初断乳大鼠视网膜微血管周细胞的分离培养

探讨、优化初断乳大鼠视网膜微血管周细胞（retinal microvascular pericytes,RMPs）的分离、培养方案。分别从15只初断乳大鼠及15只成年大鼠中剜取眼球,采用眼科显微手术器械分离获取视网膜,经碎化、消化、过滤处理,收集视网膜微血管片段,予接种培养。MTT法测绘RMPs生长曲线,通过倒置显微镜观察RMPs形态,免疫荧光法鉴定周细胞标记物。比较2组之间视网膜分离操作时间、完整性、原代细胞数量、周细胞形态和表面标记物表达。结果显示,初断乳大鼠视网膜均成功分离,其中24眼视网膜呈整片分出,6眼视网膜破裂呈碎片状,单个眼球视网膜分离时间为14.3~45.5 s。视网膜分离操作时间及完整性与成年大鼠差异无统计学意义（P〉0.05）,初断乳大鼠原代RMPs细胞产量较成年大鼠高,细胞增殖能力强,细胞形态及表面标记物与成年大鼠一致。研究结果表明,初断乳大鼠视网膜是一种可用于RMPs培养的良好组织原料,该实验成功建立了初断乳大鼠RMPs分离培养体系。

表达Ki-67的CHO细胞用于制备免疫组织化学细胞质量控制片

质量控制是确保免疫组织化学过程正确与否的关键，目前国内免疫组织化学染色质量控制过程中尚缺乏相关的质量控制产品。现有免疫组织化学检测过程中主要使用的质量控制参比对照物是阳性组织的组织切片。但是由于病理阳性组织来源限制及不同组织阳性标志物的差异性，导致目前使用的质量控制片分子标志物表达水平、表达部位不一致，很难实现标准化。病理组织不仅来源有限，而且不能作为商品进行流通，无法用于临床诊断。因此制备稳定、有效、