水产胶原蛋白的提取纯化及理化特性的研究进展

胶原蛋白是一种重要的功能性蛋白质。水产动物源胶原蛋白因其丰富的来源和特殊的优点受到广泛关注,本文对国内外水产源胶原蛋白的提取、纯化方法以及理化性质的研究进展了综述,并对今后的研究方向做了展望,以期为水产胶原蛋白的进一步应用研究提供一定的理论基础。

桫椤化学成分研究

目的:研究桫椤Cyathea spinulosa Wall.的化学成分。方法:采用各种柱色谱进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果:从桫椤的乙醇提取物中共分离鉴定了8个化合物,分别为:豆甾-4-烯-3,6-二酮(1)、豆甾-3,6-二酮(2)、麦角甾醇(3)、原儿茶醛(4)、1-O-β-D-glucopyranosyl-(2S,3R,4E,8Z)-2-[(2-hydroxyoctade-canoyl)amido]-4,8-octadecadiene-1,3-diol(5)、(2S,3S,4R)-2-[(2'R)-2'-hydroxytetracosanoylamino]-1,3,4-octade-canetriol(6)、β-谷甾醇(7)、胡萝卜苷(8)。结论:其中,化合物1～6为首次从该植物中分离得到。

1-甲基海因的合成及其晶体结构分析

以甲胺、氯乙酸钠、氰酸钠等为原料,用"一锅法"合成1-甲基海因,合成总收率为62.9%.单晶经X射线衍射方法解析,其晶体属于单斜晶系,P21空间群,其中a=0.558 9(3)nm,b=1.217 6(6)nm,c=0.809 0(4)nm;β=105.330(7)°;V=0.531 0(5)nm3;Z=4,Dc=1.427 mg/m3,μ=0.116 mm-1,F(000)=240.

2-呋喃甲酰基甲基丙氨酸的合成

以廉价的2-乙酰基呋喃为原料,通过溴化、胺化和水解,合成了标题化合物,结构经核磁、质谱确证,讨论了目标化合物的合成方法。此法可用于其他2-呋喃甲酰基甲基氨基酸的合成。

核磁共振在确定链状化合物相对构型中的应用

随着核磁共振技术的发展,核磁共振光谱广泛用于有机化合物的结构分析和确定。本文综述了运用核磁共振技术确定链状化合物的相对构型的新方法,主要是借助于偶合常数、氢核磁共振技术和碳核磁共振技术进行复杂有机化合物的相对构型的确定,包括运用系统偶合常数大小来确定含1,2-二次甲基,1,3-二次甲基片段和γ-氨基-β-羟基-α-亚甲基羧酸衍生物的相对构型,运用氢化学位移变化确定1,3-二醇类、α-烷基-β-羟基片段的酮类化合物和具有1,3,n-多甲基取代碳链化合物的相对构型,以及运用碳化学位移确定1,3-二醇类化合物的相对构型。

基于修正引力模型的内蒙古11盟市城市群空间联系分析

利用主成分分析法对引力模型进行修正,选取内蒙古11盟市2017年地区生产总值指数、一般公共预算收支等25个指标测量城市质量,利用时间成本和货币成本作为经济距离测度城市引力。结果显示该地区存在严重的区域发展不协调,认为应:1)打破地理局限、降低运输成本;2)完善地域分工,实现多层次、高质量协同发展;3)建立政府协调机构,完善"现代经济体系",从而实现区域一体化发展。

连翘化学成分研究

目的:研究连翘Forsythia suspensa(Thunb.)Vahl的化学成分。方法:利用大孔吸附树脂、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶、半制备高效液相色谱等分离技术进行分离纯化,通过理化性质及波谱数据解析结构。结果:从连翘的乙醇提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为:(R)-2-(3,4-二羟基苯基)-2-乙氧基乙酸甲酯(1)、4-羟基苯乙酸(2)、酪醇(3)、松柏苷(4)、甲基松柏苷(5)、3,4′-dihydroxy-propiophenone-3-β-D-glucopyranoside(6)、β-hydroxypropiovanillone-3-O-β-D-glucopyranoside(7)、N-(1′-D-去氧木糖醇基)-6,7-二甲基-1,4-二氢-2,3-喹喔啉二酮(8)、forsythenside H(9)、萹蓄苷(10)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-半乳糖苷(11)、(-)-开环异落叶松脂素-4-O-β-D-葡萄糖苷(12)、rel-5-(3S,8S-dihydroxy-1R,5S-dimethyl-7-oxa-6-oxobicyclo[3,2,1]-oct-8-yl)-3-methyl-2Z,4E-pentadienoic acid(13)。结论:化合物1为新化合物,通过比较比旋光度的方法确定了其绝对构型。

