尿可溶性Fas和血管内皮生长因子在膀胱癌中表达的意义及相关性研究

目的探讨尿可溶性Fas(s Fas)和血管内皮生长因子(VEGF)在膀胱癌患者中表达的意义及相关性。方法采用病例对照研究方法,随机抽取膀胱癌患者和对照者各82例,采用酶联免疫分析法(ELISA)测定标本尿s Fas水平,采用免疫组织化学SP法检测膀胱癌标本中VEGF的表达。结果尿s Fas在膀胱癌病例组为(168.0±84.6)ng/ml,对照组为(56.2±37.0)ng/ml,差异有统计学意义(P<0.01)。尿s Fas随着病理分期的增加而增加(P<0.01)。VEGF在膀胱癌病例组的表达阳性率为74.4%(61/82),与膀胱癌病理分期、组织学分级呈正相关(P<0.01)。与VEGF阴性表达组比较,VEGF阳性表达组的尿s Fas浓度增高,并且尿s Fas浓度随着VEGF表达的增加而增高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 s Fas和VEGF可能在膀胱癌的发生、发展中发挥着协同作用,检测尿s Fas和VEGF有利于判断膀胱癌的进展和预后。

术前尿可溶性Fas表达在预测非肌层浸润性膀胱癌复发中的价值

目的:探讨术前尿可溶性Fas(soluble Fas,sFas)表达在预测非肌层浸润性膀胱癌(non-muscle invasive bladder cancer,NMIBC)复发中的作用。方法:采用前瞻性研究方法,选取2008年1月至2011年4月期间经手术病理确诊的128例NMIBC患者,采用ELISA法测定手术前尿sFas值。结合多项临床病理参数进行非参数统计分析,采用Kaplan-Meier生存曲线分析尿sFas水平与NMIBC患者复发之间的关系,采用Cox比例风险模型进行分析,筛选影响NMIBC预后的独立因素,构建计算预后指数(prognosis index,PI)的公式。结果:NMIBC患者尿s Fas值随着病理分期、分级、欧洲癌症研究与治疗组织(EORTC)膀胱癌预后风险评分表评分的增加而增高(P<0.05),与年龄和性别无关(P>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线提示,与低sFas组比较,高sFas组的NMIBC复发率明显增高(P<0.001)。经Cox回归模型分析,尿sFas值、EORTC评分是影响NMIBC预后的独立因素(P<0.05),计算得到PI公式为0.004×尿sFas值+1.179×EORTC评分。结论:检测尿液sFas表达是预测NMIBC复发的有用指标,值得深入研究。

尿中可溶性Fas在膀胱癌诊断中的价值

目的研究尿中可溶性Fa（ssFas）在膀胱癌诊断中的价值。方法采用临床流行病学病例对照研究方法,随机抽取承德医学院附属医院泌尿外科2008年1月~2011年5月住院的膀胱癌病人和对照各68例,采用ELISA法测定标本尿中sFas水平,根据性别、年龄、膀胱癌病理分级和分期进行分析。根据ROC曲线中敏感性和特异性之和最高点为参考,制定尿中sFas的界值并计算ROC曲线下面积,分析诊断效率。结果尿sFas在膀胱癌病例组为（148.0±64.4）ng/mL,对照组为（58.5±35.0）ng/mL,差异有显著性（P〈0.01）。尿sFas随着病理分期、分级的增加而增加（P〈0.05）,与年龄、性别无关（P〉0.05）。根据制定的ROC曲线,尿sFaS在本次实验中的界值为91.0 ng/mL,曲线下面积为0.928（P〈0.01）,灵敏度为85.3%,特异度88.2%（P〈0.01）。结论尿液sFas检测技术具有敏感性高、无创伤、可定量分析等优点,可能作为诊断膀胱癌的一个指标。

肿瘤抗原致敏的树突状细胞诱导特异性抗膀胱癌作用的研究

目的研究不同肿瘤抗原提取物致敏的树突状细胞(DC)诱导特异性体外杀伤膀胱癌细胞的作用。方法反复冻融法和弱酸洗脱法分别获取膀胱癌细胞株BIU-87肿瘤抗原;联合应用重组人的GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者DC并分别负载膀胱癌肿瘤抗原,进而激活T淋巴细胞;用MTT法检测其对BIU-87体外杀伤效应。结果用枸橼酸-磷酸盐缓冲液洗脱或反复冻融BIU-87(1×107)后获得的肿瘤抗原蛋白含量分别为(426.0±4.3)μg和(681.0±5.6)μg;外周血单个核细胞可培养出DC;负载两种膀胱癌细胞抗原的DC致敏的CTL对BIU-87有明显的杀伤作用,而且负载酸洗脱肿瘤抗原肽的树突状细胞致敏的特异性CTL有更明显的杀伤作用(P<0.05)。结论弱酸洗脱和反复冻融都可以有效获取膀胱肿瘤抗原;以上法致敏的DC均可以高效活化CTL,后者对膀胱癌细胞株发挥特异性杀伤作用,而且弱酸洗脱组可以更为有效杀伤膀胱癌细胞,为以DC为基础的膀胱癌免疫瘤苗的临床应用提供一定的实验依据。

