miRNA-21提高骨髓间充质干细胞心肌样分化和旁分泌的作用

目的 探讨miRNA-21提高BMSC向心肌样细胞分化和促进旁分泌的作用。方法 分离培养骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cell,BMSC),行BMSC性质鉴定;通过构建缺血心肌动物模型;健康SD大鼠20只,随机分为miR-21-OE组、miR-21-KD组和对照组,每组各5只;将成功构建的miR-21-OE和miR-21-KD慢病毒载体侵染BMSC,使用western-blot检测cTnI、Ajuba、isl1的表达情况。分组将BMSC移植到急性缺血心肌SD大鼠动物模型中,western-blot鉴定各组中BMSC体内分化为心肌样细胞VEGF、bFGF等的表达情况。结果 成功分离培养BMSC,成功构建miR-21-OE和miR-21-KD慢病毒感染BMSC;WB检测到cTnI在miR-21-OE组高表达,当miR-21表达增高时,抑制Ajuba的表达,加强Isl1表达。生物细胞学技术检测miR-21-OE组心肌梗死区域缩小,VEGF及bFGF表达增高。结论 miRNA-21能够提高BMSC向心肌样细胞分化能力和促进BMSC的旁分泌作用,从而提高缺血心肌功能。

左主干及三支病变经皮冠状动脉介入与冠状动脉搭桥术后随访对比研究

目的总结比较冠心病（左主干和三支病变）患者接受经皮冠状动脉介入（PCI）或冠状动脉旁路移植术（CABG或者OPCAB）后的治疗效果。方法回顾性连续分析我院2009年9月到2012年9月期间行PCI或者CABG的左主干及三支病变患者，比较分析在住院期间、出院后12个月出现的终末事件，包括死亡、心肌梗死、心绞痛复发和再次介入等。结果共有1292例患者被纳入，分成PCI组626例，CABG组666例。随访12个月，90％的PCI和97％的CABG患者纳入。随访期间，PCI组死亡40例，CABG组死亡36例；心肌梗死PCI组36例，CABG组4例；再发心绞痛PCI组168例，CABG组18例；再干预PCI组134例，CABG组6例。心脑血管事件发生率CABG患者较PCI患者低（P〈0．05）。结论对三支和（或）左主干病变，CABG在减少不良心脑血管事件上优于PCI；但还需要更长期的随访研究。

MSC体外诱导分化为心肌样细胞的鉴定及Nesprin蛋白表达研究

目的体外诱导大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)向心肌细胞分化并进行相关鉴定,观察分化过程中细胞Nesprin蛋白表达的变化。方法大鼠MSC经Ficoll密度梯度离心法分离获得后贴壁传代培养,流式细胞术鉴定第2代MSC表面抗原表达。以10μmol/L 5-氮杂胞苷(5-Aza)诱导第2代MSC向心肌细胞分化,观察细胞形态学改变;RT-PCR、免疫组织化学法和免疫荧光细胞化学染色鉴定心肌细胞相关蛋白Desmin、α-sarcomeric actin、cardiac TroponinⅠ(cTnⅠ)mRNA和蛋白表达;Westernblotting检测MSC分化前后Nesprin蛋白表达。结果经5-Aza诱导分化后的MSC细胞及细胞核增大,形态渐趋一致,大部分呈长梭形;细胞Desmin、α-sarcomeric actin、cTnⅠmRNA和蛋白呈阳性表达。免疫荧光细胞化学染色显示Nesprin蛋白定位于核膜,Western blotting分析发现诱导分化后细胞Nesprin蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论成功诱导大鼠MSC向心肌细胞分化;Nesprin蛋白在分化后细胞中的表达明显增加,提示Nesprin可能参与MSC向心肌细胞样变化的过程。

