8种人恶性淋巴瘤细胞系P16基因突变的研究

为确定 P16基因与恶性淋巴瘤发生发展的关系 ,对 8种人恶性淋巴瘤细胞系中 P16基因突变情况进行研究。用银染 PCR- SSCP方法对 P16基因第二外显子突变情况进行研究 ,并对检出突变者用自动测序仪进行测序分析。检出1例纯合缺失 ,2例 P16基因第二外显子突变。测序分析发现 SU- DHL- 1P16基因第二外显子有 3处点突变 ,即密码子72的 GAC突变为 AAC,密码子 77的 GCT突变为 ACT,密码子 82与 83之间插入了一个 C。认为 P16基因在 B细胞恶性淋巴瘤细胞系中的突变率较高 ,提示其改变可能参与恶性淋巴瘤的发生发展。

银染PCR-SSCP方法检测人9种恶性淋巴瘤细胞系p53抑癌基因的突变

用银染PCR-SSCP方法检测人9种恶性淋巴瘤细胞系P53基因第5、6、7外显子的突变。检出SU-DHL-1，SU-DHL-4，SU-DHL-6，SU-DHL-8，SU-DHL-10，8392等6种细胞系中有P53基因的点突变。表明在恶性淋巴瘤细胞系中p53基因的突变发生率较高，是其发生发展的重要原因之一。且非同位素银染PCR-SSCP方法用于检测p53基因点突变，具有灵敏性高，重复性好，无放射性，周期短等优点。

肿瘤耐药与相关基因

报告经典耐药与MDR1基因、凋亡调控基因与经典耐药、凋亡调控基因与再生耐药研究进展。

人恶性淋巴瘤细胞系p53,p16与bcl-2/JH基因的研究

抑癌基因p53,p16的缺失和突变以及癌基因bcl-2/JH融合基因的出现是恶性淋巴瘤发生的分子生物学原因,p53和p16基因亦是诱导淋巴瘤细胞凋亡的重要基因,而bcl-2基因是抑制淋巴瘤细胞凋亡的重要基因。为研究这3种基因结构的变化,用PCR和PCR-SSCP,以及PCR扩增产物序列测定的方法测定了人9种恶性淋巴瘤细胞系,发现SU-DHL-1,SU-DHL-4,SU-DHL-6,SU-DHL-8,SU-DHL-10,Daudi,8392 7种恶性淋巴瘤细胞系有p53基因的点突变,分别在第五、六、七外显子;SU-DHL-9有p16基因的纯合缺失,而SU-DHL-1和Daudi细胞系有p16基因的第二外显子的突变,SU-DHL-1的测序结果为密码子30的GAC突变为AAC,密码子35的GCT突变为ACT,密码子40与41之间插入了一个C;SU-DHL-4和SU-DHL-6有bcl-2/JH基因的重排,讨论了基因结构的变化在恶性淋巴瘤细胞系发生发展中的意义。

还原型谷胱甘肽防治血液病化疗相关的药物性肝损害的临床观察

目的 :评价还原型谷胱甘肽对化疗药物引起肝损害的防治作用。方法 :还原型谷胱甘肽预防组 5 2例 (男性 30例 ,女性 2 2例 ) ,对照组 75例 (男性 4 2例 ,女性 33例 ) ,治疗组 2 4例 (男性 12例 ,女性 12例 ) ,将预防组与对照组肝损害情况、以及治疗组治疗前后肝功能情况进行分析比较。结果 :治疗组治疗后肝功能中ALT、AST明显好转 (P <0 .0 1) ,预防组肝功能损害发生率低 (P <0 .0 5 )。结论 :还原型谷胱甘肽能够治疗和预防血液病化疗相关的药物性肝损害。

两种透析方式治疗脑出血并急性肾功能衰竭的比较

目的 :比较腹膜透析 (PD)与连续性肾脏替代疗法 (CRRT)治疗脑出血合并急性肾衰 (ARF)的疗效。方法 :回顾性分析 5 6例脑出血合并ARF患者采用PD和CRRT治疗的疗效比较。结果 :尽管两种方法对溶质的清除和酸碱平衡的影响无显著差异 ,但PD组的存活率明显高于CRRT组 ,且PD组的日平均透析费用也明显低于CRRT组。结论 :在我国 ,脑出血合并ARF的患者采用PD可能是一种更安全经济的方法。

糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白与多发性骨髓瘤骨病发展的关系

目的:研究糖皮质激素诱发的亮氨酸拉链蛋白(glucocorticoid induced leucine zipper,GILZ)在多发性骨髓瘤(MM)骨病发展中的作用。方法:收集MM患者抗凝血11例,利用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMCs),并将PBMCs分为地塞米松(DEX)干预组及空白对照组,相同条件培养48h。采用逆转录-酶联聚合反应(RT-PCR)法检测各组PBMCs中GILZ mRNA的表达;ELISA检测核因子κB受体激活剂配体(RANKL)及骨保护素(OPG)的表达。结果:在10-7 mol/L DEX刺激下,DEX刺激组MM患者PBMCs的GILZmRNA表达水平高于空白对照组(P<0.05);DEX刺激组OPG的表达量高于对照组(P<0.05),而RANKL的表达量诱导组与空白对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论:糖皮质激素可有效上调GILZ基因表达;GILZ的高表达可以调节MM患者RANKL及OPG的平衡,具有改善溶骨性损害的作用。

