雷珠单抗对脉络膜新生血管模型大鼠视网膜氧化应激的抑制作用及其机制

目的研究雷珠单抗对脉络膜新生血管(CNV)模型大鼠视网膜氧化应激的作用及其机制。方法选取10周龄SPF级雄性SD大鼠60只,按照随机数字表法随机分为正常对照组、模型对照组、雷珠单抗组、转录因子核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)组、雷珠单抗+ML385组,每组12只。除正常对照组外,其余各组以氪激光诱导CNV模型。雷珠单抗组、ML385组和雷珠单抗+ML385组分别玻璃体腔内注射1μl雷珠单抗、ML385、雷珠单抗+ML385,模型对照组、正常对照组分别给予玻璃体腔内注射等体积生理盐水。脉络膜铺片法检测CNV面积;苏木精-伊红染色观察视网膜病理学变化;实时荧光定量PCR及Western blot检测视网膜组织中Nrf2、超氧化物歧化酶(SOD)、醌氧化还原酶(NQO1)mRNA及蛋白表达水平。结果模型对照组、ML385组和雷珠单抗+ML385组CNV面积分别为(23.01±1.52)×10^(3)、(30.23±2.01)×10^(3)和(18.56±1.85)×10^(3)μm^(2),明显高于雷珠单抗组的(12.35±1.22)×10^(3)μm^(2),雷珠单抗+ML385组CNV面积小于模型对照组和ML385组,ML385组CNV面积大于模型对照组,差异均有统计学意义(均P<0.001)。苏木精-伊红染色结果显示,雷珠单抗组RPE-脉络膜-巩膜复合体结构损害程度较模型对照组轻;雷珠单抗+ML385组RPE-脉络膜-巩膜复合体结构损害程度较雷珠单抗组重,但较模型对照组轻;ML385组RPE-脉络膜-巩膜复合体结构损害较模型对照组严重。雷珠单抗组Nrf2、SOD和NQO1 mRNA及蛋白相对表达量均低于正常对照组,但高于模型对照组、ML385组和雷珠单抗+ML385组,且雷珠单抗+ML385组Nrf2、SOD和NQO1 mRNA及蛋白相对表达量高于模型对照组和ML385组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论雷珠单抗可抑制氪激光诱导的CNV生长,减轻RPE氧化应激损伤,其机制与Nrf2/ARE通路的激活有关。

基于VEGF-VEGFR通路探究Avastin对DR模型大鼠干预效果

目的 基于血管内皮生长因子及受体(VEGF-VEGFR)通路探究贝伐单抗(Avastin)对糖尿病视网膜病变模型大鼠的干预效果。方法 取75只SPF级大鼠,其中15只作为正常组,其余大鼠建立糖尿病视网膜病变模型,建模成功后随机分为模型组、中剂量组、低剂量组、高剂量组各15只。低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予0.09、1.00、1.25 mg Avastin灌胃,模型组和正常组给予等体积生理盐水灌胃。采用酶联免疫吸附试验检测脂联素(ADPN)、瘦素(LP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、细胞间黏附分子(ICAM)-1;采用流式细胞仪检测循环内皮细胞(CEC)、血管内皮祖细胞(EPC);采用Western印迹法检测VEGF-VEGFR通路蛋白表达量。结果 与模型组相比,低、中、高剂量组ADPN、EPC、SOD水平表达显著较高(P<0.05)。与模型组相比,低、中、高剂量组LP、ICAM-1、CEC、MDA、VEGF、VEGFR-2、β-actin表达显著较低(P<0.05)。结论 Avastin可通过调控VEGF-VEGFR信号通路中相关重要信号传导分子的基因表达,与氧化应激指标及细胞因子具有密切关系,可改善糖尿病视网膜病变模型大鼠视力。

