确定性侧向位移芯片在儿童横纹肌肉瘤循环肿瘤细胞检测方法的可靠性研究

目的采用一种高效的循环肿瘤细胞(CTCs)捕获鉴定方式扩展CTCs的液体活检的临床应用。探究CTCs与横纹肌肉瘤(RMS)患儿临床特征的关系。方法将横纹肌肉瘤TE761细胞系混悬到外周血中,使用确定性侧向位移芯片(DLD-ΔChip),依据细胞尺寸快速无损分离富集肿瘤细胞,之后采用免疫荧光标记(DAPI+/CD45-/MyoD1+),在显微镜下鉴定TE761系细胞。检测该项技术对于肿瘤细胞的分离富集效率,以及检测RMS患儿外周血中CTCs数目并发掘与患者临床状况的相关性。结果DLD-ΔChip对于TE761系细胞的捕获率为94.0%,白细胞去除率为99.99%,红细胞去除率为100%。经DLD-ΔChip分离后的TE761系细胞活性为94.0%,与分离前的细胞增殖无统计学差异(t=2.21,P>0.05)。使用DLD-ΔChip测量RMS患儿外周血CTCs,RMS中危组和高危组外周血中的CTCs存在相关关系(U=289.00,P<0.05)。结论DLD-ΔChip分离富集CTCs效率高,分离后的CTCs活性高。RMS患儿中的CTCs在患者临床危险度分级、判断预后方面有良好的应用前景。