短柱肖菝葜中的3个2,3-二酮喹喔啉类生物碱及其肝保护活性

从短柱肖菝葜(Heterosmilax yunnanensis Gagnep.)中分离得到3个2,3-二酮喹喔啉类生物碱,通过一维和二维核磁共振、高分辨质谱、紫外光谱和红外光谱确定其化学结构,分别鉴定为1-[5′-(3″-羟基-3″-甲基)戊二酸单酰基]核糖醇基-2,3-二酮-1,2,3,4-四氢-6,7-二甲基喹喔啉(1)、1-[2′-(3″-羟基-3″-甲基)戊二酸单酰基]核糖醇基-2,3-二酮-1,2,3,4-四氢-6,7-二甲基喹喔啉(2)和1-核糖醇基-2,3-二酮-1,2,3,4-四氢-6,7-二甲基喹喔啉(3)。其中化合物1和2是新化合物,化合物3是首次从短柱肖菝葜中分离得到,通过肝保护活性筛选,发现化合物3具有良好的肝保护活性。

鳖源胶原蛋白提取纯化及在生物材料中的应用

近年来,胶原蛋白因其良好的生物学性能在生物材料应用中得到越来越多的关注,为了建立一种快速高效的鳖源胶原蛋白纯化方法和探究其在生物材料中的应用价值,首先用Van Gieson染色法和苦味酸-天狼星红染色法观察裙边胶原纤维组织结构,发现裙边胶原纤维含量非常高且类型主要是Ⅰ型。采用不同截留分子量的透析袋对裙边胶原蛋白粗提液进行直接透析纯化,发现截留分子量为100 k Da的透析袋在透析48 h后对裙边胶原蛋白的纯化效果最好,SDS-PAGE检验显示几乎没有杂带。对裙边胶原蛋白生物学性能包括吸水性、体外降解性进行考察,其吸水力和持水力分别高达12.06 g/g和98.21%,且在72 h后被完全降解;对裙边胶原蛋白海绵的溶血性、皮肤致敏性、肝部创伤止血性、促创伤皮肤愈合性进行了研究,并和交联胶原进行比较,发现裙边胶原蛋白和交联胶原均不会造成SD大鼠溶血和皮肤过敏,二者均具有良好的止血效果,且裙边胶原蛋白能显著缩短创伤皮肤愈合时间,具有良好的促创伤皮肤愈合性,而交联胶原效果欠佳。本研究表明裙边胶原蛋白表现出了优良的生物学性能,在生物材料领域具有很大应用价值。

红花水提取物的化学成分研究

目的对红花水提取物中的化学成分进行研究。方法通过大孔吸附树脂、Sephadex LH-20、反相HPLC等多种色谱进行分离纯化，根据理化性质和波谱数据进行鉴定。结果从红花水提物中分离得到了12个化合物，分别为（2E，8E）-12R—tetradeeadiene-4，6-diyne-1，12，14-triol（1），（8Z）-decaene-4，6-diyn-1—0-B-D—glucopyranoside（2），（8E）-decaene-4，6-diyn-1-0胡-D—glucopyranoside（3），（2S）-4’，5，6，7-四羟基二氢黄酮6-01B—D-吡喃葡萄糖苷（4），对羟基苯甲酸（5），异香草酸（6），dihydropha—seicacidmethylester．3-D移-D—glucoside（7），dihydrophaseicacidmethylester（8），对羟基苯甲醛（9），N，N＇-dicoumaroyl-putrescine（10），4-（4＇-羟基苯基）-丁-3-烯-2-酮（11），对羟基苯乙酮（12）。结论化合物1，3～4，6，8，10为首次从红花中分离得到，并首次报道化合物1的绝对构型及碳谱数据。