负载膀胱癌冻融抗原对树突状细胞分泌IL-12的影响

目的探讨负载膀胱癌冻融抗原对树突状细胞(DCs)分泌IL-12的影响。方法反复冻融法获得膀胱癌细胞株BIU-87细胞抗原;联合应用重组人的GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者DCs并负载膀胱癌肿瘤抗原;用ELISA法检测第3、6和9天培养细胞的上清液,评价DCs分泌IL-12p70的能力。结果联合应用重组人的GM-CSF、IL-4和TNF-α可在体外诱导出DCs;经ELISA方法检测,不同时期的DCs分泌IL-12的量不同,而且负载抗原DCs较未负载抗原DCs有更强的分泌能力(P<0.05)。结论IL-12p70的分泌量受DCs的成熟状态及某些刺激信号的影响,膀胱癌冻融抗原是其刺激信号之一。

两种膀胱癌抗原致敏方式对树突状细胞分泌IL-12的影响和意义

目的研究负载膀胱癌冻融抗原和酸洗抗原肽对树突状细胞(DCs)分泌IL-12的影响和意义。方法反复冻融法和弱酸洗脱法分别获得膀胱癌细胞株BIU-87肿瘤抗原;联合应用重组人GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导健康志愿者DCs并负载膀胱癌肿瘤抗原;ELISA法检测第3、6、9d培养细胞的上清液,评价DCs分泌IL-12p70的能力。结果联合应用重组人GM-CSF、IL-4和TNF-α可在体外诱导出DCs;经ELISA方法检测,不同时期DCs分泌IL-12的量不同,负载肿瘤抗原DCs较未负载肿瘤抗原DCs有更强的分泌能力,负载酸洗抗原肽组分泌IL-12的量高于负载膀胱癌冻融抗原组(P<0.05)。结论 IL-12在DCs刺激特异性CTLs的过程中可能发挥重要作用,其分泌量受DCs的成熟状态及某些刺激信号的影响,膀胱癌肿瘤抗原是其刺激信号之一。酸洗抗原肽对DC分泌IL-12有更强的刺激能力。

精子介导转基因技术的进展与争论

随着生物医学的不断发展,精子介导转基因技术正成为有希望的转基因方法。与其他基因转移方法相比,精子介导具有简单、高效、低廉、安全的特点。我们探讨精子结合外源DNA和DNA内化的分子模型,介绍精子介导转基因技术的改进方法,并指出存在的问题和伦理学争论,旨在推动该技术在生物技术领域的进一步发展。

异种器官移植研究中的生命伦理学思考

异种器官移植作为解决移植器官严重短缺问题的潜在途径,引发了诸多争论和关注,因而提出运用生命伦理学的原则,重新认识和评价异种器官移植,旨在对其研究进行规范。

肿瘤免疫编辑理论与树突状细胞个体化治疗肿瘤策略的思考

利用树突状细胞瘤苗提高机体免疫系统对肿瘤的特异杀伤能力,已成为肿瘤免疫治疗中的研究热点。根据肿瘤免疫编辑理论,肿瘤免疫可分为清除、平衡和逃逸3个阶段。应用该理论阐述应用树突状细胞个体化治疗肿瘤的策略具有重要意义。

负载酸洗抗原肽的树突状细胞诱导抗膀胱癌的作用

目的研究弱酸洗脱法提取抗原肽致敏的树突状细胞(DCs)诱导针对膀胱癌细胞的特异性杀伤效应。方法弱酸洗脱法获得BI U-87细胞抗原肽,用GM-CSF、IL-4和TNF-α体外诱导正常人DC并负载肿瘤抗原,进而激活T淋巴细胞;用MTT法检测其对BI U-87体外杀伤效应。结果弱酸可以洗脱肿瘤细胞膜表面大部分与MHC-Ⅰ类分子结合的抗原肽;外周血单个核细胞可培养出DC;效靶比40:1时负载膀胱癌抗原肽的DC诱导特异性CTLs可杀伤高达(78.5±7.0)%的BI U-87细胞。结论弱酸可以有效洗脱肿瘤细胞表面的Ⅰ类抗原肽,负载该类多肽的DC在体外可诱导出高效而特异的抗膀胱癌效应。

PAMAM-D对异种移植用外源基因转染猪精子细胞介导作用的研究

目的:探讨新型纳米材料聚酰胺-胺型树枝状聚合物PAMAM-D对异种移植用外源基因人衰变加速因子(hDAF)转染猪精子细胞的介导作用。方法:制备PAMAM-D/hDAF cDNA复合物,分为0.2、0.4、0.6、0.8和1.0μg组,每组cDNA再按照氮磷比10:1、20:1、40:1分别加入相应剂量PAMAM-D及不加PAMAM-D,对复合物进行酶切和电泳;将复合物与猪精子细胞共孵育后,原位杂交法检测hDAF对猪精子细胞的转染效率。结果:PAMAM-D能阻止PAMAM-D/DNA复合物中DNA的降解;PAMAM-D可以促进猪精子细胞对外源性DNA的摄取,其中0.4和0.6μg组的转染效率高于其他3组,0.4μg线状质粒加入PAMAM-D(氮磷比20:1)转染率为(47.5±0.2)%,是不加PAMAM-D的167%。结论:以PAMAM-D为载体可以提高外源基因对猪精子细胞的转染效率,有助于外源基因与精子细胞的稳定结合。

