VEGF-C在乳腺癌中的表达及其与临床病理因素的关系

目的:探讨血管内皮生长因子-C(VEGF-C)与乳腺癌临床病理因素的关系。方法:运用原位杂交的方法检测89例乳腺癌石蜡标本中的VEGF-C mRNA的表达。结果:VEGF-C阳性率为55.1%(49/89),其中淋巴结有转移组(HE染色阳性)为79.2%(19/24),明显高于淋巴结无转移组(42.1%,16/38),二者比较有显著差异(P<0.05),但与月经、肿瘤大小、病理类型、临床分期、ER、nm23、c-erbB2无关(P>0.05)。结论:VEGF-C的表达与乳腺癌的淋巴结转移相关,但与病人的月经情况、肿瘤大小、病理类型、临床分期、ER、nm23、c-erbB2无关。

VEGF-C介导的乳腺癌肿瘤淋巴管生成及定位

目的:探讨血管内皮生长因子C(vascu lar endothelial growth factor C,VEGF-C)介导的乳腺癌肿瘤淋巴管生成及定位。方法:分子生物学原位杂交方法检测VEGF-C mRNA基因在89例原发性乳腺癌组织中的表达;免疫组化SP法对乳腺癌肿瘤淋巴管进行血管内皮生长因子受体3(vascu lar endothelial growth factor receptor-3,VEG-FR-3)标记。结果:在89例原发性乳腺癌组织中,49例表达VEGF-C mRNA,表达率为55.06%。VEGF-C mRNA的表达与乳腺癌淋巴管密度(lymphatic vessel density,LVD)和腋淋巴结转移呈正相关;与VEGF-C mRNA阴性组相比,VEGF-C mRNA阳性组的肿瘤淋巴管密度大、腋淋巴结转移率高(均P<0.05);所有病例都有不同程度的淋巴管生成,但以肿瘤间质组织中淋巴管生成为主,癌巢中未见到明显的成形淋巴管。肿瘤淋巴管密度与乳腺癌临床分期和腋淋巴结转移呈正相关,临床分期越晚,肿瘤淋巴管密度越高(P<0.05);腋淋巴结转移组的肿瘤淋巴管密度比无淋巴结转移组高(P<0.05)。结论:原发性乳腺癌组织VEGF-C mRNA的表达与乳腺癌肿瘤淋巴管生成、腋淋巴结转移呈正相关;VEGF-C介导的乳腺癌肿瘤淋巴管生成主要发生在肿瘤间质组织中。

乳腺癌淋巴管生成与肿瘤转移的关系

目的:探讨乳腺癌肿瘤淋巴管生成与肿瘤转移的关系。方法:免疫组织化学SP法进行VEGFR-3染色标记89例原发性乳腺癌肿瘤淋巴管。结果:所有病例均有不同程度淋巴管生成,但以肿瘤间质组织中淋巴管生成为主,癌巢中未见明显的成形淋巴管。肿瘤淋巴管密度与乳腺癌临床分期和腋淋巴结转移呈正相关,临床分期越晚,肿瘤淋巴管密度越高(P<0.05);腋淋巴结转移组的肿瘤淋巴管密度比无淋巴结转移组高(P<0.05)。结论:乳腺癌淋巴管密度与腋淋巴结转移呈正相关,淋巴管生成主要发生在肿瘤间质组织中。

