m^(6)A甲基化酶相关基因在牛骨骼肌生成中的表达

【目的】近年来,RNA m^(6)A甲基化修饰在肌肉发育中的作用不断被发现,通过探究m^(6)A甲基化酶相关基因,包括METTL3,METTL14,WTAP,FTO和ALKBH5,在牛肌肉组织以及骨骼肌卫星细胞(skeletal muscle satellite cells, SMSCs)增殖和分化过程中的表达,同时分析体外成肌分化过程中m^(6)A甲基化水平的变化,为阐明m^(6)A修饰在骨骼肌发育中的作用及机制提供参考。【方法】使用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测m^(6)A甲基化酶相关基因在新生和成年牛不同部位骨骼肌中的表达。随后在秦川牛肉用新品系背最长肌中分离SMSCs,通过生长曲线、免疫荧光和RT-qPCR技术验证SMSCs的增殖和成肌分化功能,使用RT-qPCR检测m^(6)A甲基化酶相关基因在SMSCs增殖期24、36、48、60、72 h和分化第0、2、4、6、8天中的时序表达谱。最后利用LC-MS/MS和Dot blot技术检测SMSCs分化过程中m^(6)A甲基化水平的变化。【结果】METTL3、METTL14和WTAP等m^(6)A甲基化转移酶基因在成年牛背最长肌、前腿肌和后腿肌中的表达量均显著低于新生牛(P<0.01)。FTO和ALKBH5等m^(6)A去甲基化酶基因在成年牛后腿肌中的表达更高(P<0.01),ALKBH5在成年牛背最长肌中的表达也较高(P<0.01)。分离的SMSCs具有良好的生长状态且可正常成肌分化。在SMSCs增殖期,METTL3表达逐渐下降,但在增殖后期时明显提高。METTL14在增殖期的表达变化差异不明显,WTAP则在增殖48 h后表达逐渐降低。而FTO和ALKBH5在增殖期的时序表达类似,60 h之前变化不显著,但在72 h时显著提高。在SMSCs成肌分化过程中,METTL3、METTL14和WTAP的表达模式基本一致,分化前期上升,随后下降,在分化末期表达增加。而FTO的表达随分化进行逐渐增加,ALKBH5则在分化前4天表达上升,随后不断下降。此外,在SMSCs分化过程中,mRNA的整体m^(6)A水平下降(P<0.01)。【结论】m^(6)A甲基转移酶和去甲基化酶在新生牛和成年牛骨骼肌中的表达变化存在较为明显的差异,表明m^(6)A修饰可能对秦川牛骨骼肌的发育具有重要作用。同时,这些m^(6)A相关甲基化酶可能参与调控牛骨骼肌卫星细胞的增殖和分化。这一发现为研究m^(6)A甲基化修饰调控骨骼肌生成的作用及机制提供理论依据。

m^(6)A甲基化修饰相关酶基因在牛脂肪生成中的表达分析

探究参与m^(6)A修饰的相关酶基因包括m^(6)A甲基转移酶METTL3、METTL14、WTAP和m^(6)A去甲基化酶FTO、ALKBH5,在牛不同组织以及前体脂肪细胞增殖和分化过程中的表达水平,为阐明m^(6)A修饰在脂生成中的功能研究提供参考。使用实时荧光定量PCR技术检测基因在新生和成年秦川肉牛不同组织,以及在前体脂肪细胞中的表达;采用CCK-8和油红O染色检测前体脂肪细胞的生长曲线及其成脂分化中的脂滴形成情况。5个基因均在骨骼肌中低表达,其余组织中高表达,而在成年牛脂肪组织的表达水平均显著高于新生牛(P<0.05)。分离的前体脂肪细胞具有良好的生长状态且可正常成脂分化。在牛前体脂肪细胞增殖期,METTL3、METTL14和WTAP的表达在前期下降,之后有所上升但仍维持较低的表达水平。FTO的表达呈缓慢上升趋势。ALKBH5在增殖前期上升,中期下降,在第4天后不断增加(P<0.01)。在前体脂肪细胞分化过程中,METTL3、METTL14和FTO的表达模式基本一致,在分化前期下降,中期高表达,随后降低。而WTAP和ALKBH5的表达随分化进行逐渐增加。结果表明m^(6)A修饰对秦川牛脂肪发育和沉积具有潜在的重要作用,且m^(6)A甲基化酶可能在体外调控牛前体脂肪细胞的脂生成。

