转植酸酶基因玉米中植酸酶蛋白在模拟消化液中的稳定性研究

植酸酶作为应用最为广泛的重要饲料酶制剂之一,明确其在动物消化道环境中的稳定性对于其应用及作用方式的研究具有重要意义。本研究在体外建立了胃、肠两种模拟消化体系,取不同消化时间的样品进行Western杂交,结果显示在模拟胃液中植酸酶蛋白经60 min处理未被消化,而在模拟肠液中处理15 min内被全部消化,表明转植酸酶玉米种子中的植酸酶蛋白在模拟胃液中极难被消化,可稳定存在,在模拟肠液中可被消化。

花青素玉米的育种进展

花青素是自然界广泛存在的水溶性色素,也是常见的抗氧化物质。近年来,花青素在抗炎、防衰老等方面的保健功能逐渐得到关注和认可,随着甜、糯类型鲜食玉米市场需求和种植面积的逐年增加,富含花青素的鲜食玉米格外受消费者的欢迎。除了鲜食,花青素玉米还可以作为原材料进行工业提取,提取的花青素应用广泛。近几年,花青素玉米的育种发展迅速,并且在基因工程育种方面也取得了突破性进展。从玉米花青素的合成代谢调控途径、用途和市场前景、常规品种选育及基因工程研究进展等方面进行阐述,为花青素玉米未来的开发、育种方向选择提供借鉴。

水稻黄绿叶突变体研究进展

叶绿素是植物光合作用的重要色素,叶绿素的合成决定植物的光合效率,并且直接影响作物的产量和品质。叶绿素的合成及分解代谢是一个非常复杂的过程,在此过程中有较多的基因参与,其中任何一个基因发生突变都有可能影响叶绿素的合成及分解,从而使叶片表现出各种叶色变化或者会影响植物的生长。叶色突变体研究是探明叶绿体发育过程中基因功能的有效途径。因此,发掘和鉴定叶色突变基因,开展与叶绿素相关基因的定位、克隆及功能研究均具有重要的理论意义和应用价值。综述了水稻黄绿叶突变体的研究进展,旨在为研究水稻叶绿素生物合成途径和光合作用机制提供理想的材料,同时还可作为标记性状在杂种优势中进行利用。

转基因玉米中植酸酶蛋白沉淀条件探索

为了对玉米中表达的植酸酶蛋白的酶学性质进行深入研究,以转基因玉米籽粒中提取的植酸酶粗提液为研究材料,探索了植酸酶和总蛋白的溶解度与硫酸铵饱和度之间的关系,结果显示在0～60%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶仅占初提液中总植酸酶含量的1.85%,而在此范围内沉淀的总蛋白却占初提液的总蛋白含量的57%,植酸酶比活为0.44 U/mg;在60%～80%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶和总蛋白分别占初提液中各自含量的58%和10%,植酸酶比活为84.4 U/mg;在80%～90%硫酸铵饱和度范围沉淀的植酸酶收率占初提液中含量的1.9%。因此选用60%～80%硫酸铵饱和度分级沉淀植酸酶,在此条件得到的植酸酶比活比粗提液的植酸酶比活（13.8 U/mg）高6.1倍。

浅析如何将情景教学法融入英语教学

随着社会的发展和教育体制改革的不断深化,教学方法和模式也在不断发生着变化,很多学科的教学模式也在传统的基础上不断创新。本文针对英语教学方法改革,提出了如何在英语教学中融入情景教学法。

转phyA2、ZmTMT和Bar玉米的获得及其特性分析

【目的】玉米是家禽和单胃动物饲料的主要原料,但玉米籽粒中高活性的α-生育酚含量较低,且籽粒中的磷主要是以植酸磷的形式存在,动物不能有效吸收利用,因此,饲料中需要添加化学合成的维生素E和无机磷或微生物来源的植酸酶以满足动物生长发育的需要,增加了饲料成本,同时又容易造成磷污染。通过转基因获得α-生育酚含量和植酸酶活性大量提高的玉米,为饲用玉米育种提供材料基础。【方法】构建含有3个基因表达盒的载体,采用农杆菌侵染的方法转化玉米,草铵膦作为筛选压力;通过喷施草铵膦和PCR鉴定的方法筛选转基因阳性植株,RT-PCR分析目的基因在转录水平的表达情况;Western blot分析目的基因在翻译水平上的表达情况,采用分光光度计测定转基因玉米籽粒中的植酸酶活性,利用HPLC测定籽粒中的维生素E含量,同时比较转基因株系与野生型在其他营养成分和农艺性状上的差异。【结果】构建了胚乳特异性启动子123387驱动的植酸酶基因phyA2表达盒、胚特异性启动子13387驱动的玉米γ-生育酚甲基转移酶基因ZmTMT表达盒以及组成型启动子CaMV35S驱动的草铵膦抗性基因Bar表达盒串联的植物表达载体;转化玉米获得转基因植株;喷施草铵膦和PCR鉴定得到阳性植株;经过多个世代回交转育,获得目标性状均较好的2个转基因纯合玉米株系TPB1和TPB2;RT-PCR和Western blot分析结果表明phyA2、ZmTMT和Bar在转基因玉米中显著高表达。植酸酶活性测定结果表明,转基因玉米籽粒中植酸酶活性达到10000-13000 U·kg^-1。维生素E含量测定结果表明,转基因玉米籽粒中90%以上的γ-生育酚转化为α-生育酚,α-生育酚的含量达到50-70 mg·kg^-1,α-三烯生育酚的含量也有明显增加。转基因玉米中的植酸酶活性和α-生育酚含量完全能够满足动物饲料的需要。转基因株系的农艺性状与野生型无显著差异,TPB1的营养成分与野生型总体无显著差异,TPB2稍高于野生型但是未产生不利影响;且均具有草铵膦抗性。【结论】获得的富含维生素E和植酸酶、且具有除草剂抗性的玉米新材料可以用于玉米杂交种的开发应用,降低饲料成本,提高磷的利用率,减少环境污染。