骨髓间充质干细胞在梗死心肌移植再生后nesprin蛋白表达的实验研究

目的:研究骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植到急性心肌梗死区心肌样细胞再生后ne-sprin蛋白的表达情况。方法:大鼠16只,随机分为实验组和对照组,每组8只。利用密度梯度分离法和贴壁培养MSCs,流式细胞仪检测MSCs表面相关抗原、DAPI标记MSCs备用;SD大鼠开胸手术结扎心脏冠脉左前降支建立心肌梗死模型,并在实验组梗死区注射MSCs,对照组注射DMEM;术后3周取梗死区心肌,利用免疫细胞学化学方法鉴定肌节肌动蛋白和肌钙蛋白的表达,免疫荧光技术和蛋白质印迹鉴定nesprin蛋白在MSCs移植后的表达。结果:MSCs移植到梗死缺血区3周后可以用DAPI示踪、并有心肌细胞特异蛋白呈阳性表达;免疫荧光和蛋白质印迹鉴定在MSCs移植前后有nesprin蛋白的表达,移植后出现nesprin蛋白表达量的增加。结论:MSCs在梗死心肌内移植具有分化再生的能力,nesprin蛋白在MSCs移植后出现表达量的增加,可能在MSCs分化为心肌细胞样过程中起到一定的作用。

细胞Nesprin蛋白的相关研究

Nesprin蛋白是新发现的细胞核膜蛋白质,有20余种蛋白质亚型,其中Nesprin-1和Nesprin-2是两种主要的Nesprin蛋白亚型,在细胞分化、细胞周期有丝分裂、RNA的复制转运、细胞核膜的稳定方面起重要作用。Nesprin蛋白及其相关核膜蛋白的缺失会影响细胞骨架蛋白的动态平衡,

尿毒症合并DEBAKYⅢ型主动脉夹层动脉瘤的治疗体会及文献复习

目的探讨尿毒症患者并发DEBAKYⅢ型主动脉夹层的原因及处理方法。方法结合仁济医院近3年收治的4例及近年国内外各类期刊发表12例，对共16例尿毒症合并DEBAKYⅢ型主动脉夹层进行分析总结。结果经内科药物强化治疗、控制血压及心率、行覆膜支架腔内修复术（TEVAR）、加强血液透析等治疗，好转14例（复发1例，经治疗好转），自动出院1例，死亡1例。结论尿毒症合并DEBAKYⅢ型主动脉夹层可能为多种因素共同作用的结果，经内科药物强化治疗，同时行TEVAR及加强血液透析，可得到有效控制。

MicroRNA-21在心血管疾病中的研究

MicroRNAs （miRNAs）是一类高度保守的18～22个碱基长度的非编码小RNA;它们通过诱导转录抑制或转录降解对基因表达进行负调控[1].最初人们只认识到RNA聚合酶Ⅲ是驱动miRNAs转录的主要因素;然而部分前体长链miRNA （pri-miRNA）转录子长达数千个碱基对,包含4个或更多的尿嘧啶,这会导致聚合酶Ⅲ转录介导作用的终止[2].

冠状动脉临界病变的评价

冠状动脉造影是诊断冠心病的“金标准”,但其对冠状动脉的储备功能、发作的缺血程度和心肌缺血的阈值均无法评价.对冠状动脉临界病变,冠状动脉造影有明显的局限性,应该进一步进行IVUS、OCT或FFR等检查,再给予相应的药物治疗、DES或者CABG治疗;同时进行必要的临床随访,必要时进行造影随访,建立完善的冠状动脉评价与治疗体系.

Nesprin基因RNAi慢病毒载体的构建

背景:Nesprin蛋白缺失将影响细胞骨架组织和动态平衡,引起细胞骨架刚性丧失或导致细胞过早成熟老化,其对间充质干细胞的作用如何?目的:构建Nesprin蛋白siRNA慢病毒载体,并转染骨髓间充质干细胞。方法:针对Nesprin靶基因序列设计并合成4对miRNA oligo,将4种miRNA干扰质粒转入大鼠血管平滑肌细胞,筛选最有效干扰序列;将最佳干扰序列和pDONR221载体进行重组反应,获得含干扰序列的入门载体,再将入门载体和慢病毒表达目的载体pLenti6/V5-DEST进行重组反应,获得含干扰序列的慢病毒表达载体,转染包装细胞293T细胞,包装慢病毒,以293T细胞GFP蛋白水平测定病毒滴度。慢病毒转染大鼠骨髓间充质干细胞。结果与结论:测序证实合成的4对miRN Aoligo正确,RT-PCR和western-blot筛选出最佳干扰miRNA质粒为SR-3,成功构建了Nesprin siRNA的慢病毒载体LV-siN esprin。包装慢病毒,浓缩病毒悬液的活性滴度为106TU/mL。慢病毒成功了转染骨髓间充质干细胞细胞。

