坏死因子α通过激活NF-κB信号通路加快肝细胞周期进程

在慢性炎症部位有易发肿瘤的倾向,大约有20%的恶性肿瘤发生与慢性炎症相关,肝细胞癌是世界第三大癌症死亡病因,其患者多数有慢性炎症病史,当炎症慢性迁延,肝细胞癌发生率明显增加.但慢性炎症与肿瘤发生与发展的细胞和分子机制仍然不清楚.利用人肝细胞株L-02细胞,研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)对细胞周期的影响及其机制,并探讨核因子κB(NF-κB)和ERK1/2活化对细胞周期的影响,以期能更确切地阐明炎症介质TNF-α在肝细胞癌发生发展中的作用.发现TNF-α能促进肝细胞从G0/G1期向S期转换.蛋白质印迹检测表明,TNF-α能以剂量依赖方式诱导cyclinD1表达,而对cyclinE的表达无明显影响.同时TNF-α能激活NF-κB,ERK1/2,抑制NF-κB活化降低了TNF-α诱导的cyclinD1表达,导致细胞周期阻滞于G0/G1期.抑制ERK1/2活化则对细胞周期和cyclinD1表达无显著影响.结果提示,TNF-α通过活化NF-κB信号通路,诱导cyclinD1表达,加快细胞周期进程,这可能是促进肿瘤的发生发展重要机制.针对TNF-α和NF-κB的治疗可能延长慢性炎症相关性肿瘤的潜伏期和抑制肿瘤的发展.

NF-κB信号传导途径对TNF-α诱导的SMMC-7721细胞凋亡的影响

背景与目的:已证明核因子κB(nuclearfactor-κB,NF-κB)在免疫细胞激活、抗病毒、多种应激反应和细胞凋亡的调控等许多方面起着重要作用。本实验研究NF-κB信号传导途径对TNF-α诱导的肝癌细胞株SMMC-7721细胞凋亡的影响。方法:采用ELISA和免疫组化检测TNF-α对NF-κB信号传导通路的激活作用,继而用TPCK(n-tosyl-Phe-chloromethylketone)阻断NF-κB的活化,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果:①TNF-α能激活NF-κB信号传导通路;②TPCK能抑制TNF-α诱导的NF-κB活化;③TPCK抑制NF-κB活化后,能加强TNF-α诱导的细胞凋亡。结论:SMMC-7721细胞中NF-κB信号传导途径参与了细胞的抗凋亡过程,在SMMC-7721细胞对TNF-α的细胞毒性作用耐受中起重要作用。抑制NF-κB信号传导途径可能在肿瘤治疗中有潜在的应用价值。

IL-6对TNF-α的细胞杀伤作用影响的实验研究

目的 :研究IL - 6在肿瘤细胞对TNF -α耐受中的作用。方法 :检测SMMC - 772 1细胞在TNF -α作用下IL - 6的分泌。同时应用MTT实验检测细胞存活率 ,观察IL - 6和阻断IL - 6活性对细胞存活率的影响。结果 :SMMC - 772 1细胞能分泌IL - 6 ,TNF -α能促进细胞分泌IL - 6。外源加入的IL - 6对SMMC - 772 1细胞生长起促进作用。但加入抗IL - 6抗体或抗IL - 6R抗体时 ,与对照组相比 ,SMMC - 772 1细胞对TNE -α的敏感性也显著增加 ,10ng/mLTNF -α对SMMC - 772 1细胞就有显著的杀伤作用 ,P <0 0 1。随着浓度的增加 ,细胞存活率显著降低。结论 :抗IL - 6抗体和抗IL- 6R抗体可以抑制SMMC - 772 1细胞生长 ,能明显增加SMMC - 772 1细胞对TNF -α的敏感性。IL - 6对SMMC -772 1细胞的生长起促进作用。

NF-κB活化与肿瘤细胞对治疗的敏感性

不同类型的肿瘤细胞对化学药物、放射治疗、TNF α治疗都表现出不同的敏感性。NF κB作为Rel家族的一个成员 ,能够被电离辐射、细胞因子和化学因子激活。NF κB活化后启动转录合成一些细胞因子和保护蛋白 ,能对细胞提供有益保护 ,增加其应激耐受性。在肿瘤治疗中 ,NF κB活化影响肿瘤细胞对治疗的敏感性。通过抑制NF κB活化 ,可提高放疗、化疗和TNF α治疗肿瘤的疗效 ,用作肿瘤治疗的有效辅助手段。

