腹膜透析液对腹腔巨噬细胞产生一氧化氮和细胞活力的影响

目的 :探讨商业性腹膜透析液 (CDS)对巨噬细胞功能的影响。方法 :培养的小鼠腹腔巨噬细胞 (Mφ)分为两大实验组及各自的对照组 :1将 Mφ置于含 5 0 % CDS(含糖 0 .139mol/ L)的条件培养液中培养 2 4 h;2 Mφ分别暴露于含 0 .139mol/ L糖浓度 CDS中 10、30和 6 0 min,然后在无 CDS培养液中培养 2 4 h。观察 Mφ的一氧化氮(NO)产量和 MTT还原能力。对照组以等量培养液代替 CDS。结果 :实验组与对照组比较 ,Mφ的 NO产量和 MTT还原能力均受明显抑制 ;CDS暴露 6 0 min组比暴露 10、30 min组所受抑制作用强。结论 :腹膜透析液可损害巨噬细胞活力和降低其 NO产量 。

大肠癌患者肿瘤相关血管中胰岛素受体表达及其与肿瘤组织病理学特征的关系

目的:研究肿瘤相关血管中胰岛素受体(IR)在伴或不伴代谢综合征(MS)大肠癌患者中的表达及其与大肠癌病理特征之间的关系。方法:采用组织芯片结合免疫组织化学技术检测220例根治性切除大肠癌患者肿瘤相关血管中IR表达,分析在伴和不伴MS两类患者肿瘤相关血管中IR表达与大肠癌病理学特征(病理学亚型、组织学分级、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期)之间的关系。结果:IR在正常大肠组织血管内皮细胞中呈阴性表达,而在大肠癌组织及其与正常交界区血管内皮细胞中呈阳性表达。伴MS患者肿瘤相关血管中IR高表达检出率低于不伴MS的患者(分别为21.6%和41.0%,P<0.05)。肿瘤相关血管中IR高表达与肿瘤深部浸润、淋巴结转移、高TNM分期相关(P<0.05或P<0.01),肿瘤相关血管中IR高表达可增加肿瘤深部浸润风险(OR=2.21,95%CI:1.10~4.44,P<0.05)、淋巴结转移风险(OR=2.21,95%CI:1.26~3.86,P<0.01)和高TNM分期风险(OR=2.08,95%CI:1.19~3.63,P<0.05)。上述相关性可存在于不伴MS患者中,在伴MS的患者中未体现。结论:血管内皮细胞IR高表达与肿瘤浸润、转移等侵袭性特征相关,可作为大肠癌患者,特别是不伴MS大肠癌患者预后判断的潜在指标。

两种不同淋巴转移能力小鼠肝癌细胞亚系的建立和生物学特性

通过单细胞分离(克隆)培养和局部淋巴结转移灶筛选的方法,建立两种不同淋巴转移能力HepA肝癌细胞亚系,分别命名为HepA-H和HepA-L,并比较其生长、游走和贴壁能力等生物学特性。瘤细胞接种于小鼠足垫后,同侧腘窝淋巴结转移率,HepA-H为83.3%,HepA-L为16.7%,两者具有显著差异(p<0.01)。两种细胞亚系均未见肺、肝、脾、肾等脏器转移灶。体外实验显示,HepA-H的生长、游走和贴壁能力均强于HepA-L。HepA肝癌不同淋巴转移能力亚系的建立,为研究肿瘤经淋巴管转移机理提供了良好的肿瘤淋巴转移动物模型。