CXCR4在VEGF-C介导的乳腺癌腋淋巴结转移中的作用

目的探索趋化因子受体CXCR4和VEGF-C与乳腺癌淋巴转移的关系,为研究干预乳腺癌淋巴转移的新方法提供理论依据。方法采用RT-PCR方法检测45例原发性乳腺癌组织中趋化因子受体CXCR4mRNA的表达及VEGF-CmRNA的表达,探索其与乳腺癌腋淋巴结转移的关系;Boyden趋化小室法检测CX-CR4不同表达状态乳腺癌细胞的趋化活性和趋化抑制性。结果45例原发性乳腺癌组织均有不同程度的CXCR4mRNA和VEGF-CmRNA的表达。37例CXCR4mRNA呈高表达,表达率为82.22%,73.33%的VEGF-CmRNA高表达(33/45);VEGF-CmRNA高表达组的CXCR4mRNA的高表达率大(P<0.05);CX-CR4mRNA的表达与乳腺癌腋淋巴结转移呈正相关(P<0.05);CXCR4的配体SDF-1对乳腺癌细胞的平均趋化率为75%,经抗CXCR4单克隆抗体处理后癌细胞的平均趋化率下降至34%,CXCR4被特异性抗体封闭前后的癌细胞趋化活性有显著性差异(P<0.05)。结论原发性乳腺癌CXCR4的表达和VEGF-C的表达与肿瘤腋淋巴结转移呈正相关;CXCR4的功能状态影响乳腺癌细胞的迁移活性。由此提示,通过干预趋化因子受体CXCR4和VEGF-C的活性可能成为阻断乳腺癌淋巴转移的新靶点。

乳腺癌腋淋巴结微小转移与癌组织Survivin基因表达关系的研究

目的探讨乳腺癌腋淋巴结微小转移与Survivin基因表达的关系。方法采用免疫组织化学SP法对34例淋巴结常规HE染色无癌转移的乳腺癌腋淋巴结572枚进行上皮细胞角蛋白19(CK-19)表达和原发癌组织进行Survivin基因表达的检测。结果淋巴结CK-19病例阳性率为26.47%(9/34),淋巴结数阳性率为4.37%(25/572)。Survivin阳性率为32.35%(11/34)。CK-19阳性病例组中Survivin阳性率为55.56%(5/9),CK-19阴性病例组中Survivin阳性率为24%(6/25),CK-19阳性组与CK-19阴性组的Survivin阳性率无显著差异(P>0.05)。结论乳腺癌腋淋巴结微小转移的发生与癌组织凋亡抑制蛋白的表达无明显相关性。

乳腺癌腋淋巴结微小转移与癌组织c-erbB-2、nm23基因表达关系的研究

目的探讨乳腺癌腋淋巴结微小转移与c-erbB-2、nm23基因表达的关系。方法采用免疫组织化学S-P法对70例淋巴结常规HE染色无癌转移的乳腺癌腋淋巴结1141枚进行上皮细胞角蛋白19(CK-19)表达和原发癌组织进行c-erbB-2、nm23基因表达的检测。结果淋巴结CK-19阳性率为4.21%(48/1141),其病例阳性率为27.14%(19/70)。c-erbB-2阳性率为44.29%(31/70),nm23阳性率为80.00%(56/70)。CK-19阳性组的c-erbB-2阳性率明显高于CK-19阴性组(P<0.05),CK-19阳性组的nm23阳性率明显低于CK-19阴性组(P<0.05)。CK-19阳性率与病人月经状况、病理类型、临床分期、激素受体状况无关(P>0.05)。结论乳腺癌腋淋巴结CK-19表达与癌组织c-erbB-2基因表达呈正相关,与癌组织nm23基因表达呈负相关,与病人月经状况、临床分期、病理类型、激素受体状况无关。

B超定位引导经皮穿刺引流治疗急性胰腺炎早期巨大胰腺假性囊肿27例

目的:探讨B超定位引导经皮穿刺引流在急性胰腺炎早期巨大胰腺假性囊肿治疗中的价值。方法:27例急性胰腺炎患者,均在发病后2周以内形成巨大胰腺假性囊肿且均合并有较为严重的临床症状,均行B超定位引导经皮穿刺置管引流术。结果:27例患者在穿刺引流成功后腹痛、腹胀、发热等症状均消失,4例彻底治愈,其余23例为进一步手术治疗创造了良好时机和条件,最终均成功行内引流手术而治愈。结论:急性胰腺炎早期巨大假性囊肿行B超定位引导经皮穿刺引流术安全可靠,可以消除患者的症状,为进一步手术治疗创造良好时机。