丁酸钠诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

背景:组蛋白乙酰化是诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的机制之一。目的:观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠对体外培养的骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的影响,并分析其诱导分化的机制。方法:分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞,并进行鉴定。取第2代骨髓间充质干细胞,应用1mmol/L丁酸钠诱导其向心肌样细胞分化。结果与结论:实验分离培养的骨髓间充质干细胞高表达CD90,CD29;低表达CD45,CD31。加入丁酸钠后细胞增殖能力及组蛋白去乙酰化酶活性明显降低,但未发生明显凋亡现象,表明丁酸钠具有低毒性的特征。real-timePCR检测显示,经丁酸钠诱导后细胞GATA-4,MEF-2c,β-MHC等心肌细胞早期标志基因表达率明显增高(P<0.05)。Westernblot检测发现,经丁酸钠诱导后细胞心肌细胞特异性蛋白连接蛋白43和肌钙蛋白T的表达明显增高。免疫荧光测得的肌钙蛋白T表达结果与Westernblot一致。说明丁酸钠能够有效诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化,其机制可能与抑制组蛋白去乙酰化酶活性,增强组蛋白的乙酰化有关。

并行循环下不停跳冠状动脉旁路移植术在冠心病患者中的应用

目的 评价并行体外循环下不停跳冠状动脉旁路移植术在冠心病患者中的应用价值.方法 回顾性分析2008年1月至2013年1月于仁济医院心血管外科行并行体外循环下不停跳冠脉旁路移植术（OnPBH-CABG）患者42例（男性30例、女性12例）,选取非体外循环冠脉搭桥术（OPCAB）患者62例（男性46例、女性16例）对照,比较术前及围手术期临床资料.结果 并行循环组术后早期临床效果良好,呼吸机辅助时间[（21.73±17.69）h]、重症监护病房停留时间[（4.64±2.11）d]、院内死亡率[（2.38）％]及术后各类并发症等指标与OPCAB组比较均未见统计学差异.结论 并行体外循环下不停跳冠状动脉旁路移植术是一种安全、有效的手术方式.

经血管腔内修复术治疗Stanford B型主动脉穿透性溃疡合并壁间血肿的5年随访结果

目的评估Stanford B型症状性主动脉穿透性溃疡合并壁间血肿行血管腔内修复术的临床效果。方法选取2009年1月到2013年4月上海交通大学医学院附属仁济医院收治的Stanford B型急性主动脉综合征患者118例,并进行了血管腔内修复术(thoracic endovascular aortic repair,TEVAR)治疗。其中,28例患者通过计算机断层扫描血管成像(computer tomography angiography,CTA)诊断为B型主动脉穿透性溃疡(penetrating aortic ulcer,PAU)合并壁间血肿(aortic intramural hematoma,IMH),术后定期行CTA随访评估。所有28例患者的临床随访资料保存60个月。结果主动脉穿透性溃疡(PAU)合并壁间血肿(IMH)的患者在发病14 d后仍有可能继续进展。28例患者通过股动脉入路行TEVAR,成功率100%。1例患者置入了2个大血管支架。26例患者接受门诊随访,随访时间3~42个月(平均26个月),随访率达到92.8%,2例患者分别在术后第4个月和第16个月失随访。其余患者在随访期间无胸背疼痛。随访中2例左锁骨下动脉被支架覆盖的吸烟史患者在复吸时出现一过性眩晕。2例患者出现Ⅱ型内漏但不伴主动脉扩张,所有患者未再进行主动脉相关介入干预治疗。1例患者在术后42个月因车祸死亡。4例患者在随访期间接受过非心血管类手术。术后1年,2年和5年总体存活率分别为100%,100%和96.1%。结论症状性Stanford B型主动脉穿透性溃疡合并壁间血肿行血管腔内修复术微创、安全、有效,中远期随访结果满意,可能成为首选的治疗方案。术后严格随访,血压控制是保证远期效果的关键措施。长期结果有待进一步观察。