老年性白内障合并2型糖尿病患者VEGF、PEDF、GATA4 mRNA表达变化对晶状体上皮细胞凋亡的影响

目的探讨老年性白内障合并2型糖尿病患者血管内皮生长因子(VEGF)、色素上皮衍生因子(PEDF)及转录因子GATA结合蛋白(GATA)4 mRNA表达变化对晶状体上皮细胞凋亡的影响。方法选取老年白内障患者116例,其中老年性白内障合并2型糖尿病患者(观察组)58例,单纯老年白内障患者(对照组)58例。患者均接受超声乳化吸除术治疗,将晶状体中央5.5~6.0 mm的前囊膜(包括晶状体上皮细胞)撕除,体外培养人晶状体上皮细胞。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测晶状体上皮细胞中VEGF、PEDF、GATA4 mRNA表达;流式细胞术检测晶状体上皮细胞凋亡水平。取观察组晶状体上皮细胞进行细胞转染分为空白对照组(常规培养基培养)、GATA4过表达组(转染GATA4 mimic)、GATA4抑制剂组(转染GATA4 inhibitor);Western印迹检测VEGF、PEDF、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素(Cyt)-C蛋白表达。结果观察组晶状体上皮细胞VEGF、GATA4 mRNA和VEGF蛋白表达水平明显高于对照组,PEDF mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.01);观察组晶状体上皮细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01)。晶状体上皮细胞VEGF mRNA和蛋白表达水平及GATA4 mRNA表达水平与细胞凋亡率呈正相关(P<0.05);PEDF mRNA和蛋白表达水平与细胞凋亡率呈负相关(P<0.05)。GATA4过表达组和GATA4抑制剂组Bcl-2蛋白表达水平明显高于空白对照组(P<0.05);GATA4过表达组Bax蛋白、Cyt-C蛋白表达水平明显高于空白对照组,GATA4抑制剂组Bax蛋白、Cyt-C蛋白表达水平明显低于空白对照组(P<0.05)。结论老年性白内障合并2型糖尿病患者VEGF、GATA4高表达,PEDF低表达;下调晶状体上皮细胞中GATA4表达可通过促进Bcl-2表达,抑制Bax、Cyt-C表达来降低细胞凋亡率,有助于抑制病情发展,改善预后。

浅谈建筑施工事故探讨建筑施工问题

近年来,施工企业发生的事故问题也在逐渐增多,这将很大程度上阻碍施工建筑企业的发展,影响到建筑施工企业的经济效益和社会效益。所以,在建筑施工中,强化安全管理,并不断完善安全技术措施,同时要逐步加大监督检查力度,只有这样,才能有效减少施工过程中安全问题的发生,也才能保证工程项目顺利完成。

0.1％溴芬酸钠水合物滴眼液对减轻翼状胬肉术后疼痛的研究

目的探讨0．1％溴芬酸钠水合物滴眼液对减轻翼状胬肉术后眼部刺激症状的疗效及安全性。方法观察我院眼科2015年9月至2016年9月行翼状胬肉切除＋自体角膜缘干细胞移植术的患者95例120只眼，随机分为溴芬酸钠水合物滴眼液组和对照组，每组60只眼：两组术前3d和术后7d均使用抗生素滴眼液，另试验组予以溴芬酸钠水合物滴眼液20次／d。比较两组术后情况。结果两组患者术后6h、8h、24h、48h、72h疼痛程度评分，试验组患者疼痛程度评分均较对照组显著降低，差异均有统计学意义（P〈0．05）。角膜创面愈合情况：试验组术后第2d、第3d、第7d角膜创面愈合率与对照组相比，差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论0．1％溴芬酸钠水合物滴眼液能有效且安全的减轻翼状胬肉切除术后疼痛。

长期配戴软性角膜接触镜者角膜上皮的病理改变

目的研究软性角膜接触镜对角膜上皮组织的基底细胞数目、上皮厚度、基底细胞形态、增殖细胞核抗原（PCNA）等的影响。方法前瞻性病例对照研究。选择配戴软性角膜接触镜超过3年的患者33例（66眼，角膜接触镜组）和从未配戴软性角膜接触镜患者33例（66眼，对照组），对所选患者，在去瓣准分子激光上皮下角膜磨镶术（Flap—freeEpi．LASIK）手术中，用Epi-K角膜上皮刀取下角膜上皮瓣。2组中各取30例（60眼）采用超声进行离体角膜上皮瓣厚度的测量和采用显微镜进行基底细胞计数，各取3例（6眼）进行石蜡切片及免疫组化染色，观察角膜上皮瓣基底细胞形态的变化和进行PCNA的测定。数据采用独立样本t检验进行分析。结果角膜接触镜组角膜上皮层厚度为（55．33±4．56）μm；对照组角膜上皮层厚度为（57．19±3．82）μm，二者之间差异有统计学意义（t=-2．422，P〈0．05）。角膜接触镜组基底上皮细胞数目减少，为（3872．6±153．2）eells／mm^2；对照组基底上皮细胞数目为（3989．2±289．6）cells／mm^2，二者之间差异有统计学意义（t=-2．757，P〈0．01）。角膜接触镜组较对照组角膜基底细胞排列疏松，细胞形态欠规整，基底膜较厚，相对粗糙。角膜接触镜组角膜上皮基底细胞可发现PCNA阳性细胞，而对照组无阳性细胞。结论长期配戴软性角膜接触镜可导致角膜上皮损伤：使角膜上皮层变薄；单位面积内的的角膜上皮基底细胞数量减少；角膜上皮的组织结构发生病理学改变，细胞形态发生改变。细胞之间的连接和基底膜遭到破坏，PCNA阳性细胞存在。