小鼠Pkhd1条件性基因打靶载体的构建

目的构建小鼠Pkhd1条件性基因打靶载体,为建立Pkhd1条件性敲除小鼠模型奠定基础。方法以正常小鼠(129xl/SvJ)基因组DNA为模板,扩增小鼠包括第6号外显子的Pkhd1基因部分序列,通过引入LoxP和Neo基因等步骤,建立条件性敲除Pkhd1第6号外显子的条件性基因打靶载体。结果经多个限制性核酸内切酶酶切鉴定和测序证实,构建的小鼠Pkhd1基因条件性打靶载体符合设计要求。结论成功构建了小鼠Pkhd1条件性基因打靶载体,为建立Pkhd1基因条件性敲除小鼠打下了基础。

盐碱胁迫对碱地肤、地肤种子萌发以及幼苗生长的影响

分别用不同浓度的中性盐（NaCl，Na2SO4），碱性盐（NaHCO3，Na2CO3）处理碱地肤、地肤种子，分析各种盐分对两种植物种子萌发的影响。结果表明：超过一定浓度以后，盐分延缓了碱地肤、地肤种子萌发；碱地肤、地肤种子的发芽率、发芽指数、活力指数也随盐分的增加而降低；幼苗各部位的生长受到影响，其中盐分对胚根的抑制作用最明显．作为典型的盐生植物，碱地肤生长的最适浓度范围是：NaCl：40～80 mmol／L，Na2SO4：20～40 mmol／L，NaHCO3：10 mmol／L，Na2CO3：5 mmol／L；地肤生长的最适浓度为：NaCl：20～60 mmol／L，Na2SO4：20mmol／L，而在碱性盐NaHCO3，Na2CO3存在的条件下，地肤的长势随着盐浓度的增加而明显降低．综上所述：尽管碱地肤、地肤是属于同一科的两种植物，但是它们对于不同的盐碱反应有很大的差异．

盐碱及变温条件对花苜蓿种子发芽的影响

用3个变温处理(10/20℃,15/25℃,20/30℃)、6个浓度盐处理(盐为NaCl,浓度为0、50mmol/L、100mmol/L、150mmol/L、200mmol/L、250mmol/L)和碱处理(碱为Na2CO3,浓度为0、5mmol/L、10mmol/L、15mmol/L、20mmol/L、25mmol/L)研究盐、碱以及盐碱与温度的交互作用对两种不同来源花苜蓿种子萌发的影响。结果表明:随着盐、碱浓度的升高,种子发芽率、发芽速度均显著降低。低浓度盐、碱条件下,温度对花苜蓿种子发芽影响不显著;但在较高浓度的盐、碱条件下,不同温度处理对种子发芽率和发芽速度的影响差异显著;最适发芽温度为15/25℃。随着盐浓度升高,花苜蓿种子胚根长度逐渐减小,但胚轴长度没有明显变化;在一定浓度Na2CO3胁迫下花苜蓿能正常发芽,当Na2CO3浓度为15mmol/L(pH=10.95)时,两种花苜蓿发芽率均高于60%。两种花苜蓿相比较,林下花苜蓿抗盐碱性高于草甸花苜蓿。

扁蓿豆研究进展

综述了扁蓿豆Medicago ruthenica研究工作进展,包括分类学地位的变化以及分布范围、遗传多样性、生物学特性、农艺学特性、育种与引种等方面的研究概况。并针对扁蓿豆研究存在的问题,提出今后研究应当集中在扁蓿豆的适应区域、抗逆基因的筛选、荚果开裂问题以及进一步的建立人工草地等方面。