PAMAM-D对异种移植用外源基因转染猪精子细胞的安全性研究

目的研究应用PAMAM-D对异种移植用外源基因hDAF转染猪精子细胞的安全性。方法制备PAMAM-D/hDAFcDNA复合物,将PAMAM-D及复合物与处理后猪精子细胞共孵育,经精子质量检测工作站检测孵育后的精子活力和精子畸形率。结果经精子质量检测工作站检测,PAMAM-D和PAMAM-D/DNA复合物对猪精子细胞活力和精子细胞畸形率没有明显影响。结论 PAMAM-D及其复合物对猪精子细胞没有明显毒性,应用PAMAM-D制备异种移植用转基因动物是一种安全的方法。

负载冻融抗原的树突状细胞诱导特异性抗膀胱癌作用的研究

目的研究负载膀胱癌冻融抗原的树突状细胞(DC)诱导的对膀胱癌细胞的特异性杀伤效应。方法反复冻融法获得BIU-87细胞抗原;人单个核细胞在含重组人GM-CSF、IL-4和TNF-α的RPMI1640培养基中体外诱导出人DC并负载肿瘤抗原;9d后成熟DC与自体T细胞共孵育诱导膀胱癌抗原特异性CTLs;用MTT法检测其对BIU-87体外杀伤效应;用ELISA法检测DC分泌IL-12的能力。结果负载膀胱癌抗原的DC诱导的特异性CTLs可明显杀伤BIU-87细胞,在效靶比为40∶1时杀伤率为(65.5±6.4)%,显著高于各对照组(P<0.01);负载抗原DCs较未负载抗原DCs有更强的分泌IL-12能力(P<0.05),而且不同时期的DC分泌的量不同。结论负载膀胱癌抗原的DC在体外可诱导出高效而特异的抗膀胱癌效应,提示以DC为中心的肿瘤生物治疗有望提高膀胱癌综合治疗水平。

以树突状细胞为基础的基因治疗与前列腺癌

树突状细胞 (DC)是目前发现的功能最强大的抗原递呈细胞 ,已有大量的研究表明 ,DC在激活和维持肿瘤特异性T细胞免疫上起着关键性作用。DC的生物学特性、与前列腺癌的关系、以树突状细胞为基础的基因疗法治疗前列腺癌、DC的应用前景等已取得有价值的初步成果。

小剂量肝素钙干预严重脓毒症患儿凝血四项探讨

目的 探讨如何降低严重脓毒症患儿凝血功能紊乱的发生率.方法 应用前瞻性方法对严重脓毒症患儿61例,采用随机分配方法分为观察组31例,对照组30例.观察组给予肝素钙每次10～20 IU/kg,每6小时1次,皮下注射,连用3 d.观察两组凝血四项(TT、PT、APTT、FIB)的变化.结果 观察组在干预后第1天,APTT、PT异常例数与对照组比较,无显著性差异(P＞0.05),而在第2、3天,APTT、PT异常例数与对照组比较,均有显著性差异(P＜0.05);观察组在干预后第1、2、3天,TT、FIB异常例数与对照组比较,均有显著性差异(P＜0.05).结论 应用小剂量低分子肝素钙可减少严重脓毒症患儿凝血功能紊乱的发生,对改善严重脓毒症的预后有积极意义.

新辅助化疗对浸润性膀胱癌预后影响的Meta分析

目的探讨新辅助化疗对浸润性膀胱癌预后的影响。方法通过Medline、中国生物医学数据库检索国内外已发表的相关文献。选择试验组为新辅助化疗+手术或放疗,对照组为单独手术或放疗的浸润性膀胱癌临床随机对照研究(RCT),提取资料后对5年生存率进行Meta分析。结果从1991￣2003年,有10项研究入选,新辅助治疗组1392人,单纯手术组1382人,分析结果显示新辅助治疗组与单纯手术组比较,死亡风险优势比0.79(95%CI0.67￣0.94),P=0.006。结论新辅助化疗适用于浸润性膀胱癌的治疗,可改善预后。

电子病历与医院住院流程再造的关系

目的论述电子病历实现以患者为中心的医院住院流程管理思路和具体措施,探讨电子病历在医院住院流程再造中的促进作用。方法实施电子病历,结合质量管理措施,围绕医院住院流程再造,研究电子病历和医院管理之间的关系。结果采用结构化的电子病历有利于促进医院管理,提高临床管理质量,提升医院竞争力。结论未来医院管理应努力结合电子病历的监控和管理,大力发展以患者为中心的结构化电子病历。

住院电子病历质量控制的内容和方法

随着医院电子病历系统的应用,电子病历的质量管理已成为医院管理的重要组成部分。本文针对住院电子病历系统的质量控制内容和方法进行了探讨。