变频给水控制在余热电站锅炉系统中的应用

介绍了水泥窑窑余热电站锅炉给水系统的实际情况 ,论述了变频器应用在泵类负载中 ,对节能降耗 ,减少维修费用 ,延长设备使用寿命等方面的诸多好处。

初中生写作技能的培养路径与评价

写作是初中语文教学的重要组成部分,教师需引导学生多看、多读和多写。多看范文有助于学生熟悉不同文体的格式,多读各种题材的文本可以丰富词汇和提高表达能力,而多写则可以建构思维模型,锻炼写作技能。评价初中生的写作技能可以通过教师评价、自我评价和生生互评来实现。教师评价涵盖过程性评价和最终评价,帮助学生全面提高写作技能。本文分析了初中生写作技能的现状,提出了初中生写作技能的培养路径及评价方法,旨在帮助教师更好地引导学生写作,提升写作教学的质量。

非体外循环CABG中右冠状动脉突发缺血事件的判断和处理经验

目的：评估冠心病行非体外循环CABG中，对右冠状动脉突发急性缺血事件的判断及处理经验。

余热发电技术在水泥窑改造中的应用

本文着重介绍水泥窑余热发电系统工艺，分析水泥窑能源综合利用，列举余热发电技术在环保排放达标、综合利用能源方面的应用实例，并叙述了节能降耗的实施过程和效果。

“成长记录袋”:记录成长 促进发展

“成长记录袋”是当前国外广泛应用的一种质性评价方式。它符合教育评价发展的趋势,可以在一定程度上克服传统评价的弊端。当前,在中小学推广“成长记录袋”评价很有必要。为此,我们刊载北京石景山区古城中心小学校长杨文钢及该校两位教师的文章,希望能对读者有所帮助。

建筑围护结构外保温技术在既有居住建筑节能改造中的应用

本文介绍了目前我国北方地区建筑围护结构外保温技术要求,分析,比较不同材料的保温特性,阐述了利用建筑外保温技术不仅节能创造可观的经济效益,而且利于环境保护具有明显的社会效益最后,本文得出了有益于工程实践的结论。

不同移栽期对烟株生长发育及烤后烟叶产质量的影响

为明确盘县烟区烤烟适宜移栽时期,试验设置了4个移栽期处理(4月27日、5月7日、5月17日、5月27日),以调查不同移栽期对烤烟生长发育、病害发生、经济性状等的影响。结果表明,在盘县烟区烤烟以4月下旬移栽最为适宜,此时移栽的烤烟可有效利用烟区光照、温度、降水、热量等气候资源,促进烟株早生快发,有效控制烤烟田间病害发生,提高烟叶产质量。

4种诱抗剂对烟草叶枯病的诱抗效果

【目的】探明不同诱抗剂对烟草叶枯病的防控潜力,为该病害的生物防治药剂选择提供依据。【方法】通过室内盆栽和田间试验方法,研究0.136%赤·吲乙·芸苔可湿性粉剂、0.1%芸苔素内酯可湿性粉剂、壳聚糖和0.5%香菇多糖水剂4种诱抗剂对烟草细菌性叶枯病的诱抗效果。【结果】盆栽试验结果表明,0.136%赤·吲乙·芸苔、壳聚糖、0.1%芸苔素内酯和0.5%香菇多糖分别以10000倍液、500倍液、1000倍液和800倍液的诱抗效果最佳;田间试验结果表明,4种诱抗剂处理均能诱导增强烟株对细菌性叶枯病菌的抗病性,且叶枯病发病前期诱抗效果较好,其中以0.136%赤·吲乙·芸苔可湿性粉剂的诱抗效果最佳,相对防效为65.53%;同时该处理也能较好地改善烟株农艺性状,提高烟叶的产量和品质。【结论】0.136%赤·吲乙·芸苔可湿性粉剂可作为防治烟草叶枯病的生物药剂加以应用。