老年慢性特发性血小板减少性紫癜患者淋巴细胞凋亡蛋白的表达

目的 从细胞凋亡的角度探讨老年慢性特发性血小板减少性紫癜(ITP)的发病机制。方法 用流式细胞仪检测了8例老年人慢性ITP患者治疗前后T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+)Fas蛋白和Fas-L蛋白的表达。结果 治疗前T淋巴细胞的Fas蛋白表达明显低于正常(P<0.01),Fas-L蛋白表达明显高于正常(P<0.01);B淋巴细胞的Fas和Fas-L蛋白表达与正常对照相比差异无显著性意义。经治疗血小板恢复正常的患者T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调和Fas-L蛋白表达下调,与治疗前相比差异有极显著性意义,与正常对照相比差异无显著性意义。结论 治疗前老年慢性ITP患者体内Fas/Fas-L途径介导的T淋巴细胞凋亡异常,经治疗后T淋巴细胞的Fas蛋白表达上调,有助于抗原活化的B淋巴细胞的凋亡。

阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者T淋巴细胞对多向祖细胞的影响

将阵发性睡眠性血红蛋白尿症 (PNH)患者外周血制备的植物血凝素刺激的 T淋巴细胞条件培养液 (PHA-TCM)加入多向祖细胞的培养基中 ,用于 PNH骨髓混合集落形成单位 (CFU- Mix)的培养。发现在含有初发 PNH患者的 PHA- TCM培养条件下 ,骨髓的 CFU- Mix集落数明显减低。在含有治愈的 PNH患者的 PHA- TCM培养条件下 ,骨髓的 CFU- Mix集落数恢复正常。结果表明初发的 PNH患者

人恶性淋巴瘤细胞系P53,P16,Bcl—2/JH基因的研究(英文)

抑癌基因P53,P16的缺失和突变以及Bcl-2/JH融合基因的出现是恶性淋巴瘤发生的分子生物学病因,P53和P16基因亦是诱导淋巴瘤细胞凋亡的重要基因,而Bcl-2基因是抑制淋巴瘤细胞凋亡的重要基因,为研究这三种基因结构的变化,用PCR-SSCP,以及PCR扩增产物序列测定的方法测定了人九种恶性淋巴瘤细胞系,发现SU-DLH-1,SU-DHL-4,SU-DHL-6,SU-DHL-8,SU-DHL-10,8392六种恶性淋巴瘤细胞系有P53基因的点突变,分别在5,6,7外显子;SU-DHL-9有P16基因的纯合缺失,而SU-DHL-1和Daudi细胞系有P16基因的第2外显子的突变,SU-DHL-1的测序结果为密码子30的GAC突变为AAC,密码子35的GCT突变为ACT,密码子40与41之间插人了一个C:SU-DHL-4和SU-DHL-6出现Bcl2-2/JH基因,讨论了基因结构的变化在恶性淋巴瘤细胞系发生,发展中的意义.

银染PCR-SSCP方法检测61例白血病P_(53)基因点突变

用银染PCR－SSCP方法检测61例不同类型的白血病P53抗癌基因点突变，结果在26例淋巴细胞白血病中检测出2例有P53基因的点突变，在35例髓系白血病中检测出1例有P53基因的点突变。临床观察3例P53基因点突变患者对化疗药物不敏感，其中2例病程进展凶险。结果显示，P53抗癌基因点突变导致功能失活在白血病发病过程中起一定的作用，并可作为判断预后和化疗反应性的检测指标。

P53 Gene Mutations in Non-Hodgkin's Lymphoma

Summary: To understand P53 gene change of non Hodgkin's lymphoma (NHL) and human malignant lymphoma cell lines, the exons 5 7 of 29 patients with NHL and 9 kinds of human malignant lymphoma cell lines were studied by silver staining PCR SSCP technique. Three cases of P53 gene point mutation was found in 29 cases of NHL. Mutation developed in exon 5 in 2 cases, and in exon 6 in 1 case. They were all diffuse lymphoma. In mutation cases, B cell lymphoma accounted for 2 cases and the other one was T cell lymphoma. There was no P53 gene mutation in low grade follicular lymphoma. Seven strains out of 9 kinds of lymphoma cell lines had P53 gene point mutation. One strain had the mutation in exon 5; 5 strains in exon 6 and 1 strain in exons 5, 6, 7. There was a high mutation rate in lymphoma cell lines and low mutation rate in NHL patients. P53 gene plays an important role in lymphoma cell line establishment, cell regeneration and disease evolution.