腹腔镜切除急性炎性反应期胆囊62例体会

目的:探讨腹腔镜胆囊切除术(LC)在切除急性炎性反应期病变胆囊的手术技巧及安全性问题。方法:对采用LC切除急性炎性反应期胆囊62例进行回顾性研究,术中采用胆囊穿刺减压、紧贴胆囊分离、顺逆行结合游离胆囊等方法,明确辨清胆囊三角解剖关系后做离断处理,术后一般放置引流。结果:除1例外61例均成功实行LC手术,术后均无并发症出现,平均术后住院时间5 d。结论:急性炎性反应期胆囊并非LC禁忌证,术者应具备丰富的腹腔镜操作经验,完备的术前检查及评估,灵活运用手术方法及技巧,有效的术后引流,必要时的果断中转开腹是保证手术安全的关键。

沉默核仁素可诱导大鼠神经干细胞的分化

目的探讨核仁素(nucleolin)对原代神经干细胞(NSCs)分化的影响及其相关机制。方法构建核仁素siRNA腺病毒表达载体,将经鉴定正确的重组腺病毒质粒转染HEK293A细胞,包装得到具有感染能力的nucleolin-siRNA重组腺病毒。病毒体外感染原代NSCs,采用Western blot检测nucleolin蛋白的表达情况,Nucleolin-siRNA对神经干细胞Nestin、Wnt3、β-catenin蛋白表达的影响;采用免疫细胞化学检测nucleolin-siRNA对神经干细胞分化的影响。结果经酶切和测序鉴定均证实nucleolinsiRNA重组腺病毒载体构建成功,其插入序列正确无误。Western blot检测结果显示,转染nucleolin-siRNA2的细胞nucleolin表达明显受到抑制。siRNA+组NSCs分化为NSE阳性细胞和GFAP阳性细胞的分化率明显比CON组、siRNA-组增加,且差异具有统计学意义(P<0.01)。与阴性对照组相比,siRNA+组Nestin的表达明显减少,Wnt3表达明显增多,β-catenin入核明显增多,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论本研究成功地构建了针对nucleolin基因的siRNA重组腺病毒载体,沉默nucleolin可诱导神经干细胞的分化,其机制可能与Wnt信号转导通路的激活有关。

烟碱通过N1受体促进热应激对RAW264.7细胞HSP70的诱导表达

目的:本研究探讨在巨噬细胞中,低剂量烟碱联合温和热应激对热休克因子1(heat shock factor 1,HSF1)和热休克蛋白70(heat shock proteins70,HSP70)表达的影响,并揭示其受体机制。方法:用低剂量烟碱(浓度1 mmol/L)联合温和热应激(39℃)刺激RAW264.7巨噬细胞,采用Western-blot观察HSP70的表达,免疫荧光细胞化学观察HSF1的入核,凝胶滞留实验(EMSA)观察HSF1与热休克元件(heat shock element,HSE)的结合;接着用不同的阻断剂预处理RAW264.7巨噬细胞,再给予烟碱和热应激刺激,观察HSP70的表达及HSF1的入核。结果:单纯低剂量烟碱(浓度1 mmol/L)刺激不能诱导HSP70的表达,但HSF1入核明显增多,HSF1与HSE的结合增强;在39℃时,再加入烟碱能增强HSP70的表达、HSF1的入核、HSF1与HSE的结合;六烃季铵预处理,HSF1的入核较单纯烟碱处理明显减少,且能明显阻断烟碱在39℃时诱导的HSP70表达的作用。结论:低剂量烟碱(浓度1 mmol/L)刺激可以促进HSF1入核并与HSE结合,但不能诱导HSP70的表达;烟碱通过N1受体诱导HSF1入核并促进温和热应激(39℃)对RAW264.7巨噬细胞中HSP70的诱导表达。