野菊花的化学成分

目的：研究野菊花Chrysanthemum indicum的化学成分。方法：利用多种色谱方法进行分离,并用各种波谱学方法和色谱学方法进行鉴定。结果：共鉴定了13个化合物,刺槐素-7-O-β-D-葡萄糖苷（1）,木犀草素（2）,木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷（3）,蒙花苷（4）,刺槐素7-O-（6″-O-α-L-鼠李糖基）-β-槐糖苷（5）,绿原酸（6）,丁香树脂醇4″-O-β-D-葡萄糖苷（7）,5,7-二羟基色原酮（8）,尿嘧啶（9）,对羟基苯甲酸（10）,4-O-β-D-葡萄糖氧基苯甲酸（11）,boscialin（12）,blumenol A（13）。结论：化合物5,7,8,1113为首次从野菊花中分离得到。

小蓟的化学成分研究

目的:研究菊科蓟属植物刺儿菜Cirsium setosum地上部分(小蓟)的化学成分。方法:通过各种柱色谱进行分离纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果:分离并鉴定了9个化合物,分别为伪蒲公英甾醇(1),伪蒲公英甾醇醋酸酯(2),谷甾醇(3),反式对香豆酸二十六醇酯(4),芹菜素(5),异山萘甲黄素(6),胡萝卜苷(7),芦丁(8),蒙花苷(9)。结论:化合物2,4,6为首次从小蓟中分离得到。

茅苍术根茎中的2个新的多烯炔苷类化合物

目的对茅苍术Atractylodes lancea根茎的化学成分进行分离和鉴定,并评价所得化合物对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞BV2分泌NO的抑制作用。方法茅苍术根茎的80%乙醇提取物经萃取后,得正定醇亚部位;再依次经大孔吸附树脂柱、凝胶柱以及制备型高效液相色谱柱进行系统分离;采用HRESIMS、NMR、ECD等技术鉴定化合物的结构。结果从茅苍术根茎正丁醇亚部位中分离并鉴定了10个化合物,分别鉴定为(2E,8R)-癸烯-4,6-二炔-1,8-二醇-1-O-β-D-呋喃芹糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、(8S)-癸烷-4,6-二炔-1,8-二醇-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2)、(2E,8R)-癸烯-4,6-二炔-1,8-二醇-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、(2E,8S)-癸烯-4,6-二炔-1,8-二醇-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、(2E,8E)-2,8-癸二烯-4,6-二炔-1,10-二醇-1-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、(7R,8S)-3',9,9'-三羟基-3-甲氧基-1'-丙醇基-7,8-苯并二氢呋喃木脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、(7'R*,8S*,8'S*)-南烛木树脂酚9'-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(7)、(7S,8R)-4,9,9'-三羟基-3'-甲氧基-8-O-4'-新木脂素7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)、水杨酸甲酯2-O-α-L-吡喃木糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(9)、苯乙醇7-O-α-L-吡喃鼠李糖基-(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷(10)。结论化合物1和2为2个新的C10骨架类型的多烯炔苷,分别命名为苍术烯炔苷A和苍术烯炔苷B;化合物6、8~10为首次从从茅苍术中分离得到;在10μmol/L浓度下,化合物10对小胶质细胞分泌NO的抑制率最高,为31.18%;而1及2和4的混合物对小胶质细胞分泌NO的抑制率分别为22.01%和14.09%,仅具有较弱的体外抗炎活性。

