PCR法快速检测鸭疫里氏杆菌的研究

根据Gen-Bank中25株鸭疫里氏杆菌(RA)的外膜蛋白A(OmpA)基因序列,在其高度保守区设计了一对特异性引物,成功地建立了鸭疫里氏杆菌的快速、准确PCR检测方法。RA参考菌株J04(2型)、J07(JX1型)均能扩增出671bp的特异性目的条带,而对鸭源大肠杆菌、鸭源多杀性巴氏杆菌、鸭源沙门氏菌、鸭源葡萄球菌的扩增结果均为阴性。PCR产物经EcoRI酶切鉴定得494bp和177bp两个预期条带。最低检出基因组DNA浓度为800fg。用全菌体进行PCR时,本实验室分离鉴定的60株RA均能够扩增出特异性目的条带。25份临床疑似病例的分离菌株的PCR扩增阳性率与生化鉴定率完全一致。该方法表明能从病料组织培养8h的混合菌群中快速、准确地检测到RA,可用于RA的快速诊断和流行病学调查。

油茶籽油提取技术研究进展

油茶籽油是世界上四大木本食用油之一,具有预防心血管疾病、抗肿瘤、抗菌、抗炎、保肝、抗氧化及增强人体免疫力等重要保健功效。随着中国油茶种植产业的迅速发展壮大,势必进一步推动更为绿色、高效的茶油加工新技术的发展。文章综述了压榨法、有机溶剂浸出法、临界流体萃取法、水代法及水酶法等茶油提取工艺的研究与应用现状,比较了各种提油技术的优、缺点,旨在为加快研究"安全、营养、经济"的茶油提取新技术提供参考。

一株产香真菌的初步鉴定及其挥发性成分分析

为筛选产香菌株,本研究对真菌F036进行了形态学和ITS序列分析,初步确定其分类学地位。采用同时蒸馏萃取装置（SDE）提取其培养液中的香气物质,并利用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）分析香气物质的组成。结果表明,菌株F036在PDA培养基上菌丝发达,有隔,呈乳白色,长时间培养后未产生孢子,最适温度为34~36℃,最适p H为5~6,具有产纤维素酶及木质素酶活性。该菌ITS序列与白耙齿菌（Irpex lacteus）的亲缘关系最近（99%）,它们在系统进化树上聚在一支。在PDA培养基中,35℃、180 r/min的条件下培养3 d后,加入5%（V/V）的无水乙醇,再培养4 d,菌株F036产生了大量的香气物质。GC-MS分析表明,这些挥发性香气物质主要为反-桂酸甲酯（19.93%）、桂酸乙酯（19.66%）、苯甲醛（7.35%）、3-甲基丁醇（3.85%）、苯甲酸乙酯（2.82%）和芳樟醇（1.24%）等。因此,本研究筛选到的产香真菌F036能够产生许多挥发性香气物质,在天然香料开发方面具有较好的潜在价值。

生物类专业校外实践教学基地评价指标体系的构建与实践

以九江学院生命科学学院为例,从实际出发,构建了生物类专业校外实践教学基地评价指标体系,这对加强实践教学基地管理和提高实践教学质量具有重要意义。

水酶法提取植物油脂技术研究进展

水酶法是在水代法基础上发展起来的一种现代提取植物油脂新技术。水酶法主要利用生物酶的酶解作用促进植物油脂的游离,与传统压榨法、有机溶剂浸出法及超临界萃取法等相比,其工艺简单,对设备的要求低,无高温处理及有机溶剂残留,油脂品质更好。因此,水酶法是一种"绿色、安全、营养"的提油新技术。本文介绍了水酶法提取植物油脂的技术原理及工艺特点,生物酶的选择与生物酶在水酶法提油中的应用现状,比较了水酶法与其他传统方法制备的植物油脂的品质;并重点讨论了水酶法提取植物油脂技术研究的关键问题,即:水酶法提油过程中乳化液的形成机制及破乳技术;同时,针对水酶法提油技术存在的用酶量大、成本较高及废水处理等问题提出了可能的解决途径,并对其应用前景进行了展望。

