砭石艾灸治疗原发性痛经的效果

目的探讨砭石艾灸治疗原发性痛经的临床效果。方法选取2022年1月至2023年1月在北京按摩医院门诊治疗的120例原发性痛经患者作为研究对象,通过随机信封法分为砭石艾灸组(60例,砭石艾灸)和药物组(60例,布洛芬缓释胶囊)。比较两组治疗前后视觉模拟评分法(VAS)和COX痛经症状量表评分及临床疗效。结果砭石艾灸组治疗有效率高于药物组(P<0.05);两组治疗后即刻、治疗1个月后和治疗2个月后VAS评分均降低,且砭石艾灸组低于药物组(P<0.05);治疗后,两组总发作时间和平均严重程度评分均降低,且砭石艾灸组低于药物组(P<0.05)。结论砭石艾灸治疗原发性痛经的临床效果较好,能减轻疼痛,缓解临床症状。

老年脑梗死患者脑内微出血的发生及危险因素

目的探讨脑内微出血(MB)在老年性脑梗死患者中的发生、危险因素及各TOAST亚型间的发生率的差异。方法连续收集老年性脑梗死的住院病例,详细记录临床资料,观察脑内微出血及白质病变(WMC)的严重程度。对所有入组病例行TOAST分型,观察各亚型间MB发现率的异同。结果694例老年性脑梗死患者进入本研究。217例患者(31.3%),其中26例小动脉闭塞型患者(55.3%)脑内存在MB。单因素分析显示年龄(P=0.021),高血压病(P=0.024),入院时收缩压(P<0.001)、舒张压水平(P<0.001),既往脑梗死病史(P<0.001)及口服抗血小板聚集药物史(P=0.002)与MB的发生有关。Logistic回归分析显示WMC分值(OR1.157,95%CI1.112￣1.203,P<0.001)、既往脑梗死病史(OR1.587,95%CI1.013￣2.486,P=0.044)及舒张压水平(OR1.019,95%CI1.007￣1.032,P=0.003)为MB的独立危险因素。结论老年性脑梗死患者,特别是小动脉闭塞型的患者,MB的发生率增高,提示更为严重的脑内微血管病变及可能的出血倾向。脑白质病变的严重程度、既往脑梗死病史、舒张压水平是老年性脑梗死患者脑内MB发生的独立危险因素。

脑梗死后再发缺血性卒中与脑出血患者微血管病变及预后的比较

目的探讨脑梗死后再发缺血性卒中与脑出血患者的临床特点、影像学上微血管病变及预后的异同。方法连续收集急性复发性卒中的住院病例(初发事件为脑梗死,复发事件包括脑梗死或脑出血),详细记录临床资料,观察脑内微出血及白质病变的严重程度,随访有无严重血管事件及死亡的发生。结果175例再发脑梗死患者,19例复发事件为脑出血的患者进入本研究。155例(88.6%)再发脑梗死患者,以及18例(94.7%)脑出血患者存在白质病变。77例(44%)再发脑梗死患者和16例(84.2%)脑出血患者存在脑内微出血。脑出血组白质病变的严重程度及微出血的数目均明显高于再发脑梗死组(P=0.033,0.016),脑出血组的死亡率及再发脑出血的危险性明显增高(P=0.034,0.036)。结论严重的脑白质病变及微出血的出现与脑梗死后再发脑出血有关,多发微出血提示出血风险增高。如复发事件为脑出血,则其死亡率及再次复发脑出血的风险均明显增加。

急性脑卒中后执行功能障碍的危险因素

目的:探讨急性脑卒中后执行功能障碍发生的危险因素。方法:连续搜集符合健康对照组入组标准者80人,应用Mattis痴呆量表的主动/持续部分(MDRSI/P)评估执行功能。计算MDRSI/P评分的均数和标准差,将均数±标准差*2作为MDRSI/P评分正常值的下限。连续搜集于我院住院治疗的符合入组标准的急性脑卒中患者,记录患者的一般资料,登记入院时NIHSS评分。根据入院后脑磁共振T2成像表现记录梗死灶部位。采用Mattis痴呆量表的主动/持续部分(MDRSI/P)对患者的执行功能进行评估,根据有无伴发执行功能障碍,将患者分为两组,比较两组间临床资料、病灶部位是否存在统计学差异。结果:健康对照组年龄为(65.7±8.9)岁,MDRSI/P评分(32.7±3.1)分。MDRSI/P评分≤26分被认为存在执行功能障碍。共有74例脑卒中患者入组,21例(29.3%)患者被认为存在执行功能障碍。脑卒中后执行功能障碍的患者男性比例明显低于无伴执行功能障碍的患者(42.9%vs.69.8%,P=0.031),而存在脑血管病史的患者比例明显高于无伴执行功能障碍的患者(52.4%vs.26.4%,P=0.033)。左侧基底节区存在梗死灶的患者执行功能障碍的发生比例明显增高(P=0.008)。结论:女性、脑血管病史和左侧基底节区梗死灶与急性脑卒中后执行功能障碍的发生有关。