四川部分地区阿片类药物依赖人群生命质量及其影响因素的研究

目的调查四川地区三城市阿片类药物依赖人群生命质量,找出影响生命质量的因素。方法用SF-36量表和PSSS量表来评估阿片类药物依赖人群的生命质量和社会支持,同时用自编量表调查该人群的一般特征及其与药物依赖相关的因素。用t检验、相关分析、方差分析和多元线形逐步回归等统计分析对资料进行分析。结果①阿片类药物依赖人群的生命质量显著性低于正常对照人群(P<0.001);该人群的社会支持在PSSS量表所测的不同领域均低于对照人群(P<0.001)。②单因素分析时,年龄、婚姻状况、文化程度、职业、收入、吸烟、患有慢性病、社会支持的3个维度、吸毒方式、共用针管、家庭成员吸毒、吸毒时间、吸毒剂量、戒毒方式及复吸次数等17种因素与研究人群生命质量的各领域或部分领域均有关系。③多因素分析后发现,对研究人群生命质量的主要影响因素是吸毒时间、吸毒剂量、家庭外源性社会支持、全部社会支持、共用针管和收入。婚姻状况、家庭内源性社会支持、吸毒方式、患有慢性病、吸烟、家庭成员吸毒、戒毒方式及复吸次数等因素则对个别领域有影响。结论四川地区三城市阿片类药物依赖人群生命质量较低,且缺乏足够的社会支持。

成都市社区慢性阻塞性肺疾病患者直接经济负担及其影响因素分析

目的了解成都社区慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的直接经济负担及其影响因素。方法随机整群抽取成都市6个社区卫生服务试点社区的所有COPD患者作为调查对象,采用逐户走访填写问卷并结合查阅病案的方法对446名患者进行调查,调查内容涉及患者的一般社会人口学特征,疾病相关内容,对待疾病的态度,以及直接经济负担相关费用和人均收入等。结果(1)成都市社区COPD患者年直接经济负担的中位数为1280元,男女两性间以及各年龄组间差异无统计学意义(P>0.05)。首发患者的年直接经济负担中位数为1540元,既往患者的年直接经济负担中位数1090元,首发患者的年直接经济负担显著性高于既往患者(P<0.05)。中年组的门诊费、住院费、住院食宿费及上门诊治费显著性高于老年组(P<0.05),而长期自费用药费则显著性低于老年组(P<0.05)。(2)社区COPD患者全年的住院总费用、门诊总费用、长期自费用药总费用等3项费用为医疗总费用的91.77%;而患者在冬季的医疗总费用占全年医疗总费用的50.17%。(3)影响COPD患者直接经济负担的因素有住院次数、病情严重程度、对疾病的态度、职业和医疗费用负担形式。结论成都市社区COPD患者的直接经济负担是调查人群家庭平均年收入的近1/4,因此,COPD给该地区社区人口带来的直接经济负担是巨大的。国家应及时制定相应政策,并对患者医疗费用的影响因素进行干预和调节。

辽河平原北部草地类型特征及分布现状

为掌握辽宁省北部草地现状及群落特征,以辽河平原北部的彰武、康平、昌图、法库4县确权草地为范围,通过2年的野外详查,分析草地植被特征,并重新划分草地类型,运用ArcGIS 10.0软件勾绘出草地分布图。结果显示:25个调查样地共出现164种植物,隶属46科129属。根据水热、地形及植物群落结构特征,将调查区草地划分为疏林草地类、暖性灌草丛类和低平地草甸类3大类。其中,疏林草地类所含物种数最丰富,占到了总物种数的71.3%;疏林草地类和暖性灌草丛类以旱生植物为主,低平地草甸类湿生和水生植物相对较多。3类草地共出现8个草地型,疏林草地类2个,暖性灌草丛类3个,低平地草甸类3个,且均有乔木和灌木。与80年代相比,披碱草(Elymus dahuricus)、野古草(Arundinella anomala)、荻(Triarrhena sacchariflora)等中生植物占优势的草地型已消失,糙隐子草(Cleistogenes squarrosa)、冷蒿(Artemisia frigida)等旱生植物的优势度有所增加,典型草原旱生植物分布区向东扩展。3类草地的分布具有明显的区域性差异:彰武县以疏林草地类为主,昌图县以暖性灌草丛类为主,而康平和法库县则以低平地草甸类为主。4县共出现草地斑块11 250块,其中50亩以下的占81.2%,100亩以上的仅占8.8%,草地分布零散而面积小。