江西地区鸭疫里氏杆菌的鉴定及药敏试验

从江西部分地区的25份临床疑似鸭疫里氏杆菌(RA)病例中分离到19株RA。生化特性测定结果表明,19个RA菌株的过氧化氢酶、尿素酶均为阳性,除1株发酵葡萄糖、1株发酵麦芽糖外均不发酵各种糖类,5个RA菌株能液化明胶,15个RA菌株氧化酶阳性,不产生H2S,不还原硝酸盐,吲哚试验、MR试验、VP试验均阴性;80%的菌株对头孢曲松、头孢哌酮、头孢唑啉、罗红霉素等高度敏感,而对阿米卡星、庆大霉素、复方新诺明、卡那霉素、青霉素等耐药。

江西鄱阳湖达氏鲌生长特征研究

对2005—2006年采集于江西鄱阳湖的79尾达氏鲐年龄与生长进行统计分析。鄱阳湖达氏鲐样本，年龄范围0^＋～6，以2～3龄为主，优势体长在180～260mm，占总个体数的59．49％，优势体重在30～250g，73．42％。体长与鳞长呈直线相关：E=89．6604＋18．9196SL，体长与体重呈幂函数关系：W=2．5×10^-6L^3.3319，属匀速生长，Von Beatalanffy生长方程为：Ll=353．6449×[1-e^-0.2218×（t＋0.6582）]，Wt^＊=775．3749×[1-e^-0.2218×（t＋0.6582）]^3.3319生长拐点年龄为6．08龄，对应体长为274．03min，体重为332．54g。

粗壮脉纹孢菌原生质体的制备、再生及转化的条件

为建立原生质体介导的粗壮脉纹孢菌遗传转化系统,本研究主要考察了复合酶解液、菌龄及酶解时间对粗壮脉纹胞菌原生质体生成及再生的影响。结果表明,粗壮脉纹胞菌孢子悬液接种在马铃薯葡萄糖琼脂(potato dextrose agar,PDA)液体培养基中,30℃条件下摇床培养10 h的菌丝,采用0.5 g/100 m L蜗牛酶+0.5 g/100 m L溶壁酶+1 g/100 m L纤维素酶的复合酶解液、30℃条件下酶解10 h,粗壮脉纹胞菌原生质体生成及再生最为适合。在此条件下,原生质体生成数可达4.53×106个,38#再生培养基中的再生数可达1.41×106个,再生率达31.71%,聚乙二醇介导PAKHB载体转化NC原生质体,每微克质粒可获得8个以上的转化子。

响应曲面法优化庐山楼梯草多糖的提取工艺

为优化庐山楼梯草多糖的提取工艺,在单因素试验的基础上,选取提取温度、提取时间以及液料比为自变量,多糖提取率为响应值,采用中心组合设计的方法,研究各自变量及其交互作用对多糖提取率的影响。利用响应面分析方法,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型,并确定庐山楼梯草多糖提取工艺的最佳条件为提取温度96℃、提取时间4.4 h、液料比42∶1(mL/g)、提取1次时,多糖提取率达到最大值。该条件下多糖提取率预测值为13.86%,验证值为14.06%。

大豆低聚糖的生理功能及在家禽生产中的应用

大豆低聚糖（SBOS）是一种新型的功能性糖类,是大豆中可溶性糖类的总称。主要成分是蔗糖、棉籽糖和水苏糖,约占大豆中总糖类的7%～8%。除了大豆,豇豆、扁豆、豌豆、蚕豆、绿豆和花生等豆类作物中均有存在。

响应曲面法优化楼梯草抗氧化活性物质提取工艺

以乙醇溶液为提取溶剂,在单因素试验基础上,利用响应曲面法对楼梯草抗氧化活性物质提取工艺参数进行了优化。结果表明,楼梯草总抗氧化活性物质的最优提取工艺条件为:乙醇体积分数为51%、液料比20∶1(m L∶g)、提取时间50 min、温度85℃、提取2次,优化条件下其抗氧化活性物质的实际提取率为1.405%。楼梯草叶、茎中的提取率分别为3.048%、0.516%。

