乙醛酸诱导肥胖小鼠肾草酸盐结石的模型建立

目的探讨乙醛酸诱导下肥胖小鼠肾草酸盐结石形成的模型建立与验证。方法选6周龄健康的无特定病原体(SPF)的C57BL/6N雄鼠24只,经过中国医学科学实验动物研究所质量检测,无特定病原体级,饲养于上海市第十人民医院科创中心实验室;普通饲料统一喂养1周。小鼠采用随机数字表法分为两组:对照组12只,采取普通饲料喂养;高脂实验组12只,采用高脂饲料喂养18周,诱导小鼠肥胖模型。将对照组12只小鼠采用随机数字表法分为腹腔注射乙醛酸的乙醛酸组6只和PBS组(腹腔注射磷酸盐缓冲液)6只。后将高脂实验同样随机分为肥胖乙醛酸组6只和肥胖组6只。乙醛酸组小鼠腹腔注射乙醛酸溶液连续7 d后检测4组小鼠血浆及肾脏中检测的草酸盐含量,比较4组小鼠草酸盐含量变化。两组间比较采用配对t检验,符合正态分布的计量资料以均数±标准差(±s)表示。结果4组小鼠的初始体重由(21.45±2.54)g到对照组(36.42±2.38)g,高脂实验组(44.91±2.89)g,体重相差大于20%。PBS组、肥胖组、乙醛酸组、肥胖乙醛酸组小鼠血浆中的草酸盐含量比较,差异有统计学意义[PBS组比乙醛酸组:(57.18±39.60)μmol/L比(281.11±33.54)μmol/L;PBS组比肥胖组:(57.18±39.60)μmol/L比(529.87±241.61)μmol/L;肥胖组比肥胖乙醛酸组:(529.87±241.61)μmol/L比(1156.46±186.83)μmol/L;乙醛酸组比肥胖乙醛酸组:(281.11±33.54)μmol/L比(1156.46±186.83)μmol/L,t=13.62、5.87、5.41、11.46,P<0.01]。PBS组、肥胖组、乙醛酸组、肥胖乙醛酸组小鼠肾脏中草酸盐含量比较,差异有统计学意义[PBS组比乙醛酸组:(377.96±148.39)μmol/L比(805.28±239.49)μmol/L;PBS组比肥胖组:(377.96±148.39)μmol/L比(1386.19±310.36)μmol/L;肥胖组比肥胖乙醛酸组:(1386.19±310.36)μmol/L比(3810.19±477.73)μmol/L;乙醛酸组比肥胖乙醛酸组:(805.28±239.49)μmol/L比(3810.19±477.73)μmol/L,t=5.57、6.63、11.46、14.54,P<0.01]。结论肥胖以及腹腔注射乙醛酸可以增加小鼠血浆与肾脏中的草酸盐含量引起肾草酸结石的形成,成功建立出肥胖小鼠草酸盐结石模型。

双极雄激素治疗恩杂鲁胺抵抗前列腺癌模型的建立

目的:探讨双极雄激素治疗(BAT)治疗的机制和探索未来联合免疫治疗的可能性。方法:以庚酸睾酮为实验药物,RM1细胞荷瘤后进行阉割和恩杂鲁胺治疗后进展的雄性C57小鼠为恩杂鲁胺抵抗的去势抵抗性前列腺癌(CRPC)动物模型,通过设立阴性对照组(对照组、去势+恩杂鲁胺组)、空白对照组(空白注射组、空植入体组)和实验组(雄激素注射组、雄激素植入体组)观察小鼠存活情况并应用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测小鼠血清中的雄激素含量来确认安全性和释放效率。以腹腔注射法和植入体法为BAT给药方式,治疗荷瘤恩杂鲁胺抵抗小鼠模型,检测体内肿瘤的大小和重量,蛋白质印迹法(Western blot)检测肿瘤组织磷酸化组蛋白(γH2AX)的变化,流式细胞仪和免疫组织化学法检测组织中CD3+T细胞变化,GraphPad软件进行统计分析,两组间比较采用t检验,多组间比较采用单因素方差分析,多组间两两比较用LSD-t检验。结果:注射法和植入体法均是有效的给药方式,并且能够显著提高血液中雄激素水平[(31.97±2.90)、(20.70±0.92)ng/ml比(1.14±0.43)、(1.21±0.34)ng/ml,F=149.653、40.399,P<0.01]和降低小鼠荷瘤大小[(907.60±55.95)、(894.71±100.65)mm 3比(1685.82±12.37)、(1642.83±8.30)mm 3,F=3.744、2.938,P<0.01],差异有统计学意义,相较于植入体法,注射法高浓度雄激素维持时间短但降低肿瘤大小效果好,能引起更多的DNA损伤(F=14.855,P<0.01),且能够部分提高CD3+T细胞的浸润(F=9.782,P<0.01),差异有统计学意义,但安全程度欠佳。结论:植入体法与注射法给予BAT均有效,注射法效果稍好于植入体法,注射法DNA损伤程度更大且造成更多的免疫细胞浸润,未来联合免疫治疗可能具有更好的效果。