HepA-H和HepA-L肝癌荷瘤小鼠CD8^+/CD28^+T细胞和肿瘤新生淋巴管的研究

目的研究不同淋巴转移潜能肝癌(H epA-H和H epA-L)荷瘤小鼠体内CD 8+/CD 28+T淋巴细胞和肿瘤新生淋巴管,探讨与肿瘤淋巴转移的关系。方法用两种来源相同,而淋巴转移能力不同的小鼠肝癌细胞亚系,H epA-H(高淋巴转移)和H epA-L(低淋巴转移),小鼠皮下接种,制备荷瘤动物模型。采用抗小鼠CD 8、CD 28荧光标记单克隆抗体,流式细胞术定量检测小鼠外周血和肿瘤组织内CD 8+/CD 28+T淋巴细胞数量;应用5’-核苷酸酶-碱性磷酸酶双重组化染色法,观察肿瘤新生淋巴管。结果肿瘤皮下接种后14天,H epA-H组荷瘤小鼠外周血CD 8+/CD 28+T淋巴细胞数量明显低于正常对照组(P<0.05);H epA-H组肿瘤组织内CD 8+/CD 28+T淋巴细胞数量显著低于H epA-L组(P<0.05)。两种肿瘤细胞亚系均可诱导肿瘤新生淋巴管,但H epA-H肿瘤内和瘤周最高淋巴管密度均明显高于H epA-L组(P<0.01)。结论肿瘤淋巴转移能力的差异与体内CD 8+/CD 28+T淋巴细胞数量及肿瘤新生淋巴管有关。

一氧化氮与肿瘤的免疫抑制作用（综述）

一氧化氮与肿瘤的免疫抑制作用（综述）浙江医科大学病理教研室杨泽然，陈增良一氧化氮（ＮＯ）作为一种新发现的生物信使，在神经信息的传递、血管调节及免疫功能的调节等方面具有重要的生理功能。近来，ＮＯ与肿瘤所致的免疫抑制之间的关系已引起人们的关注，现综述如下...

腹膜透析液对鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的 探讨含不同浓度葡萄糖的腹膜透析液不同时间作用后对巨噬细胞 (Mφ)功能的影响。方法取经3%硫乙醇酸盐培养基腹腔注射诱生的小鼠腹腔Mφ 在体外培养条件下 ,用含不同浓度 (1.50%、2.50%和4.25% )葡萄糖的腹膜透析液分别作用10、30和60min后 ,检测Mφ 吞噬功能、一氧化氮 (NO)产量和对四甲基偶氮唑盐 (MTT)还原能力。结果 观察组Mφ 吞噬功能、NO产量和MTT还原能力均明显低于对照组 (均P<0.01) ,且葡萄糖浓度越高、作用时间越长 ,各项指标下降越明显。结论 短时间腹膜透析液作用即可损害巨噬细胞活力及其他功能 。

腹膜透析对腹腔巨噬细胞产生NO及腹膜形态结构变化的实验研究

应用模拟连续不卧床腹膜透析（ Ｃ Ａ Ｐ Ｄ）小鼠以研究两种腹膜透析液 Ｂｉｅｆｆｅ 和 Ｂｒａｕｎ 对腹腔巨噬细胞（ Ｍ）产生一氧化氮（ Ｎ Ｏ）的影响及腹膜形态学改变⒚结果 Ｂｉｅｆｆｅ 组 Ｎ Ｏ 产量明显高于对照组； Ｂｒａｕｎ 组 Ｎ Ｏ 产量在给药 １０ ｄ 至停药 １０ ｄ 也明显高于对照组；两给药组均伴不同程度腹膜间皮细胞脱落、腹膜增厚等改变，表明两种腹膜透析液连续给药可提高腹腔巨噬细胞的 Ｎ Ｏ 产量，这可能与长期 Ｃ Ａ Ｐ Ｄ

热休克肿瘤对小鼠腹腔巨噬细胞一氧化氮产生的影响

一氧化氮（ＮＯ）是一种具有多种生理功能的信息分子，既是巨噬细胞（Ｍφ）发挥细胞毒作用的效应分子，又参与对淋巴细胞免疫功能的调节。有关肿瘤对Ｍφ产生ＮＯ的影响，已有一些报道［１～３］，但热休克肿瘤对Ｍφ产生ＮＯ的影响则未见报道。现有资料表明：细胞处于应...