秦川牛肉用新品系生长发育规律研究

试验旨在研究秦川牛肉用新品系生长发育特点与规律,为秦川牛肉用新品系后续选育改良提供科学依据。选取不同发育阶段(6月龄、12月龄、18月龄、24月龄和36月龄)的秦川牛肉用新品系各10头,公母各半,共50头,测量其在不同月龄的体重和体尺(包括体高、腰高、体斜长、胸围、胸深、管围、腰角宽、尻长、坐骨端宽),测量3次取平均值,计算体尺指数(体长指数、胸围指数、体躯指数、管围指数),分析体尺与体重之间的相关系数。结果发现:①无论是对于公牛还是母牛,它们在6～12月龄这个生长阶段体重和体尺的生长速度都达到最大,体长指数、胸围指数和体躯指数都是随着年龄的增长而增加。②它们的生长发育符合一般牛的生长发育特点,即最先发育的是体高,其次是体长,最后是胸围。③分析秦川牛肉用新品系体重和体尺随月龄变化的变异系数发现,在24～36月龄时生长发育趋于平缓,初步判定新品系在36月龄时就趋于体成熟。④在对体重与体尺的相关性分析中,公牛和母牛有所不同,公牛各体尺与体重的相关性结果是:体高(0.908)、腰高(0.857)、体斜长(0.856)、胸围(0.994)、胸深(0.913)、管围(0.823)、腰角宽(0.931)、尻长(0.842)、坐骨端宽(0.776);母牛各体尺与体重的相关性结果是:体高(0.909)、腰高(0.826)、体斜长(0.952)、胸围(0.985)、胸深(0.904)、管围(0.738)、腰角宽(0.943)、尻长(0.805)、坐骨端宽(0.876);公、母牛均是胸围与体重的相关性最强,且母牛各体尺与体重的相关性普遍高于公牛。综上所述,秦川牛肉用新品系在生长早期生长发育潜力大,应加强此阶段的饲养管理,使其尽快达到体成熟,同时也应注重性别的差异,公母牛要分群饲养管理,以便获得最大养殖效益。

干扰TP53INP2抑制牛成肌细胞分化

【背景】肌肉可以维持哺乳动物运动功能并调节机体代谢,它的数量和分布对肉质有重要影响,骨骼肌的生长发育及其遗传特性在很大程度上影响甚至决定家畜的产肉量和肉品质,研究骨骼肌的生长发育具有重要意义。TP53INP2对自噬的调控作用以及对前体脂肪细胞分化的调控机制已有研究,而对于牛成肌细胞分化的影响尚未报道。【目的】探究TP53INP2对秦川牛成肌细胞分化的影响,为肉牛肉用性状分子育种工作提供理论依据。【方法】利用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)技术检测了TP53INP2在24月龄秦川牛不同组织中的表达特性,同时分析了其在体外培养的牛骨骼肌成肌细胞不同分化时期的表达规律;合成TP53INP2基因siRNA并转染秦川牛成肌细胞,转染后12h进行诱导分化,观察成肌细胞表型变化,并利用RT-qPCR技术和Western Blot技术分别检测其在诱导分化第四天时分化标志基因和蛋白的表达情况。【结果】1.RT-qPCR结果显示,TP53INP2在成年秦川牛背最长肌组织中表达量最高,在小肠组织中表达量最低。TP53INP2在成年牛心脏、肝脏、肾脏、网胃、瘤胃中表达量较高,在其余组织中表达量较低(与背最长肌相比)。2.随着成肌细胞的分化,该基因在第0—4天表达量呈上升趋势且在第4天达到峰值,随后表达量呈下降趋势。3.在成肌细胞中干扰TP53INP2后,试验组肌管的数量和长度均显著低于对照组。4.干扰TP53INP2并提取细胞总RNA,RT-qPCR结果显示,成肌细胞分化标志基因肌细胞生成素(MYOG)和肌球重链蛋白3(MYH3)相对于对照组表达量显著降低。5.干扰TP53INP2并提取细胞总蛋白,Western Blot结果显示,试验组MYOG、MYH3、MYOD的蛋白表达量均降低且与对照组相比差异极显著。【结论】干扰TP53INP2对牛成肌细胞的分化具有抑制作用,提示该基因可能对秦川牛肌肉组织的生长发育具有重要的调控作用,可对其进行深入的功能研究以期用于肉牛的分子育种实践中。

