深圳居民转基因食品卫生安全认知状况调查

目的了解和分析深圳市居民对转基因食品及其卫生安全知识的认知和需求状况,为开展相关知识的宣传教育提供依据。方法设计自编问卷,抽取全市范围内1475个家庭电话号码电话进行访问调查。结果完成访问的电话号码322个。市民对转基因食品的知晓率和接受率分别为36.3%和16.67%,仅2.68%的受访者对转基因食品比较了解,50.36%的受访者认为转基因食品与自己的生活没有关系;知晓率随文化程度的升高而上升,了解程度随年龄增高而降低;接受率则与年龄和知晓率有关,16~24岁年龄段及听说过转基因食品的受访者接受率高;66.29%受访者希望了解转基因食品卫生安全知识,最希望了解的信息是转基因食品安全性（50.93%）。结论政府有关部门需要大力加强转基因食品卫生安全知识宣传,保障市民的知情权、选择权和健康权。

硒对铅毒性拮抗作用的研究进展

铅是环境中重要的重金属污染物,对人体的各个系统均能产生毒性和损伤。硒是人体必需的微量元素之一,大量研究表明,硒与铅存在着相互拮抗作用。硒和铅在动物或人体内的含量呈负相关,硒不仅能够拮抗铅的吸收和蓄积,促进铅的排泄,还能拮抗铅导致的机体各组织和细胞的氧化应激和免疫损伤、神经系统毒性、听力损伤、遗传和生殖毒性、肝肾毒性、DNA损伤等毒性作用。本文从上述几方面综述了近年来硒对铅毒性拮抗作用的研究进展。硒在人体内发挥生理作用主要通过硒蛋白实现,本文还阐述了硒拮抗铅毒性的作用与硒蛋白的关系方面的研究进展。尽管如此,硒拮抗铅毒性作用的研究机制仍然不明确。此外,硒对人体的营养必需剂量和毒性剂量之间的范围非常窄,因此,研究硒对人体健康的保护作用的剂量效应关系是实施科学补硒的前提和基础。

核磁共振氢谱在β-环糊精及其包合物研究中的应用

核磁共振谱(NMR)是解析物质结构最有效的手段,近年该技术的发展也很迅速。本文综述了一维核磁共振氢谱(1HNMR),二维核磁共振氢谱(2D-1HNMR)包括COSY(Correlation Spectroscopy)、TOCSY(Total Correlation Spectroscopy)、NOESY(Nuclear Overhauser Effect Spectroscopy)、ROESY(Rotating Frame Over hauser Effect Spectroscopy)在β-环糊精及其包合物研究中的应用。

2012～2015年深圳市售转基因大豆及其产品的监测结果分析

目的了解2012-2015年深圳市售转基因大豆及其制品的市场占有率、标识情况及发展态势。方法在深圳各大连锁超市随机抽取大豆及其制品,采用试剂盒法提取样品DNA,采用实时荧光PCR的方法扩增大豆内源基因Lectin,并扩增外源基因Ca MV35S启动子和NOS终止子对样品进行定性筛查,分析不同类别、不同年份样品的阳性率差异及变化趋势。结果 4年监测大豆及豆制品共283份,检出阳性样品19份,总体阳性率为6.71%;大豆样品的转基因阳性率为0;不同年份的豆制品转基因阳性率之间存在显著性差异且有逐年上升的趋势;所有检出的阳性样品均未按照规定标识。结论目前深圳市场转基因大豆及其制品（大豆油除外）的市场占有率还很低,但豆制品转基因阳性率有逐年上升的趋势。政府应该加强转基因产品的标识管理,并加强转基因农产品的监管。

孕哺期补硒对仔鼠海马硒蛋白mRNA表达的影响

目的探讨孕期和哺乳期补硒对仔鼠海马硒蛋白mRNA表达的影响。方法从孕1 d开始给予母鼠含亚硒酸钠的饮水补硒,低、中、高3个剂量组饮水中亚硒酸钠的浓度分别为400、1600、6400μg/L,自由饮用。补硒持续至仔鼠出生后21 d。采用RT-PCR测定仔鼠海马中25种硒蛋白mRNA的表达。结果仔鼠海马中25种硒蛋白mRNA均有不同程度的表达,其中SelW、SelP、GPX4、SelK15、SelK、SelM、SelT和GPX1的表达量明显优于其他硒蛋白,Dio1表达量最低;母鼠孕哺期补硒后,有15个硒蛋白基因表达量发生了不同程度的变化,高剂量组改变尤为显著;Sel15、SPS2、SelW和Txnrd2的表达相对稳定,不受饮食补硒的影响。结论孕哺期补硒能够对仔鼠海马硒蛋白的mRNA表达产生影响,进而影响仔鼠神经发育。