两种肿瘤细胞株对小鼠腹腔巨噬细胞产生一氧化氮的影响

目的：研究体外两种肿瘤细胞株对巨噬细胞（M）产生一氧化氮（NO）的影响。方法：在培养的各组小鼠腹腔巨噬细胞中．分别加入10％、25％和50％浓度的培养18h的HepA腹水型肝癌，及EAC瘤细胞培养混悬液或其条件培养液（即上清液）．24h后观察M上清液中NO的产生量；同时对50％浓度瘤细胞条件培养液作用24h后的M中的一氧化氮合成酶（NOS）进行组化染色。结果：HepA瘤细胞培养混悬液及其条件培养液均能明显地促进M产生NO（P＜0．01）。EAC瘤细胞条件培养液在10％和25％浓度时，对M产生NO无明显影响（P＞0．05），但在50％浓度时却表现明显的抑制作用（P＜0．05）。EAC瘤细胞培养混悬液在10％和25％浓度时明显促进M产生NO（P＜0．01）；而在50％浓度时，其促进作用不明显．且与其10％和25％浓度组比较，有显著性差异（P＜0．01）。NOS染色结果表明，经50％EAC条件培养液作用的M．其NOS阳性表达弱于对照组；而经50％HePA条件培养液作用之M，其NOS阳性表达强于对照组。结论：不同肿瘤对巨噬细胞产生NO具有不同影响，并与瘤细胞或其分泌因子的浓度有关。

当归、丹参和川芎嗪注射液对腹膜透析腹腔巨噬细胞功能的干预作用

目的 :研究当归、丹参和川芎嗪注射液 (简称中药 )对腹膜透析 (PD)腹腔巨噬细胞 (MC)功能的影响。方法 :(1)将MC置于含当归、丹参和川芎嗪的腹膜透析液 (CDS)的培养液中培养 2 4h ,测定 3个中药组、CDS组和对照组MC的一氧化氮 (NO)含量和对四甲基偶氮唑盐 (MTT)还原能力。 (2 )MC分别置于含 2、10、10 0 μg/ml的 3个中药的CDS中培养 2 4h ,观察不同浓度中药对MC吞噬能力、NO含量和MTT还原能力的影响 ,对照组为等量培养液代替CDS。结果 :CDS组MC的NO含量和MTT还原能力均明显低于对照组 (P <0 0 1) ;与CDS组比较 ,川芎嗪组的MCNO含量和 3个中药组MCMTT还原能力均有明显提高 (P <0 0 1) ,并随着培养液中的中药浓度的提高 ,3个中药组MC吞噬能力和NO含量均有显著增加。结论 :在CDS中加中药能改善腹膜腔MC的防御功能 ,降低腹膜炎的发生率 ,对提高PD疗效有重要意义。

腹膜透析对腹腔巨噬细胞产生一氧化氮的影响

目的 :研究腹膜透析 (PD)对巨噬细胞产生一氧化氮 (nitricoxide,NO)和腹膜淋巴孔的影响 ,探讨PD失超滤机制。 方法 :①应用Baxter腹透液建立PD小鼠模型 ;②用全自动酶标仪动态测定NO量 ;③用扫描电镜观察不同时间点腹膜间皮超微病理变化 ;④使用计算机与扫描电镜联机的图像处理系统 ,测定不同PD时间点腹膜淋巴孔的改变。 结果 :随着PD进行 ,大量巨噬细胞经腹膜淋巴孔游出 ,进入腹腔形成乳斑。NO浓度逐渐增高 ,间皮细胞损伤趋严重 ,腹膜淋巴孔孔径增大、分布密度增高。停止PD ,乳斑减少 ,NO量逐渐降低 ,损伤的间皮细胞开始修复 ,腹膜淋巴孔渐趋正常。至停止PD 40天 ,间皮细胞基本修复 ,腹膜淋巴孔恢复正常。 结论 :PD使大量巨噬细胞进入腹腔 ,巨噬细胞产生的高浓度NO可损害间皮细胞、舒张腹膜淋巴孔 ,可能与腹透液吸收增加 ,PD失超滤有关。