脑内微出血的严重程度分级及重度MB的危险因素分析

[目的]探讨脑内微出血严重程度的分级方法及重度脑内微出血的危险因素。[方法]连续搜集经核磁共振梯度回波T2*证实存在脑内微出血的急性缺血性脑卒中病例,根据微出血数目的不同,分为三个等级:轻度(1～2),中度(3～9)及重度(≥10)。[结果]292例患者入组本研究,重度组43例(14.7%)。Logistic回归显示白质病变分值(OR=1.130,P< 0.001)和年龄(OR=0.921,P=0.001)是重度脑内微出血的独立危险因素。[结论]白质病变分值和年龄是重度脑内微出血的独立危险因素,其中自质病变分值是危害性因素,而年龄是保护性因素。

脑卒中后情感淡漠与执行功能障碍、抑郁的相关性分析

目的:探讨急性脑卒中患者卒中后情感淡漠的发生,评价卒中后情感淡漠与抑郁、认知功能障碍、执行功能障碍的关系。方法:连续搜集于住院治疗的符合入组标准的急性脑卒中患者,采用淡漠评定量表-临床医生使用版本(AES-C)于起病后第2周对患者进行评估,根据有无伴发情感淡漠,将患者分为两组,比较两组间临床资料、MoCA、MMSE、HAMD、MDRS I/P评分是否存在显著性差异。评价AES-C评分和情感、认知、执行功能量表评分的相关性。结果:共有65例患者入组,其中22例(33.8%)患者存在情感淡漠症状。伴情感淡漠组患者MDRS I/P评分明显低于无伴情感淡漠组(25.2±2.5 vS.31.9±5.0 P<0.01),Pearson相关分析显示AES-C评分与MDRS I/P评分成负相关(r=-0.54,P<0.01),AES-C评分评分与HAMD评分成正相关(r=0.27,P=0.03)。结论:卒中后情感淡漠的严重程度与抑郁程度、执行功能障碍程度明显相关。

儿童多发性硬化的临床特点及核磁共振的诊断意义

目的探讨儿童多发性硬化（MS）的临床特点，分析核磁共振检查（MRI）对儿童多发性硬化的诊断价值。方法搜集MS患儿的临床资料及MRI结果进行分析，并进行随访。结果8例患儿入纽，平均随访时间（79．6±66．8）个月，患儿均有复发。所有患儿MRI检查均有阳性发现，脑MRI异常6例（75％），脑部以脑室周围及胼胝体最常受累。结论儿童MS在病程上多属于缓解-复发型。常规MRI对多发性硬化的诊断具有一定的价值，定期复查价值更大。

脑型多发性硬化的磁共振影像学分析

目的:探讨脑型多发性硬化(MS)的临床特点,分析核磁共振检查(MRI)对脑型多发性硬化的诊断价值。方法:搜集脑型多发性硬化患者的MRI结果进行回顾性分析。结果:23例患者入组,脑MRI检查均有阳性发现,以脑室周围及胼胝体最常受累,皮质受累4例(17.4%)。MRI增强见强化病灶者13例(56.5%)。结论:常规MRI对多发性硬化的诊断具有一定的价值,必要时定期复查。

帕金森病相关基因的研究进展

帕金森病(PD)是一种常见的老年神经系统慢性退行性疾病,其病因尚未完全明瞭。部分家族性PD致病基因的发现,为PD的遗传性提供了直接证据。本文就PD相关基因的定位、分子结构、表达产物的活性等作一综述。

普拉克索治疗帕金森病合并抑郁的效果及患者磁共振波谱的改变

目的探讨普拉克索治疗帕金森病合并抑郁(DPD)的效果及患者核磁共振波谱(MRS)的改变。方法 30例DPD患者在美多巴基础治疗下联用普拉克索治疗24周,在治疗前后进行MRS检查,汉密尔顿抑郁量表(HAMD)、帕金森病统一评分量表第三部分(UPDRSⅢ)和简易精神状态检查量表(MMSE)评分。结果 DPD患者额叶的MRS中N-乙酰天门氡氨酸(NAA)/肌酸(Cr)值低于治疗前(P<0.05),胆碱复合物(Cho)/Cr值高于治疗前(P<0.05);普拉克索治疗后DPD患者HAMD、UPDRS评分较治疗前显著降低(P<0.05);而MMSE评分治疗前后比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 DPD患者联用普拉克索治疗前后额叶MRS存在NAA/Cr和Cho/Cr比值的异常改变,普拉克索治疗DPD患者的部分非运动症状及改善抑郁症状有效。