复方三黄胶囊抑制肿瘤血管生成的活性部位筛选

目的:筛选出复方三黄胶囊抑制肿瘤血管生成的活性部位。方法:采用鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic mem-brane,CAM)法进行在体血管抑制实验。结果:①7 d时,将钴60照射过的超微粉碎的复方三黄胶囊粉用不同浓度的乙醇混悬,用20μm的移液枪加到直径5 mm大的紫外线照射的明胶海绵2 d后,明胶海棉周围出现明显的、似"轮辐状"的微细毛细血管,血管数量少于生理盐水对照组(P<0.05),紫杉醇阳性对照组与生理盐水空白对照组没有显著性差异。②将同样处理过的复方三黄胶囊粉用乙酸乙酯提取,再用pH梯度法萃取过的不同部位,做同样的鸡胚绒毛尿囊膜药理实验,明胶海绵周围走行的辐射微血管明显减少,与生理盐水对照组比较(P<0.05),苏拉明阳性对照组与生理盐水空白对照组有显著差异(P<0.01)。结论:对比2种不同的提取方式和选用2种不同阳性对照药,乙酸乙酯不同萃取部位的药理实验结果重复性好,实验操作难度小,苏拉明阳性对照组的结果比较稳定(P<0.05)。选择乙酸乙酯提取部位和苏拉明做阳性对照具有可操作性和可行性。

牛蒡子中一个新木脂素类化合物

本文对牛蒡子中的化学成分进行了研究。采用多种柱色谱方法并结合制备型HPLC的方法分离纯化牛蒡子中的化学成分,进一步利用IR、UV、CD、MS、HR-ESI-MS、1D和2D NMR等技术对分离得到的化合物进行结构分析和鉴定。从牛蒡子80%乙醇提取物中分离鉴定了10个化合物,分别为:(7R,8R)-4,7,9,9'-tetrahydroxy-3,3'-dimethoxy-8-4'-oxyneolign-7'-ene-9'-O-β-D-glucopyranoside(1)、(7R,8R)-4,7,9,9'-tetrahydroxy-3,3'-dimethoxy-8-O-4'-neolignan-9'-O-β-D-glucopyranoside(2)、(7R,8R)-4,7,9,9'-tertahydroxy-3,3'-dimethoxy-8-4'-oxyneolignan(3)、(7S,8R)-dihydrodehydrodiconiferylalcohol-4-O-β-D-glucopyranoside(4)、(7S,8R,7'R,8'R)-pinoresinol-4,4'-di-O-β-D-glucopyranoside(5)、(8S,7'S,8'R)-4,4',9'-trihydroxy-3,3'-dimethoxy-7',9-epoxylignan-7-oxo-4'-O-β-D-glucopyranoside(6)、1-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside-2-methoxy-4-hydroxyphenol(7)、1-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-O-β-Dglucopyranoside-3-methoxy-4-hydroxyphenol(8)、4-O-β-D-xylopyranosyl-(1→6)-O-β-D-glucopyranoside-4-hydroxy-3-methoxybenzylalcohol(9)和2-phenethylβ-primeveroside(10)。其中化合物1为一个新的8-O-4'型木脂素,化合物2~10均为首次从牛蒡子中分离得到。

大花红景天中化学成分的研究

目的对大花红景天中的化学成分进行研究。方法以体积分数80%乙醇对大花红景天进行提取,提取物经乙酸乙酯萃取后,采用各种柱色谱技术进行分离,利用NMR,MS等光谱学方法进行结构鉴定。结果从大花红景天中分离鉴定了11个化合物,分别为9,9'-丙叉基异落叶松脂醇(1),对羟基苯丙烯酸(2),对羟基苯丙烯酸4-O-β-D-葡萄糖苷(3),Tachioside(4),二氢松柏苷(5),2-苯乙基-1-O-β-D-葡萄糖苷(6),2-苯乙基-1-O-β-D-葡萄糖-(1→6)-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(7),2-苯乙基-1-O-β-D-葡萄糖-(1→6)-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(8),2-苯乙基-1-O-β-D-葡萄糖-(1→6)-β-D-木糖苷(9),1-苯甲基-1-O-β-D-葡萄糖苷(10),rhodiocyanoside D(11)。结论所有化合物均首次从该植物中分离得到,且化合物1,3,4,5,7,9为首次从该属植物中分离得到。