TBX21基因多态性与类风湿关节炎相关性的研究

目的:研究TBX21基因单核苷酸多态性(SNPs)与中国汉族人群类风湿性关节炎(RA)的关系。方法:采用单碱基延伸法(SBE)检测288例RA患者和288名正常健康者TBX21基因的5个SNPs:rs4794067、rs2240017、rs17250932、rs2074190和rs12721470的基因型。结果:5个SNP位点的基因型均符合Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)。rs12721470位点的基因型频率和等位基因频率在RA组和对照组间的差别具有统计学意义。rs4794067位点的基因型频率在RA组和对照组间无统计学差异,而等位基因频率在RA组和对照组间的差异则具有统计学意义(P<0.05)。rs17250932、rs2240017和rs2074190基因型及等位基因频率在RA组和对照组间无统计学意义(P>0.05)。结论:TBX21基因单核酸多态性rs12721470与中国汉人群类风湿关节炎是显著相关联的。

成都市社区老年人心血管疾病危险因素调查

[目的]研究成都地区各社区老年居民心血管病主要危险因素的流行现状,为预防和治疗提供依据。[方法]整群抽样成都地区社区老年居民,调查一般人口统计学指标,烟酒嗜好,个人及家庭史,查体,血压(BP)、心率(HR)、体重指数(BMI)及血液有关生化项目。[结果]调查人群的高血压、高血糖、尿酸、体重指数、高血脂的患病率呈上升趋势。吸烟率和饮酒率性别差异明显,吸烟率比其他调查有所下降,但也超过50%。SBP影响因素的多因素logistic回归分析发现:性别(OR=1.160)、年龄(OR=0.674)、吸烟(OR=1.213)、饮酒(OR=1.418)和体重指数(OR=-0.614),它们与高血压患病差异有统计学意义。[结论]该地区社区老年居民各项危险因素均较高,高血压、高血脂、体重进一步恶化。对上述危险因素进行深化研究和防治是当务之急。

LPS直接诱导对肺微血管内皮细胞核因子κB活化的影响

目的 探讨内毒素 (lipopolysaccharide ,LPS)的直接诱导作用对肺微血管内皮细胞 (pulmonarymicrovascularen dothelialcells ,PMVECs)核因子κB(NF κB)活化的影响。方法 10 0ng/mlLPS刺激PMVECs 0、0 5、1、2、4、6、8h或 1、10、10 0ng/mlLPS刺激 1h后 ,凝胶电泳迁移率分析 (electrophoreticmobilityshiftassay ,EMSA)检测NF κB的活化 ,免疫细胞化学(ICC)观察其亚基p5 0、p65的核转位。并通过加入NF κB活化阻断剂TPCK观察其对 10 0ng/mlLPS刺激 1h诱导活化的影响。结果 LPS的直接刺激能迅速活化NF κB ,诱导其p5 0、p65亚基核转位 ,1h即达到高峰 ,且呈剂量依赖关系 ,后逐渐下降。TPCK能显著抑制其活化 (P <0 0 1)。结论 LPS的直接刺激能诱导NF κB的活化 ,这可能是LPS诱导炎症反应的一个重要环节。

儿童急性髓系白血病WT1基因的实时荧光定量RT-PCR检测及其临床意义

本研究建立实时荧光定量RT-PCR方法检测儿童急性髓系白血病WT1基因(AML)mRNA的表达并探讨其临床意义。采用SYBR G reen I实时荧光定量RT-PCR方法,检测30例初治AML患儿、12例缓解期患儿(30份)、18例复发患儿,30例细胞形态学正常人的骨髓标本中的WT1基因的表达水平,并动态检测20例初治患儿WT1基因的表达。以ABL为内参照,采用2-△△ct法计算其相对表达量。结果表明:①初治AML患儿WT1基因的表达高于正常对照组和缓解组(p<0.001);缓解AML患儿WT1基因的表达与正常对照组的差异无统计学意义(p>0.05);复发AML患儿WT1基因的表达与初治组的差异无统计学意义(p>0.05);②动态监测儿童AML20例显示,初治时W T1高表达,完全缓解后W T1表达水平下降,复发时W T1表达水平明显升高。20例中5例在临床复发前3-7个月表达水平开始上升。③动态检测的20例患儿初治时W T1阳性组和阴性组完全缓解率(CR)、3年总生存率(O S)无显著差异(p>0.05),治疗后第22-30天的W T1阳性组3年O S显著低于阴性组(p<0.05)。结论:SYBR G reen I实时荧光定量RT-PCR方法是一种快速有效,灵敏度高,特异性好的方法。WT1基因在儿童急性AML中表现为促癌基因的作用,WT1基因表达水平的变化有助于疗效评价,微小残留病的检测和预后判断。