网织红细胞血红蛋白含量在终末期肾病贫血治疗中的意义

目的 探讨网织红细胞血红蛋白含量 (CHr)在应用促红细胞生成素的终末期肾病 (ESRD)贫血患者补铁治疗中的指导意义。方法 对确诊ESRD的透析患者常规使用促红细胞生成素治疗贫血 ,分别以CHr和铁蛋白及转铁蛋白饱和度 (TSAT)作为铁指标指导补铁 ,比较两组的疗效。结果 CHr组与铁蛋白组疗效无显著性差异 ,但前者使用的铁剂剂量小于后者 (5 86 .14± 2 9.5 4比 5 2 8.99± 39.6 7,P <0 .0 5 )。结论 以CHr作为铁指标指导ESRD透析患者的补铁治疗具有安全、稳定、简便的优点。

特发性血小板减少性紫癜患者外周血淋巴细胞协同刺激分子的表达

目的 探讨T、B淋巴细胞表面协同刺激分子在特发性血小板减少性紫癜 (ITP)的变化。方法 用流式细胞术检测 2 1例ITP患者和 9名正常人外周血淋巴细胞协同刺激分子B7 CD2 8和CD4 0 表达率 ,用ELISA方法检测ITP患者外周血PAIgG的含量。结果 ITP患者外周血CD4+ CD2 8+ 细胞率明显低于正常对照 ,CD86+ 、CD1 9+ CD86+ /CD1 9+ 细胞率明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ,而CD2 8+ 、CD4 0+ 、CD80+ 、CD1 9+ CD80+ 、CD1 9+ CD86+ 、CD1 9+ CD4 0+ 、CD4+ CD2 8+ /CD4+ 、CD1 9+ CD80+ /CD1 9+ 、CD1 9+ CD4 0+ /CD1 9+ 细胞率与对照组相比差异无显著性。 2 1例ITP患者中 16例PAIgG的含量高于正常 ,平均值为(184 .6 2± 38.0 0 )ng 10 7血小板 ,且PAIgG的含量与CD1 9+ CD86+ /CD1 9+ 细胞率呈正相关。结论 ITP患者CD4+ T淋巴细胞表面的协同刺激分子CD2 8表达无缺陷。PAIgG与B淋巴细胞表面的协同刺激分子CD86 的改变明显相关 ,因此CD86 的改变可能参与ITP自身免疫的病理机制 ,并为ITP患者单克隆抗体治疗提供理论指导。

前列腺素E_1对高血压性肾损害早期肾小管的保护作用

目的 探讨前列腺素E1对高血压性肾损害早期肾小管的保护作用。方法 将 45例属于高血压性肾损害早期患者分为常规治疗组和PGE1治疗组 (常规治疗加用PGE1治疗 ) ,常规治疗组采用钙拮抗剂和ACE抑制剂 ,PGE1治疗组的PGE1用量为10 μg/d静脉滴注。于第 2周末观察两组尿α1-微球蛋白 (α1-MG)、尿NAG酶和 2 4h尿蛋白定量。结果 经 2周治疗后 ,两组 2 4h尿蛋白定量均较治疗前下降 ,但尿α1-MG和尿NAG酶仅在PGE1治疗组有显著降低 ( P <0 0 1)。

糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链对特发性血小板减少性紫癜凋亡的影响

目的:研究糖皮质激素诱发的亮氨酸拉链蛋白(GILZ)在特发性血小板减少性紫癜发病机制中的作用。方法:收集已确诊的特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者抗凝血26例,利用密度梯度离心法获取外周血单个核细胞(PBMCs),并将PBMCs分为地塞米松(DEX)干预组及空白对照组,相同条件培养48h。采用逆转录-酶联聚合反应(RT-PCR)法检测各组PBMCs中GILZ mRNA及Bcl-2mRNA的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测Bcl-2蛋白表达量。结果:在10-7 mol/L DEX刺激下,DEX刺激组ITP患者PBMCs的GILZ mRNA表达水平高于空白对照组(P<0.05);DEX刺激组Bcl-2mRNA及Bcl-2蛋白的表达量低于空白对照组(P<0.05)。结论:糖皮质激素可有效上调GILZ基因表达;GILZ的高表达可以下调Bcl-2表达量,具有促进凋亡的作用。

多发性骨髓瘤患者外周血单个核细胞中糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白mRNA表达的研究

目的检测多发性骨髓瘤（MM）患者外周血单个核细胞中糖皮质激素诱导的亮氨酸拉链蛋白（GILZ）mRNA表达情况，探讨GILZ在多发性骨髓瘤骨病治疗中的作用。方法选择使用VAD方案治疗后的MM患者（研究组）、初次发病的MM患者（病例对照组）及健康体检者（正常对照组）各11例作为研究对象。采用RT—PCR法检测外周血单个核细胞中GILZmRNA的表达，采用ELISA法检测血清骨碱性磷酸酶（BALP）和骨钙素（OT）的表达。结果与研究组相比，病例对照组GILZmRNA、BALP和OT表达水平均明显降低，且差异有统计学意义；正常对照组GILZmRNA、OT表达水平降低，BALP表达水平升高，且差异均有统计学意义。病例对照组GILZ表达与BALP、OT表达均呈正相关性；研究组GILZ表达与BALP、OT表达也均呈正相关性。结论地塞米松可以明显上调MM患者GILZmRNA表达；GILZmRNA表达上调可以促进成骨标志物BALP、OT表达，缓解MM患者骨质的破坏。