乌拉尔甘草中两个新的二氢黄酮苷类成分

为进一步研究乌拉尔甘草中的黄酮类化学成分,通过采用大孔吸附树脂、RP-C18、Sephadex LH-20、MCI柱色谱和HPLC等多种色谱分离方法从乌拉尔甘草80%乙醇提取物中分离得到2个黄酮类化合物。根据化合物的理化性质和光谱数据,鉴定其结构分别为:(2S)-甘草素-4'-O-β-D-葡萄糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷(1)、(2R)-甘草素-4'-O-β-D-葡萄糖-(1→6)-O-β-D-葡萄糖苷(2)。化合物1与化合物2均为新化合物,其母核结构为一对对映异构体。

中药新配方景丹胰敏剂治疗代谢综合征的方剂研究

以传统中医药学理论为基础,结合现代药物研究的体外分子作用靶点和体内动物实验,探索治疗代谢综合征的中药复方景丹胰敏剂(JD)的药材选择、复方的组成、配比及其有效剂量。应用高脂饲料诱导的胰岛素抵抗合并高胆固醇血症的IRF小鼠模型,以葡萄糖耐量(GTT)、胰岛素耐量(ITT)等指标评价机体对胰岛素的敏感性;以生化方法检测血糖和总胆固醇(TC)水平、以及分子靶点α-葡萄糖苷酶、蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)和谷氨酰胺:6-磷酸果糖酰胺基转移酶(GFAT)的活性。分别根据样品抑制PTP1B酶和α-葡萄糖苷酶活性、调节IRF小鼠血TC水平和抑制GFAT活性作用,选择西藏大花红景天的H13部位(h)、蛹虫草的Y12部位(y)和大黄的D部位(d)作为复方的组分;确定JD各组分治疗IRF小鼠代谢综合征具有协同作用;根据L8(27)正交试验设计和分别抑制分子靶点PTP1B和α-葡萄糖苷酶作用,确定JD各成分的最佳配比;根据JD对IRF小鼠的糖耐量低减和高胆固醇血症的治疗作用,确定JD的口服有效剂量。总之,配方JD由红景天、蛹虫草、大黄按比例20∶1∶1组成;其治疗代谢综合征的口服有效剂量为200 mg·kg-1;其主要作用机制是抑制分子靶点PTP1B和α-葡萄糖苷酶。其中,红景天补气清肺,化淤养心,为君药;蛹虫草味甘性温,补肺气,益肾精,化痰浊,强腰膝,与红景天配伍,增强补益肺肾之功,为臣药;大黄泻热解毒,逐瘀通经,与君臣药物相配,发挥其祛逐邪毒淤滞之功,为佐使药。此三药配伍,共凑补气、益精、清热、活血、化痰之功效,用以治疗代谢综合征。

仙鹤草中木脂素类化学成分的研究

目的对仙鹤草Agrimonia pilosa的化学成分进行分离和鉴定,并利用去血清损伤的PC12细胞模型筛选化合物的神经保护活性。方法利用80%乙醇对仙鹤草进行提取,再通过大孔吸附树脂、ODS、硅胶、Sephadex LH-20凝胶以及半制备型高效液相等柱色谱方法进行分离,然后根据质谱、核磁、圆二色谱等波谱学数据鉴定化合物的结构。结果从仙鹤草中分离并鉴定了10个木脂素类化合物,分别命名为仙鹤草酸酯(1)、仙鹤草苷A(2)、苦树苷C(3)、长花马先蒿苷B(4)、(7R,8S)-4,7,9,9′-四羟基-3,3′-二甲氧基-8-O-4′-新木脂素-7-O-β-D-葡萄糖苷(5)、(7S,8S)-3-甲氧基-8,4′-氧代新木脂素-3′,4,7,9,9′-五醇(6)、红叶藤苷(7)、(7S,8R)-1-[4-O-(β-D-吡喃葡糖糖基)-3-甲氧基苯基]-2-[4-(3-羟丙基)-2,6-二甲氧基苯氧基]-1,3-丙二醇(8)、密穗马先蒿苷(9)、淫羊藿醇A2(10)。结论化合物1和2为新化合物,其余化合物均为首次从仙鹤草中分离得到。化合物1a和1b为1对互变的葡萄糖端基手性相反的8-O-4′型木脂素酸酯;化合物1在10μmol/L对去血清损伤的PC12神经细胞表现出一定的保护作用。