重组腺病毒Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星抑制人乳腺癌细胞MCF-7的增殖

目的观察重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星对人乳腺癌细胞MCF-7增殖的抑制作用。方法构建重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA,鉴定后将质粒转染HEK293A细胞,得到Nucleoli-SiRNA重组腺病毒。病毒体外转染MCF-7细胞,采用Western Blot检测Nucleolin蛋白的表达情况。将细胞分正常细胞、表柔比星、Ad-SiRN-、Ad-NucleolinSiRNA、表柔比星+Ad-SiRN-、表柔比星+Ad-Nucleolin-SiRNA共6组,MTT法检测6组细胞的增殖能力。结果酶切和测序鉴定均证实重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA构建成功,插入序列正确无误。Western Blot检测结果显示,转染NucleolinSiRNA的MCF-7细胞核仁素表达明显受到抑制。与其他各组比较,应用Ad-Nucleolin-SiRNA联合表柔比星能明显抑制MCF-7细胞的增殖(P<0.01)。结论重组腺病毒载体Ad-Nucleolin-SiRNA能增强表柔比星抑制人乳腺癌细胞MCF-7增殖的能力。

CA-9在早期乳腺癌前哨淋巴结中的表达及其生物学意义

目的:研究前哨淋巴结中缺氧相关蛋白碳酸酐酶-9(carbonic anhydrase-9,CA-9)的表达与早期乳腺癌淋巴结转移的关系。方法:选取2013年1月-2017年12月在本院全程治疗的乳腺癌患者46例,运用免疫组化的方法检测患者前哨淋巴结石蜡标本中的CA-9的表达,分析CA-9与早期乳腺癌临床病理因素的关系。结果:46例乳腺癌中,前哨淋巴CA-9阳性率为19.57%(9/46);其中淋巴结有转移的CA-9阳性率为88.89%(8/9),明显高于淋巴结无转移的2.7%(1/37),比较差异有统计学意义(P<0.05);临床分期Ⅱb、Ⅱa、Ⅰ、0期的CA-9阳性率分别为100%(6/6)、13.64%(3/22)、0、0,比较差异有统计学意义(P<0.05);但CA-9阳性与患者月经状况、原发肿瘤大小、病理类型、ER、PR、Cerb B-2、Ki-67无关(P>0.05)。结论:前哨淋巴结中CA-9的表达与早期乳腺癌的腋窝淋巴结转移相关,其表达随临床分期的升高而明显增加,但与患者月经情况、肿瘤大小、病理类型、ER、PR、Cerb B-2、Ki-67无关。

亮丙瑞林联合他莫昔芬治疗绝经前HR(+)乳腺癌患者雌二醇水平的疗效观察

目的:探讨亮丙瑞林联合他莫昔芬治疗绝经前HR(+)乳腺癌患者雌二醇水平的效果。方法:选择收治的绝经前HR(+)乳腺癌患者72例为研究对象,随机分为对照组和观察组各36例,对照组接受他莫昔芬治疗,观察组接受亮丙瑞林联合他莫昔芬治疗,比较治疗前后两组患者的雌二醇水平和不良反应发生率。结果:治疗前两组患者的雌二醇水平比较差异无统计学意义(P>0.05),治疗后6个月和治疗后12个月观察组患者的雌二醇水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组患者的子宫内膜增生、阴道不规则出血、潮热、血管栓塞、骨关节痛发生率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:亮丙瑞林联合他莫昔芬治疗绝经前HR(+)乳腺癌患者能够更有效地维持患者的低雌二醇水平状态,有效减少不良反应的发生。

原发性乳腺癌组织中nm23基因的表达及其意义

目的探讨原发性乳腺癌组织中nm23基因的表达及其意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测286例原发性乳腺癌nm23基因表达情况并与乳腺癌病理类型、患者年龄、临床分期及腋淋巴结转移之间的关系进行分析。结果nm23的阳性率为65.7%,与病人年龄、肿瘤病理类型无关;肿瘤临床分期越高,nm23的阳性率越低;腋淋巴结转移组的nm23阳性率明显低于腋淋巴结无转移组(P<0.05)。结论乳腺癌组织中nm23基因表达与乳腺癌临床分期、腋淋巴结转移呈负相关,提示nm23基因可作为预测原发性乳腺癌淋巴结转移和评估肿瘤临床预后的标记物。