凡纳滨对虾含酪氨酸酶结构域血蓝蛋白的免疫功能

【目的】克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)一种新的含酪氨酸酶结构域血蓝蛋白(Tyrosinase-domain containing hemocyanin,TDCH),研究其免疫功能。【方法】根据NCBI上公布的tdch基因序列设计克隆引物,通过RT-PCR方法获得tdch的编码区;采用生物信息学方法分析tdch的结构特征;使用荧光定量PCR技术分析tdch在凡纳滨对虾12个组织中的表达,以及在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、金黄色葡萄球菌(Staphhylococcu saureus)、黑曲霉菌(Aspergillus niger)、白斑综合征病毒、脂多糖及聚肌苷酸-聚胞苷酸[Poly(I:C)]刺激后在鳃和血细胞中的表达变化;利用RNAi技术敲降tdch在对虾中的表达,研究其在对虾抗副溶血弧菌免疫中的作用。【结果与结论】克隆获得tdch的编码区全长,编码551氨基酸的蛋白,理论分子质量为63.37 ku,等电点为7.74;tdch除含有血蓝蛋白结构域以外,还含有酪氨酸酶Tyrosinase结构域;tdch在对虾肌肉、肝胰腺、鳃、胃、表皮、触角、心脏、肠、幽门盲囊、眼柄和神经索中均有表达,眼柄中表达最高,在幽门盲囊中表达最低。Poly(I:C)刺激后,tdch在血细胞中的表达显著升高,在鳃组织中表达变化不明显;其余5种免疫原刺激后,tdch在鳃和血细胞中的表达均显著升高,沉默tdch的表达可导致副溶血弧菌感染对虾存活率显著下降,表明tdch参与了抗副溶血弧菌免疫应答。

关于当前形势下中职汽修专业校企合作的思考

1中职汽修专业校企合作的现状和存在的问题汽修专业教学具有高度的实践性、专业性特点,因此中职汽修专业实行校企合作已成为汽修专业教学发展的必然选择。校企合作注重在校学习与企业实践,注重学校与企业资源、信息共享,有效地提高了学校的教育教学水平,企业也降低了人才培养成本,学生的汽修实践技能得到了锻炼,有利于学生的发展,是一种“三赢”模式。许多职业院校的汽修专业已开展了多年的校企合作,并取得了较好的成绩。