胃癌组织中NK细胞和树突状细胞浸润的数量及意义

目的探讨自然杀伤细胞(NKC)及树突状细胞(DC)在胃癌中浸润的数量及意义。方法采用免疫组化(EnVision二步法)对51例外科手术切除胃癌组织进行肿瘤组织内NKC及DC的检测。结果在淋巴结转移阳性、5年内死亡、TNM分期期以上的胃癌组织中NKC及DC数量明显减少(P<0.05)。在浸润深度肌层以下的胃癌组织中DC数量明显减少(P<0.01)。NKC和DC均为低密度组较NKC和DC均为高密度组或NKC和DC其中之一为高密度组其淋巴结转移数量多、TNM分期高及5年生存率低(P<0.05),且NKC及DC浸润数量越多,5年生存率越高。结论胃癌组织中NKC及DC的数量与其淋巴结转移、5年生存率及TNM分期相关,NKC与DC联合检测对评估胃癌的临床预后有较大的意义。

NO对小鼠腹膜淋巴孔的调控作用与腹膜透析失超滤机理研究

目的 :研究一氧化氮 (NO)对腹膜淋巴孔的调控作用 ,探讨腹膜透析 (PD)失超滤机理。方法 :①应用Baxter腹透液建立腹膜透析小鼠模型 ;②小鼠腹腔注射NO供体硝普钠 (SNP)和NOS的抑制剂NG-单甲基 -L -精氨酸 (L -NMMA) ;③全自动酶标仪测定血清NO-2 量 ;④腹膜淋巴孔的扫描电镜观察和计算机图像处理。结果 :①随着腹膜透析进行 ,大量巨噬细胞经腹膜淋巴孔游出 ,进入腹膜腔形成乳斑 ;血清NO-2 量逐渐增高 ,腹膜淋巴孔孔径增大、分布密度增高。停止腹膜透析、乳斑减少 ,NO-2 量逐渐降低 ,腹膜淋巴孔渐趋正常。②随SNP剂量增加 ,小鼠血中NO-2 浓度显著提高 ,淋巴孔的直径和密度明显增加。③随着L -NMMA剂量增加 ,小鼠血中NO-2 浓度明显降低 ,腹膜淋巴孔开放数量减少 ,淋巴孔密度降低 ,淋巴孔孔径变小。结论 :NO有调控腹膜淋巴孔的作用 ;长期腹膜透析使血清NO-2 浓度逐渐增高 ,高浓度NO-2 可舒张腹膜淋巴孔 ,使腹膜淋巴孔对腹透液吸收增加 ,导致腹膜透析失超滤。

PBL结合CBL教学在临床病理学住院医师规范化培训中的应用与初探

住院医师规范化培训是通过对医学院校毕业生在各个专科规范化培训基地进行系统、规范的临床工作实践,培养具有解决各个临床实际工作综合素质和医师职业素质和职业道德的临床医学人才,也是一个医学生向胜任临床工作高层次医生转变的重要阶段[1]。病理学作为基础医学与临床医学两门学科之间的桥梁,病理科作为医院的平台科室,病理诊断作为疾病诊断的“金标准”,可以给临床的诊治和预后判断提供充分的支持。因此,培养高质量的病理诊断医师尤为重要。而病理诊断医师的培养需要较长周期的训练学习,因此可以积累下足够的临床经验。据统计,全国病理医师缺口总数估计在10万人左右[2]。在我国人口基数巨大的情况下,这种不足更显突出。以问题为导向的学习(problem-based learning,PBL)和以案例为基础的学习(case-based learning,CBL)通过导师的指导,以分组讨论、解决问题的学习方式,强调学生的主动性和知识的全面性、延伸性,是更适合住院医师规范化培训的教学方法。本课题组将PBL联合CBL教学模式应用于病理住院医师规范化培训教学实践,以提高病理科住院医师的临床实践能力。

Girdin促进人类肿瘤进展与转移的研究

Girdin是一种新发现的大分子蛋白质,其在调节肿瘤细胞生长与凋亡、促进肿瘤细胞侵袭与转移以及促进肿瘤血管新生中具有重要的作用。目前,关于Girdin与人类肿瘤相关性的研究主要集中在结直肠癌、乳腺癌和神经胶质瘤。进一步探索Girdin的功能及其促进肿瘤进展与转移的分子作用机制,对人类肿瘤治疗及预后评估具有重要的意义。