基于拉曼光谱-聚类分析快速鉴别掺伪油茶籽油

在532 nm激光光源的扩展拉曼光谱及一阶导数光谱中,油茶籽油与低价植物油及精炼地沟油光谱形态的差异显著,谱峰得到有效分离。基于全波段光谱信息和形态建立的多步聚类分析模型既可准确鉴定油茶籽油,还可准确鉴定各种类型的掺伪油茶籽油。对26份不同油茶籽油、105份不同低价植物油、75份5%及以上的掺杂油茶籽油和38份不同精炼地沟油的判别正确率均为100%,对5%及以上的180份掺假油茶籽油和72份掺杂植物油的判别正确率达92%以上。样品测量时无需制备样品及消耗化学试剂,测量和分析1份样品仅耗时5 min左右,可实现对掺伪油茶籽油的快速、无损和准确鉴别。

基于拉曼光谱技术的地沟油筛查方法研究

以10个品种的138个食用植物成品油、38个精炼地沟油和80个由食用植物成品油和精炼地沟油勾兑的油为样品,采用532 nm激光光源,分别在2个波数范围内扫描样品的拉曼谱图,通过谱图形态比对及谱图数据分析筛查鉴别地沟油与食用植物成品油。结果表明:138个食用植物成品油和38个精炼地沟油的判定准确率均达到100%;5%、10%、20%地沟油勾兑样品的判定准确率分别为40%,63%及85%,且判定结果之间逻辑性完整。该方法不但具有检测成本低、检测时间短、样品用量小等优点,而且可以有效控制假阳性率,较适于作为地沟油筛查方法,与其他确认方法联合使用可有效鉴别地沟油。

快速鉴别掺伪橄榄油的拉曼光谱-聚类分析方法

以不同产地、不同品牌的多批次橄榄油、大豆油、玉米油、菜籽油、葵花籽油、棕榈油、棉籽油及精炼地沟油为样品,探索建立快速鉴别掺伪橄榄油的拉曼光谱-聚类分析方法。在780、532 nm激光光源普通光栅、532 nm激光光源扩展光栅条件下,研究了橄榄油、低价食用植物油与精炼地沟油的拉曼光谱形态;并采用聚类分析法鉴别掺伪橄榄油。结果表明:在532 nm激光光源下,橄榄油与低价食用植物油及精炼地沟油扩展及其一阶导数拉曼光谱的信息量极为丰富,而且各类样品间的光谱形态差异显著。基于全波段光谱信息和形态建立的聚类分析模型既可准确鉴定橄榄油,还可准确鉴定各种类型的掺伪橄榄油。对30份不同橄榄油、105份不同低价食用植物油和38份不同精炼地沟油的判别正确率均为100%,对180份5%及以上的掺假橄榄油的判别正确率达94%以上,对75份5%及以上的掺杂橄榄油的判别正确率为100%,对72份5%及以上的掺杂植物油的判别正确率达88%以上。样品测量时无需制备样品及消耗化学试剂,测量和分析1份样品仅耗时5min左右,可实现对掺伪橄榄油的快速、无损和准确鉴别。

拉曼光谱-聚类分析法快速鉴别掺伪花生油

目的建立快速鉴别掺伪花生油的拉曼光谱.聚类分析方法。方法以不同产地、不同品牌的多批次花生油、大豆油、玉米油、菜籽油、葵花籽油、精炼棕榈油、精炼棉籽油及精炼地沟油为样品,在780 nm和532 nm激光光源下,扫描和比较其普通、扩展及导数拉曼光谱的形态。结果在532 nm激光光源的扩展光谱及一阶导数光谱中,花生油与低价植物油及精炼地沟油光谱的信息量最大,样品间光谱形态的差异显著,谱峰得到有效分离。基于此全波段光谱信息和形态建立的多步聚类分析模型及鉴别程序对36份不同花生油、105份不同低价植物油、30份仿冒花生油和38份不同精炼地沟油的判别正确率均为100%,对180份5%及以上的掺假花生油的判别正确率达86%以上,对75份5%及以上的掺杂花生油的判别正确率为92%,对72份5%及以上的掺杂植物油的判别正确率达92%以上。样品测量时无需制备样品及消耗化学试剂,测量和分析一份样品仅耗时5 min左右。结论所建立的拉曼光谱.聚类分析模型既可准确鉴定花生油,还可准确鉴定各种类型的掺伪花生油,可实现对掺伪花生油的快速、无损和准确鉴别。