帕金森病抑郁的发生率及相关因素分析

目的:探讨帕金森病抑郁的发生率及相关因素。方法:收集52例原发性帕金森病患者相关资料,完善汉密尔顿抑郁量表-24项、帕金森病非运动症状评定量表、帕金森病生活质量调查表-39、统一帕金森评分量表、修订的Hoehn-Yahr分级量表、修订的Schwab和英格兰日常生活活动量表、简明心理状态量表等,得出本研究中帕金森病抑郁的发生率,经Spearman相关分析其相关因素。结果:帕金森病合并抑郁者36例,占69.23%;其中简明心理状态量表评分(r=-0.294,P=0.036)及Schwab和英格兰日常生活活动量表评分(r=-0.506,P<0.001)与抑郁严重程度呈负相关,病程(r=0.274,P=0.049)、统一帕金森评分量表评分(r=0.485,P<0.001)、Hoehn-Yahr分级量表评分(r=0.459,P=0.001)、非运动症状评定量表评分(r=0.729,P<0.001)及生活质量调查表-39评分(r=0.619,P<0.001)与抑郁严重程度呈正相关。结论:帕金森病抑郁的发生率较高,与之相关的因素较多,并影响患者日常生活质量。

腺病毒介导血管内皮细胞生长因子基因体外转染骨髓间充质干细胞

【目的】探讨腺病毒介导血管内皮细胞生长因子(VEGF165)基因转染大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)后目的基因表达情况及对MSCs增殖分化的影响。【方法】构建含VEGF基因的腺病毒表达载体,利用贴壁法分离培养MSCs后,用荧光显微镜和流式细胞仪检测转染效果和转染率,用免疫组化、Western-Blot和ELISA方法分别检测VEGF基因转染MSCs后VEGF的表达情况。【结果】腺病毒介导的VEGF基因对于MSCs具有很高的转染效率,转染效率与病毒感染复制数(multiplicyties of infection,MOI)具有量效关系。MOI为150倍时,转染效率>95%,转染VEGF后,MSCs可有效表达VEGF,9d时达到表达高峰(1125pg/mL),13d后仍可检测到VEGF的表达。转染VEGF对MSCs的增殖分化没有明显影响。【结论】腺病毒介导的VEGF基因可以有效的转染MSCs,MSCs是一种理想的基因载体细胞,其携带的VEGF基因可获得较高的表达水平。

沉默caspase-3基因影响骨髓间充质干细胞的增殖和凋亡

背景:缺血缺氧的心肌微环境导致植入的细胞存活率低。目的:观察沉默caspase-3基因对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。方法:构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染骨髓间充质干细胞为转基因组,以正常细胞组和空载体组做对照,采用MTS法检测各组细胞增殖情况。建立缺血缺氧模型,real-time PCR和免疫组织化学分别检测缺血缺氧环境各组细胞的caspase-3mRNA和蛋白表达水平,应用流式细胞术检测不同缺血缺氧时间点(0,6,12,24,48h)各组细胞的凋亡率。结果与结论:重组慢病毒成功转染骨髓间充质干细胞,且细胞增殖活性升高(P<0.05)。缺血缺氧环境下,转基因组细胞caspase-3在mRNA和蛋白表达水平相比对照组下降(P<0.05)。沉默caspase-3能显著降低骨髓间充质干细胞的凋亡率(P<0.05),且随着缺血缺氧时间的延长凋亡率缓慢升高。结果提示,沉默caspase-3能加快骨髓间充质干细胞的生长速度和提高在体外缺血缺氧环境下的抗凋亡能力。

RNA干扰抑制骨髓间充质干细胞中caspase-3基因的表达

背景:研究发现,骨髓间充质干细胞移植入心肌梗死区域后易发生凋亡导致移植细胞存活率较低。目的:构建caspase-3基因的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs,siRNAs)表达质粒,探讨其在体外对骨髓间充质干细胞中caspase-3基因表达的抑制作用。方法:根据siRNA设计原则,针对caspase-3基因设计并合成siRNAs,构建caspase-3siRNA表达载体并利用脂质体介导方法瞬时转染骨髓间充质干细胞。实验分为正常对照组,阴性序列对照组(si-ncg)和3个干扰组(si-caspase-3-1、si-caspase-3-2和si-caspase-3-3)。结果与结论:成功构建了caspase-3siRNA表达载体并转染骨髓间充质干细胞。Westernblot和RT-PCR检测转染后的骨髓间充质干细胞中caspase-3蛋白和mRNA的表达下降,以转染si-caspase-3-3的骨髓间充质干细胞下降最明显。结果提示构建的caspase-3siRNA表达质粒在体外能抑制骨髓间充质干细胞中caspase-3基因的表达。