腹透液的生物相容性对2′,5′-寡腺苷酸合成酶活性的影响

目的 :观察使用商业腹透液时 2′ ,5′-寡腺苷酸合成酶活性的动态变化和腹膜病理改变 ,探讨长期腹膜透析腹透液生物相容性对机体免疫功能影响和腹膜间皮的病理改变。方法 :①使用 3种常用腹透液建立腹膜透析动物模型 ;②用纸层析法动态测定实施和停止腹膜透析时 ,2′ ,5′ -寡腺苷酸合成酶活性的消长 ;③在光镜下观察腹膜间皮病理变化。结果 :腹膜透析时 ,各腹膜透析组和生理盐水组 2′,5′ -寡腺苷酸合成酶活性均升高 ;停止腹膜透析 ,生理盐水组 2′ ,5′-寡腺苷酸合成酶活性恢复正常 ,各腹膜透析组则持续降低 ;在腹膜透析时 ,各腹膜透析组均发生程度不等的间皮细胞脱落、腹膜增厚和急、慢性炎症细胞浸润 ;而Baxter组无急性炎症发生。随着停止腹膜透析时间延长 ,腹膜透析组病理改变逐渐修复。结论 :长期腹膜透析时 ,腹膜透析液对机体免疫功能均有长时间抑制 ,并造成不同程度的腹膜病理改变。腹透液的非生物相容性是导致机体免疫功能降低 ,腹膜损伤的重要因素。

一氧化氮供体硝酸异山梨酯对小鼠肿瘤生长的影响

[目的]研究一氧化氮(NO)供体硝酸异山梨酯(ISDN)对肿瘤生长的影响。[方法]①体内实验:以HepA肿瘤细胞接种小鼠左侧足垫制作荷瘤动物模型。小鼠连续腹腔注射ISDN,200μg/只,以生理盐水代替药物作为对照。给药后7d、14d观察尿液NO2-+NO3-含量、肿瘤大小。②体外实验:将HepA肿瘤细胞培养于含2μg/ml、10μg/ml、100μg/mlISDN的培养液中48h,用MTT法测定肿瘤细胞增殖程度。[结果]①ISDN组小鼠尿液NO2-+NO3-含量明显高于对照组(P<0.01);而ISDN组小鼠肿瘤体积明显小于对照组(P<0.05和P<0.01)。②3种浓度的ISDN可降低培养HepA肿瘤细胞增殖,在10μg/ml、100μg/ml浓度时,与对照组比较具有显著差异(P<0.01),且以100μg/ml浓度组抑制作用最强。[结论]NO供体ISDN可抑制肿瘤的生长,NO对肿瘤细胞增殖的直接抑制作用可能是其抗肿瘤作用机理的一部分。

脾切除对小鼠腹腔巨噬细胞数量和功能的影响

目的：研究脾切除对小鼠腹腔巨噬细胞数量和功能活性的影响。方法：术后４ 周获取腹腔常居巨噬细胞和炎症巨噬细胞，检测其数量、吞噬功能和一氧化氮水平。结果：与正常对照组和假手术组比较，脾切除组小鼠的２ 种巨噬细胞不仅数量明显减少，而且它们的吞噬功能和一氧化氮水平呈明显下降。结论：提示脾切除造成的单核吞噬细胞继发性炎症反应的损伤和巨噬细胞功能活性的降低。

腹膜透析小鼠腹膜巨噬细胞产生一氧化氮的动态变化及其腹膜间皮的病理改变

为研究腹膜透析(腹透)液对腹膜巨噬细胞产生一氧化氮的影响及腹膜间皮的病理改变,利用模拟腹透小鼠获取腹膜巨噬细胞,采用Criess重氮化反应法测定一氧化氮量,并取膈腹膜,光镜下作形态学观察。结果:随着腹透时间的延长,腹透小鼠腹膜巨噬细胞一氧化氮产生量显著高于对照组(P<0.01);停止腹透后,腹膜巨噬细胞一氧化氮产生量逐渐下降。形态学观察可见腹膜间皮细胞脱落,腹膜增厚及炎症性改变。提示腹透液非生理性持续刺激可导致腹膜巨噬细胞一氧化氮产生量增加,一氧化氮对长期腹透所致的腹膜炎症有抑制作用。