多重荧光PCR鉴别羊肉掺假

目的建立可同时检测掺入羊肉中的猪、马、牛、鸭成分的多重荧光PCR检测体系。方法配制掺入猪、马、牛、鸭源性成分的模拟羊肉掺假样品,掺假比例17%~45%。筛选特异性强、敏感度高的猪、马、牛、鸭物种特异性基因,优化反应体系,建立了针对猪、牛、马、鸭两两配对的两重荧光PCR检测体系和其中3个任意组合的三重荧光PCR检测体系。结果模拟羊肉掺假样品两重荧光PCR检测结果显示,包括单个成分掺入比例低至7%的样品,其检测准确率为100%。而三重荧光PCR检测同时检测猪、牛、马、鸭四种肉品中的3种,其中猪肉、牛肉和马肉的掺假比例均为8%~15%;鸭牛肉掺假比例为5%~10%。三重荧光PCR检测结果显示,所有掺假样品中的各种掺假组分都被准确检出。结论本研究建立的多重荧光PCR检测体系能准确检出配制的模拟掺假羊肉制品中的猪、马、牛、鸭成分,可进一步研究以应用于市场肉制品及加工肉制品掺假的检测。

深圳市场4种国产农产品转基因成分监测结果

目的:为了解并掌握目前深圳市居民食品中转基因成分的实际情况,避免“家底不清”,更有效地对本市的食品安全进行系统监测和预警,为政府制定食品卫生政策提供科学依据和切实保障居民的健康安全利益。方法:按照深圳市食品污染物监测项目方案,首次对本市市场上的4种国产农产品中转基因成分进行监测,采用PCR凝胶电泳法对79份玉米、马铃薯、大豆、西红柿进行检测并用实时荧光PCR方法进行验证。结果:在79份抽检样品中,共检出含有转基因成分的样品4份,总检出率为5.1%。结论:我市食品中转基因成分存在的情况不容忽视,转基因食品未作任何标识的问题普遍存在,值得管理部门高度重视。应加强对流通市场上食品中转基因成分的监测和转基因食品标识的管理。

拉曼光谱-聚类分析快速鉴别掺伪芝麻油

目的建立快速鉴别掺伪芝麻油的拉曼光谱-聚类分析方法。方法以不同产地、不同品牌的多批次芝麻油、大豆油、玉米油、菜籽油、精炼棕榈油、精炼棉籽油及精炼地沟油为样品,在780 nm和532 nm激光光源下,扫描和比较其普通、扩展及导数拉曼光谱的形态。结果在532 nm激光光源的扩展光谱及一阶导数光谱中,芝麻油与低价植物油及精炼地沟油光谱的信息量最大,样品间光谱形态的差异显著。基于此全波段光谱信息和形态建立的多步聚类分析模型对芝麻油、低价植物油、仿冒芝麻油和精炼地沟油的判别正确率均为100%;对5%、10%、20%、30%和50%掺假芝麻油的判别正确率分别为72%、92%、100%、100%和100%;对5%、10%和20%掺杂芝麻油的判别正确率分别为97%、100%和100%;对5%、10%和20%掺杂植物油的判别正确率分别为94%、100%和100%。样品测量时无需制备样品及消耗化学试剂,测量和分析一份样品仅耗时5 min左右。结论所建立的拉曼光谱-聚类分析模型既可准确鉴定芝麻油,还可准确鉴定各种类型的掺伪芝麻油,可实现对掺伪芝麻油的快速、无损和准确鉴别。

抗环斑病毒转基因番木瓜55-1的PCR检测

目的建立对抗环斑病毒转基因番木瓜55-1进行品系鉴定的检测方法。方法采用改良十六烷基-三甲基-溴化铵(CTAB)法及试剂盒方法进行番木瓜基因组DNA提取,根据番木瓜管家Papain基因和抗环斑病毒转基因番木瓜55-1品系的外源结构基因(35S-GUS)和调控基因(NOS-35S)序列设计合成特异性检测引物,采用PCR技术对抗环斑病毒转基因番木瓜55-1进行品系鉴定。结果内源Papain基因PCR扩增结果表明,改良CTAB法及试剂盒方法都可用于番木瓜种籽及果肉的DNA提取。实验中合成的引物及建立的PCR反应体系、反应参数能特异性地扩增转基因番木瓜55-1的外源基因35S-GUS序列和NOS-35S序列。该方法的绝对检测低限为8.15×10-2ng,相对检测低限为0.14%。结论本检测方法有较高的稳定性,能有效地对转基因番木瓜55-1进行品系鉴定,该方法的检测灵敏度可完全满足转基因食品标识管理定性检测的需要。