慢病毒介导的caspase-3沉默对大鼠骨髓间充质干细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨沉默caspase-3对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖、细胞周期和凋亡的影响。方法:构建靶向caspase-3的shRNA重组慢病毒并转染MSCs,通过real-time PCR和Western blotting在mRNA及蛋白水平鉴定转染结果。采用MTS法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期。Real-time PCR检测bcl-2和bax mRNA的表达。Hoechst荧光染色法检测细胞的凋亡情况。结果:Real-time PCR和Western blotting结果均表明成功建立稳定转染shRNA-caspase-3的大鼠MSCs细胞株。沉默caspase-3使MSCs的增殖率明显提高(P<0.05),且S期细胞百分比明显增多,为(52.66±0.30)%。沉默caspase-3后bcl-2 mRNA表达上调,bax mRNA表达下调,bcl-2/bax比值升高(P<0.05)。转染组的细胞凋亡率为(15.01±1.73)%,低于空载体组的(25.67±3.05)%和空白对照组的(23.67±1.16)%(P<0.05)。结论:沉默caspase-3能调控MSCs的细胞周期,促进细胞增殖,减少细胞凋亡。

AADC和NURR1基因联合c17．2神经干细胞移植治疗帕金森病的实验研究

目的研究芳香族氨基酸脱羧酶(AADC)基因和NURR1基因联合c17．2神经干细胞脑内移植后对帕金森病模型大鼠的治疗效果。方法人类神经元性AADC基因和NURR1基因真核表达载体分别转染至c17．2神经干细胞内。将帕金森病(PD)模型大鼠随机分为4组,分别予以脑内毁损侧纹状区移植含空质粒的c17．2神经干细胞(A组),pCDNA3-AADC转染后的c17．2神经干细胞(B组),pCDNA3-NURR1转染后的c17．2神经干细胞(C组)以及含有pCDNA3-AADC和pCDNA3-NURR1转染后的c17．2 神经干细胞(D组)。观察其病理性旋转行为的改善,采用酪氨酸羟化酶(TH)的免疫组化方法研究脑内多巴胺含量的变化,并用荧光示踪方法观察c17．2细胞在PD模型脑内的移行。结果各组动物脑内移植后动物旋转行为较前均有改善(P<0．05),尤以D组改善最为明显,其行为学最大改善达73．7％,且同A、B、C组间差异具有显著性(P<0．05)。免疫组化可见各组移植TH阳性细胞明显增多,TH染色的神经元树突或轴突密集,体内TH阳性区域明显较PD模型组扩大,其中尤以D组病理学改善最为明显。荧光示踪观察c17．2神经干细胞有突触形成,并与临近的细胞建立突触联系。结论 AADC基因联合NURR1基因共转染c17．2神经干细胞脑内移植后改善了动物的旋转行为,增加了脑内多巴胺的表达,且植入的神经干细胞可同宿主神经元形成突触联接,为研究多基因联合神经干细胞移植治疗帕金森病提供了新方法。

MRI活体示踪心肌梗死大鼠骨髓间充质干细胞的移植

背景:干细胞移植的疗效和安全性评估均需要对体内干细胞的存活、分布、迁徙、增殖及分化进行连续监测。目的:观察MRI示踪超顺磁性氧化铁标记的骨髓间充质干细胞在缺血心肌组织的分布、迁徙情况。方法:直接贴壁法分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞,获得的细胞进行免疫鉴定。以新型超顺磁性氧化铁标记骨髓间充质干细胞,体外MRI成像确定其体内示踪的可行性。标记后锥虫蓝拒染试验、MTT比色试验分别检测标记细胞的活力、增殖情况。60只SD大鼠随机分为3组,制备大鼠心肌梗死模型2周后再次开胸移植含标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液、含未标记骨髓间充质干细胞的PBS混合液和等量PBS。于移植后第1天、第3周行MRI检查,动态观察移植细胞的分布、迁徙,并根据MRI图像定位选择性行CD90免疫组化检查。结果与结论:骨髓间充质干细胞标记后,普鲁士蓝染色见胞浆内蓝色铁颗粒,标记效率为99%,标记细胞与未标记细胞间锥虫蓝拒染率、MTT吸光度差异无显著性意义。体外MRI可检测到标记细胞,并在T2WI及T2W/FFE序列上呈低信号。细胞移植1d后,在T2WI及T2W/FFE序列上可见标记细胞在梗死心肌边缘呈类圆形低信号;移植3周后,移植区域信号边界模糊,范围扩大,对比度降低。CD90免疫组化检测证实移植细胞可由梗死边缘向梗死区域迁徙。结果可见新型超顺磁性氧化铁可成功对大鼠骨髓间充质干细胞进行标记,细胞标记后可被MRI检测。