庐山楼梯草总黄酮提取工艺的优化

为研究庐山楼梯草(Elatostema stewardii Merr.)总黄酮的提取工艺,以乙醇溶液为溶剂,在单因素试验基础上利用响应曲面法的中心组合设计,对庐山楼梯草总黄酮提取工艺参数进行优化分析。结果表明,提取庐山楼梯草总黄酮的最优工艺条件为乙醇体积分数55%、提取温度80℃、液料比37∶1(V/m,mL∶g)、提取时间2.4 h、提取2次,该条件下庐山楼梯草总黄酮提取率为5.14%。

动物维生素A缺乏症的防治

一、病因 外源性维生素A缺乏主要是由于饲料中维生素A、胡萝卜素长期缺乏或摄人不足引起．或动物体对维生素A需要量增加，引起的维生素A相对缺乏。

放线菌JXJ-0136对白菜和豇豆生长的影响及其解磷作用

【目的】确定放线菌JXJ-0136的分类地位,分析其溶解不溶性磷的能力,在作物根际土壤定殖的情况及对蔬菜种子萌发、幼苗生长和蔬菜产量的影响,评价该菌在研制微生物肥料方面的潜在应用价值。【方法】利用培养特征、形态学特征和16S rRNA基因序列系统发育分析,初步确定菌株JXJ-0136的分类学地位;以白菜和豇豆为指示植物,采用琼脂平板法,研究该菌对蔬菜种子萌发和幼苗生长的影响;采用田间栽培试验,研究菌株对作物生长和产量的影响,测定栽培前后土壤总磷的含量,分析该菌对作物利用土壤磷效率的影响,并对作物根际土壤微生物进行分离纯化,分析该菌在根际土壤中的定殖情况;采用液体纯培养方式,研究菌株对不溶性无机磷和有机磷的溶解效率,分析其解磷机理。【结果】放线菌JXJ-0136在6—45℃、pH 4.0—13.0和0—4%(w/v)的盐浓度下均能生长,其中最适生长温度、pH和盐浓度分别约为28℃、p H 8.0和1%(w/v),在ISP2培养基上该菌气丝较发达,灰白色,孢子丝簇生,孢子长卵圆形;该菌16S rRNA基因序列与链霉菌Streptomyces violascens、S.somaliensis、S.hydrogenans、S.albidoflavus和S.daghestanicus的亲缘关系最近,相似性依次为97.98%、97.71%、97.30%、97.23%和97.03%,但在系统进化树上与这些菌聚在不同分支上;该菌培养液能够显著提高作物种子萌发率,促进幼苗生长,在0.2%—0.8%的剂量下,白菜种子萌发率、幼苗株高和根长分别比对照组增加3.55%—12.61%、13.91%—53.03%和7.37%—51.92%,豇豆种子萌发率、幼苗株高和根长分别比对照组增加4.71%—21.18%、3.60%—22.33%和2.37%—20.08%;田间栽培试验显示,该菌能够定殖于根际土壤,促进作物对土壤磷的利用,提高作物产量,当每穴施加5 m L该菌培养液,试验结束时,白菜和豇豆试验组的土壤总磷含量分别下降(23.56±2.65)%和(37.10±1.98)%,分别为对照组的(1.77±0.29)和(2.70±0.15)倍(P<0.01),而白菜和豇豆的产量却分别比对照组增加(27.59±6.15)%和(70.29±5.15)%(P<0.01);液体纯培养条件下接种培养5 d后,无机磷和有机磷培养基p H值由起始的7.0分别降至5.0和6.0,有效磷元素含量比对照组分别增加(73.94±0.94)和(7.12±0.28)mg(P<0.01)。【结论】放线菌JXJ-0136是链霉菌属的成员,能够显著提高作物种子的萌发率,增加幼苗株高和根长,并定殖于根际土壤中,增加土壤可溶性磷的含量,提高作物对土壤磷的利用效率,促进它们的生长,增加其产量,在微生物肥料研制中具有较大的潜在应用价值。