转基因成分实时荧光PCR定量分析数学方程的理论研究

目的:根据TaqMan荧光探针实时荧光PCR的技术原理,建立实时荧光PCR循环次数与荧光强度间的动力学方程、样品中转基因成分含量与X0及CT的定量关系和定量分析数学方程。方法:采用数学推导和理论测算的方法,研究数学方程中各参数的意义、影响因素、变化特点和规律。结果:转基因成分含量的定义、定量分析模式、样品DNA提取效率、PCR扩增效率、反应管中初始模板数、荧光分子形成效率、荧光测量阈值、PCR测量的系统和偶然误差,是导致定量关系发生偏离及测定灵敏度发生变化的重要原因。结论:数学方程中各项参数可用于评估定量关系的偏离程度及变化趋势,还可作为选择、优化定量分析条件和校正、降低定量方法系统误差的技术指标。

转基因番木瓜55-1的多重PCR鉴定方法研究

目的:建立对转基因番木瓜55-1进行品系鉴定的多重PCR检测方法。方法:根据番木瓜管家Papain基因和转基因番木瓜55-1品系的外源结构基因(35S-GUS)和调控基因(NOS)序列设计合成特异性检测引物。采用多重PCR技术对转基因番木瓜55-1进行品系鉴定。结果:本研究建立的多重PCR反应体系、反应参数能特异性地同时扩增转基因番木瓜55-1的管家基因Papain、外源结构基因35S-GUS和调控基因NOS序列。其中针对管家基因和外源结构基因的双重PCR检测方法的绝对检测低限为0.14 ng,其相对检测低限为0.14%;三重PCR检测方法的绝对检测低限为1.56 ng,其相对检测低限为1.56%。结论:本检测方法有较高稳定性,能快速准确地对转基因番木瓜55-1进行品系鉴定,该方法的检测灵敏度可基本上满足转基因食品标识管理定性检测的需要。

利用TaqMan定量PCR技术不依赖参比内源基因测定转基因植物外源基因拷贝数

目的:建立一种利用TaqMan荧光PCR定量技术不依赖参比内源基因测定转基因植物外源基因拷贝数的分析方法。方法:以转基因大豆RRS和转基因玉米Bt176为材料,通过转基因植物外源基因与品系特异序列拷贝数的比较测定外源基因整合拷贝数。结果:3次测得的Bt176玉米中Cry1A(b)基因的整合拷贝数分别为2.69,3.43和2.83,平均为2.98,标准偏差(SD)为0.40,相对标准偏差(RSD)为13.28%,即Cry1A(b)基因在Bt176玉米中的整合拷贝数为3;3次测得的RRS大豆中EPSPS基因拷贝数分别为1.08,1.01,0.96,平均为1.01,SD为0.06,RSD为6.06%,即RRS大豆中EPSPS基因拷贝数的测定结果是单拷贝。结论:本研究建立的转基因植物外源基因拷贝数测定方法可准确测定转基因植物外源基因的拷贝数。与现有的通过外源基因与参比内源基因拷贝数比较测定转基因植物外源基因拷贝数的方法相比,不但避免了选择物种特异性的看家基因及测定看家基因拷贝数等大量工作,而且应用范围更广泛。

转基因成分定量检测数据分析及不确定度评估现状概述

在利用实时荧光定量(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测转基因成分的含量时,数据分析的规范化与标准化对保证实验数据的准确性及实验室间数据的可比性具有重要意义。基于目前很多国家和地区对转基因产品有强制性标识要求的现状,测量不确定度在进出口食品的转基因检验中作用显著。本文在分析q RT-PCR实验至少应提供的信息(the minimum information for publication of quantitative Real-time PCR experiments(MIQE))数据分析的基础上,综合阐述了q RT-PCR转基因成分定量数据分析中众多因素对定量准确性的影响,以及q RT-PCR转基因成分定量不确定度来源主要要素及其相应的评估策略。尽管MIQE为q RT-PCR实验设计及数据处理提供了参考,但目前仍然有许多实验设计甚至已经发表的论文并未完全遵照相关要求,从而导致实验结果偏差甚至错误,其数据处理的某些环节尚缺乏一致性的要求。由于对一些影响因子缺少定量描述,在转基因成分定量检测的不确定度分析方面还缺乏一个通行的方法。

转基因作物非预期效应与自然变异的比较和鉴别

筛查转基因作物非预期效应遇到的最大难题是难以鉴别其非预期效应和自然变异。从转基因作物非预期效应与自然变异的发生机制、食用安全风险和遗传特性的比较分析阐述两者在发生机制及遗传特性方面的差异和特征,为设计减少自然变异干扰的非预期效应筛查模式和方案提供重要启示。

环糊精在模拟酶研究中的应用

环糊精特殊的结构和性质使其成为理想的模拟酶模型。本文概述了修饰环糊精、环糊精聚合物以及环糊精金属配合物在模拟酶研究中的应用。