玉米ZmCI-1B启动子及其7个5'端缺失体在转基因拟南芥中的活性分析

将ZmCI-1B全长启动子及其7个5'端缺失的启动子片段的表达载体分别转化农杆菌GV3101,经PCR鉴定正确之后,以拟南芥为遗传转化受体,利用花序侵染法将各个表达载体转化拟南芥。用PCR法检测转化后的拟南芥植株,取阳性植株的幼苗或花、角果进行GUS组织化学染色。结果表明,ZmCI-1B启动子在拟南芥中的调控特性与玉米中的不同;ZmCI-1B启动子及其7个5'端缺失启动子转基因拟南芥植株中GUS的染色部位各异,说明了不同长度的启动子功能特性不同,推测其可能与启动子上的顺式作用元件有关。

3个玉米黄叶突变体的光合特性研究

在农业生产中光合作用是作物积累生物量的主要方式,其主要依赖于多种光合色素和完整的叶绿体结构与功能。而玉米叶色突变体对于研究叶绿体发育、提高玉米光合作用能力和产量具有重要意义。以两个玉米自交系郑58(Z58)和B73为对照,对从甲基磺酸乙酯(ethyl methanesulphonate,EMS)处理后的不同玉米诱变群体中筛选到的2株黄叶突变体yl‑1(yellow leaf‑1,Z58背景)、yl‑2(yellow leaf‑2,B73背景)以及从玉米自交系Z58中发现的1株自然黄叶突变体yl‑3(yellow leaf‑3)等3个表型相似的玉米黄叶突变体的形态特征、光合色素含量、叶绿素合成前体物质含量进行了比较研究。结果表明,与对照相比,3个突变体在整个生长周期内均呈现不同程度的黄叶表型、不复绿、植株矮小、发育迟缓;叶片总叶绿素、叶绿素a和叶绿素b含量均显著降低(P<0.05),叶绿素a/叶绿素b比值显著升高(P<0.05);不同突变体的各类叶绿素合成前体物质含量有不同程度的降低。3个突变体的黄叶表型可能是由不同基因的突变导致相关四吡咯化合物合成异常引起的。研究结果为定位引起3个突变体黄叶表型的突变基因和进一步探讨其利用潜力奠定了理论基础。

农业类上市公司财务舞弊频发原因——基于舞弊三角形理论

近年来,农业类上市公司成为财务舞弊事件频发的重灾区。本文基于舞弊三角形理论,结合农业行业固有特性,分析导致农业类上市公司财务舞弊的特有压力、机会和借口。分析发现农业类上市公司通常面临盈利持续增长、技术转型等压力;生物资产难盘点、交易分散、税收优惠等为其提供舞弊机会;自然灾害是农业类上市公司舞弊惯用的借口。

植物生长调节剂在茄子上的应用效果试验

在茄子上喷施植物生长调节剂"植宝素"、"胺鲜酯",结果表明,植物生长调节剂可以明显地促进茄子的生长、发育,提早上市,提高品质,增加产量,从而提高经济效益。

日光温室越冬茬茄子嫁接栽培技术

新绛县以农业生产为主，蔬菜是其主导产业，茄子又是蔬菜种植的主要品种之一。由于连作茄子极易发生枯萎病，为此我们试验推广茄子嫁接技术，克服了茄子连作障碍，从而增强了茄子的抗逆性及抗病虫能力，提高了茄子的产量，增加了菜农的收入。一。

日光温室越冬一大茬番茄高效栽培技术

介绍了越冬一大茬番茄高效栽培技术的相关技术与病虫害防治办法,为实际生产提供技术指导。

大力推广蔬菜优良品种 推进新绛蔬菜提质增效

概述了新绛县以蔬菜为主导产业的发展现状,以及建立绛州绿.瑞克斯旺高科技新品种示范中心的情况,分析指出该县推广应用蔬菜优良新品种尚存在一些急需解决的问题,并提出几点具体建议。