秦川肉牛AdipoR1和AdipoR2基因克隆、生物信息学分析及表达研究

试验旨在利用生物信息学方法对秦川牛肉用新品系(以下简称“秦川肉牛”)AdipoR1、AdipoR2基因的CDS区进行克隆及分析,并探究其在秦川肉牛不同组织及肌细胞诱导分化不同时间的表达情况。以秦川肉牛为研究对象,经PCR扩增得到AdipoR1、AdipoR2基因CDS区序列,运用生物信息学软件对其功能结构进行预测,同时采用实时荧光定量PCR术获得AdipoR1、AdipoR2基因在秦川肉牛15个组织和诱导分化后不同时间的表达量,再进行差异分析。结果显示,秦川肉牛AdipoR1基因编码序列全长为1128 bp,编码375个氨基酸,蛋白分子质量为42446.41 u,理论等电点为6.70,AdipoR1蛋白二级结构主要由α-螺旋构成,二、三级结构预测结果一致,属于亲水性蛋白,没有信号肽位点;AdipoR2基因编码序列全长1161 bp,编码386个氨基酸,蛋白分子质量为43707.70 u,理论等电点为6.27。亚细胞定位结果表明,AdipoR1蛋白有60.9%的可能定位在细胞膜,AdipoR2蛋白有73.9%的可能定位在细胞膜。不同物种氨基酸系统进化树结果显示,秦川肉牛AdipoR1、AdipoR2基因编码的氨基酸序列分别与瘤牛和野牦牛的亲缘性最近。实时荧光定量PCR结果显示,AdipoR1、AdipoR2基因在秦川肉牛心脏、肝脏、肌肉等15个组织中均有表达,且在肌肉组织中的表达量最高,极显著高于其他组织(P<0.01),在肌细胞诱导分化时序上也有明显差异。本试验揭示了AdipoR1和AdipoR2基因在秦川肉牛不同组织和肌细胞诱导分化后不同时间上的表达差异,以期为进一步探究AdipoR1、AdipoR2基因的生物学功能与调控机理奠定基础。

夏洛莱牛和西门塔尔牛育肥及屠宰性能对比试验研究

[目的]试验旨在研究青海省引进夏洛莱牛的育肥效果、屠宰性状和肉质品质,评估夏洛莱牛在青海省推广及杂交利用的可行性,[方法]在青海锦绣农业发展有限公司开展了引进6月龄夏洛莱牛与本地自繁6月龄西门塔尔牛的育肥对比试验,最后对15月龄夏洛莱牛和本地西门塔尔牛进行屠宰性能测定,分析其屠宰性能、胴体和肉质品质的差异。[结果]结果表明,夏洛莱牛在青海西宁育肥后可达到屠宰率57.80%,净肉率46.40%,胴体产肉率80.30%,肉骨比4.23,各项指标均优于本地西门塔尔牛;夏洛莱牛肉中必需氨基酸含量及必需脂肪酸含量分别为7.96%和3.29%,与本地西门塔尔牛无显著差异。[结论]综上所述,夏洛莱牛具有良好的生长性能和屠宰性能,其肉质营养水平与本地西门塔尔牛接近,因此,夏洛莱牛适合在本地育肥并推广。

浅析信息时代中的电子信息技术的发展

随着世界经济一体化程度的不断加深,信息网络时代悄然来临,我们经常能够在网络上看到一些国家大事,也能够与国外的网友进行交流,真正做到"海内存知己天涯若比邻"。本文将主要通过介绍信息时代,从而从公共图书馆、虚拟现实技术、教育教学过程和在在职人员培养四方面提出具体策略,实现信息时代中的电子信息技术发展。

2018中国西部肉牛产业创新发展论坛在陕西杨凌举行

6月28—29日，在“第三届中国西部畜牧业博览会“隆重召开之际，由陕西省农业厅、杨凌示范区管委会、西北农林科技大学、国家肉牛改良中心、陕西省畜牧协会等单位联合主办，西北农林科技大学肉牛研究中心及牛业团队等具体承办的“2018中国西部肉牛产业创新发展论坛”在陕西杨凌成功举行，来自全国各地的行业主管领导、科教单位专家学者、企业技术人员等200多名代表参加。

大自然的语言

风儿轻轻吹， 树叶沙沙沙， 风婆婆说： “孩子，快点儿穿上衣服吧!”

美丽的太阳岛

我的家乡是哈尔滨，那里非常美丽，尤其是她的标志性景点——太阳岛。