重组Persephin腺病毒对6-OHDA损伤神经干细胞的保护作用

【目的】探讨Persephin对6鄄羟基多巴(6鄄OHDA)损伤神经干细胞的保护作用。【方法】用RT鄄PCR法从人胚胎脑获得PersephincDNA,构建重组Persephin腺病毒。用Westernblot方法分析Persephin基因的表达,Hoechst染色和流式细胞术测定6鄄羟基多巴对神经干细胞凋亡的诱导作用。【结果】从人胎脑成功克隆了人PersephincDNA,构建了其腺病毒载体。Westernblot证实重组Persephin腺病毒在神经干细胞中的表达,表达的Persephin可抑制6鄄羟基多巴诱导的神经干细胞凋亡。【结论】Persephin对6鄄羟基多巴损伤神经干细胞具有保护作用。

多次脑卒中后双侧大脑半球损伤致双侧偏瘫、假性延髓麻痹:病例讨论

本文展示了康复评定会的工作模式,并通过对1例多次脑卒中导致双侧偏瘫、假性延髓麻痹患者的康复评定,总结双侧偏瘫患者康复治疗的特殊性。

碱性成纤维细胞生长因子基因转染大鼠骨髓间充质干细胞后目的基因的表达

目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染大鼠骨髓间充质干细胞后bFGF目的基因的表达情况,并进行影响骨髓间充质干细胞的生物学特性分析。方法:实验于2005-03/2006-02在中山大学第二附属医院医学研究中心完成。①选择近交系4周龄雄性SD大鼠10只,贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,构建含bFGF基因的腺病毒表达载体,利用腺病毒介导转染SD大鼠骨髓间充质干细胞。②传2代后,将细胞接种12孔培养板,培养至90%融合时弃上清,调整转染病毒滴度范围为50～400。荧光显微镜下通过观察绿色荧光强度检测转染效果,以流式细胞仪检测细胞转染效率。③传2代后,胰酶消化,置于6孔板内,每孔细胞数量5×105,2d后细胞贴壁生长于盖玻片上,分别转染Ad.bFGF、Ad.GFP,同时设立空白对照。转染病毒滴度选择200。应用免疫组化和Western-Blot法鉴定碱性成纤维细胞生长因子的表达,ELISA法检测培养上清液中碱性成纤维细胞生长因子的浓度。观察转染后骨髓间充质干细胞形态和生长情况的变化。结果:①pcDNA3/bFGF的鉴定结果:成功构建碱性成纤维细胞生长因子腺病毒表达载体。②Ad.GFP转染骨髓间充质干细胞的效率测定:转染48h后,绿色荧光蛋白的表达明显增强。当转染病毒滴度≤200时,腺病毒的转染效率与病毒剂量呈明显的正相关(P<0.05),当>200时转染效率趋于稳定,均在96%以上。③Ad.bFGF转染骨髓间充质干细胞的表达情况:bFGF蛋白表达免疫组化检测可见转染Ad.bFGF骨髓间充质干细胞的胞浆内充满棕褐色颗粒,阳性表达率为86%,而转染Ad.GFP及空白对照的骨髓间充质干细胞均为阴性。Western-Blot示转染Ad.bFGF的细胞裂解产物中碱性成纤维细胞生长因子含量明显高于转染Ad.GFP及空白对照。ELISA检测结果表明转染Ad.bFGF的细胞培养上清液中碱性成纤维细胞生长因子浓度第15天达高峰1467ng/L,此后逐渐下降,但至转染第28天时仍显著高于空白对照(441ng/L,128ng/L,t=4.31,P<0.01)。④转染Ad.bFGF对骨髓间充质干细胞增殖的影响:骨髓间充质干细胞的增殖分化没有明显变化。结论:采用腺病毒介导的基因转染技术可以将碱性成纤维细胞生长因子转染至骨髓间充质干细胞中,并有外源性基因和蛋白的表达。提示骨髓间充质干细胞是碱性成纤维细胞生长因子基因治疗的理想载体。