远程团队护理支持对脑肿瘤患者负性情绪及生命质量的影响分析

目的:研究远程团队护理支持对脑肿瘤患者负性情绪及生命质量的影响。方法:取2016年11月-2018年11月我院脑肿瘤患者54例作为研究对象,随机分研究组(远程团队护理支持)与对照组(常规护理)各27例,评估两组护理前后负性情绪与生活质量。结果:护理前两组负性情绪评分无差异,P>0.05;护理后研究组较对照组焦虑抑郁评分均低,生理职能、生命活力、躯体疼痛与生命健康分值高,P<0.05(具统计学差异)。结论:对脑肿瘤患者采用远程团队护理支持能改善其负性情绪,提高预后效果与生活质量,促进患者病情早期康复,值得借鉴。

大棚甜瓜早春茬栽培技术

大棚甜瓜经济效益比较高。文章根据太原市尖草坪区大棚甜瓜栽培技术实践,介绍了大棚甜瓜早春茬栽培管理技术,为种植户提供借鉴。

功能性构音障碍儿童与正常儿童的音位对比式言语识别能力的研究

目的研究功能性构音障碍(functional articulation disorder,FAD)儿童的音位对比式言语识别能力,以探讨其病因及发病机制。方法选择符合FAD诊断标准的儿童及同年龄段正常儿童各100例作为被试,采用《儿童音位对比式识别能力评估(孙喜斌-刘巧云词表)》在安静房间中进行听觉识别能力评估,并对其分别进行智力及语言发育水平测定。结果 FAD儿童的声母、韵母及各项分测试识别能力均低于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。除相同方式不同部位、卷舌音与非卷舌音、前鼻韵母与后鼻韵母外,FAD儿童的各项识别能力得分与构音障碍程度呈负相关。擦音与无擦音测试中,伴有语言发育迟缓的FAD儿童(36例)的识别能力低于单纯FAD儿童(64例),但差异无统计学意义(P>0.05);其余各项测试中,伴有语言发育迟缓的FAD儿童的识别能力低于单纯FAD儿童,且差异有统计学意义(P<0.05)。且伴语言发育迟缓的FAD儿童中中重度构音障碍者占80.56%。结论 FAD儿童的音位对比式言语识别能力明显落后于正常儿童,音位识别能力落后可能为FAD病因之一。

黑曲霉Aspergillus niger 963植酸酶基因phyA2 N-糖基化突变体的构建与表达分析

为研究N-糖基化对黑曲霉Aspergillus niger963植酸酶蛋白酶学性质的影响,利用Megaprimer PCR介导基因定点突变的技术,构建了植酸酶phyA2基因两个N-糖基化突变体,即将该基因编码蛋白质N87位和N102位的天冬酰胺密码子置换为编码与其具有相似结构的谷氨酰胺密码子,两个突变体分别命名为N87Q、N102Q,经测序结果比对和图谱分析,表明在核酸水平上成功实现了点突变,构建了酵母表达载体pPIC9-N87Q,pPIC9-N102Q,转化毕赤酵母GS115,经发酵罐水平诱导表达后,获得了N-糖基化缺失突变蛋白,对突变体蛋白在60℃进行处理发现,突变体N87Q处理1h后剩余50%的酶活,N102Q处理10min后酶活完全丧失,在37℃,不同的pH缓冲体系（pH1~10）处理1h,N87Q剩余约大于70%的活性,而N102Q在pH〉8的环境下,没有检测到酶活。

探讨多媒体应用在英语教学中的成效

随着科学技术的发展,现代教育科学技术得到了较好的发展,随着多媒体教学的普及,可以把原本抽象的教学理论形象化。特别能为英语教学提供一个生动形象的画面和原生态的语音环境,可以激发学生的学习英语的积极性和主动性,实现课堂教学的趣味性和高效率。通过多媒体在英语教学的应用,可以有效提高英语教学的成效,丰富学生的知识面。

转基因玉米中植酸酶蛋白免疫亲和纯化体系的建立

为深入研究转基因玉米所表达的植酸酶蛋白的酶学性质,评价重组蛋白的致敏性和饲用安全性,必须获得高纯度植酸酶蛋白。利用识别4个不同表位的单克隆抗体制备了植酸酶蛋白亲和层析体系。结果显示,通过80%硫酸铵沉淀植酸酶蛋白粗提液初步浓缩目的蛋白后,再经过透析去除高浓度盐离子,进而通过免疫亲和层析可获得在SDS-PAGE胶上条带单一的植酸酶蛋白,比活可达470.99 U/mg。同时,将上述免疫亲和层析法对植酸酶的纯化效果与离子交换层析方法进行了对比,结果表明免疫亲和层析法具有稳定、快速和纯化产物比活高等优势,所获得的目的蛋白满足各种检测要求,优于离子交换层析方法。

在无菌隔离器内进行冻干制剂生产操作的规范性研究

无菌隔离器在制药行业的使用愈加广泛,但已有的研究更多地聚焦于设计布局、物料状态等方面,对人员操作因素的影响方面关注较少。以本公司冻干制剂生产车间为例,设计了一系列合理的无菌隔离器内干预操作,并在操作人员实行干预操作的基础上进行气流流型测试和无菌工艺验证。根据验证结果,判定操作人员在日常生产中的操作具有规范性,可为其他车间的无菌隔离器操作人员的培训和考察提供参考。