LPS诱导肺微血管内皮细胞ICAM-1的表达及核调控机理的实验研究

目的 :研究细菌脂多糖 (LPS)诱导的肺微血管内皮细胞 (PMVEC)ICAM - 1的表达及调控机制。方法 :10 0ng·ml-1LPS刺激PMVEC 0h、2h、4h、6h、8h或 10ng·ml-1、5 0ng·ml-1、10 0ng·ml-1LPS刺激 6h ,免疫细胞化学检测PMVECICAM - 1的表达。凝胶电泳迁移率变化分析检测NF -κB的活化。并通过加入活化阻断剂PDTC观察对PMVECICAM - 1表达的影响。结果 :PMVECICAM - 1的表达与LPS的刺激呈时相 -剂量依赖方式。LPS的刺激迅速活化NF -κB ,6 0min达到高峰 ,后逐渐下降。PDTC能显著降低ICAM - 1的表达 (P <0 .0 1)。结论 :LPS刺激诱导NF -κB的活化 ,启动ICAM - 1的合成表达。

小鼠Rnf141多克隆抗体的制备及鉴定

目的获得小鼠Rnf141多克隆抗体,并对其功能进行初步研究。方法利用多聚酶链反应(PCR)扩增获得鼠Rnf141基因并且与原核表达载体pGEX-5X-3(含GST标签)进行重组,将重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3),经1mmol/L IPTG在25℃条件下诱导,用SDS-PAGE检测,获得GST-Rnf141融合蛋白高效表达后,通过Glutathione Sephorase4B纯化。纯化的融合蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,通过Western blot和免疫组织化学的方法检测抗体的特异性。结果成功构建了重组质粒pGEX-Rnf141,该质粒能在大肠杆菌BL21(DE3)中表达融合蛋白GST-Rnf141,融合蛋白表达量约占细菌总蛋白的46%,制备的多抗效价达1∶128000,它可以与GST-Rnf141重组蛋白和小鼠不同脏器组织Rnf141蛋白发生特异的抗原抗体反应,在脾脏和脑组织中Rnf141蛋白表达量较高。结论成功制备小鼠Rnf141多克隆抗体,该抗体为研究Rnf141的表达与功能提供了有用的工具。

沈阳农业大学草业科学专业的教学改革

全国30余所院校均设有草业科学本科专业,毕业生每年有1 000名以上,就业竞争日益上升,这就要求人才培养模式要与时俱进,具有区域特色。本文简要回顾了我国草业科学本科生人才培养方案的制定过程及发展趋势,并介绍了沈阳农业大学草业科学专业培养目标、培养要求及课程设置原则及修改情况,同时为适应新时代的人才培养模式提出了建议。

LPS诱导肺微血管内皮细胞ICAM-1的表达及NF-κB作用的实验研究

目的研究LPS诱导的肺微血管内皮细胞 (PWVEC)ICAM -1的表达及调控机制。方法100ng/mlLPS刺激PMVEC0h、2h、4h、6h、8h或10ng/ml、50ng/ml、100ng/mlLPS刺激6h ,免疫细胞化学检测PMVECICAM -1的表达。凝胶电泳迁移率变化分析检测NF -κB的活化。并通过加入活化阻断剂PDTC观察对PMVECICAM -1表达的影响。结果PMVECICAM -1的表达与LPS的刺激呈时相 -剂量依赖方式。LPS的刺激迅速活化NF -κB ,60min达到高峰 ,后逐渐下降。PDTC能显著降低ICAM -1的表达 (P<0 .01)。结论LPS刺激诱导NF-κB的活化 ,启动ICAM -1的合成表达。