非平坦海床下缓波型立管转移过程中的参数分析

随着海上油气田探索及开发水域不断加深,通常会遇到有坡度的海床,这对缓波型立管的安装转移提出了更高的要求。基于虚功原理和最小势能原理,建立了缓波型立管的力学分析模型。基于该模型在非平坦海床条件下对缓波型立管转移过程做参数分析,研究海床坡度角、安装船张力、浮筒段长度、船与平台的水平间距等参数对缓波型立管转移过程的影响。研究发现:随着海床坡度角的增大,立管转移过程中的拱弯弯曲程度加剧,上拱点、下垂点均上移,悬挂点张力及最大剪力均减小;在非平坦海床下,随着影响参数的改变,立管上拱点、下垂点和悬挂点张力变化的拐点和趋势不同。该结论为在非平坦海床海洋环境下缓波型立管的设计与应用提供一定的参考。

MUC1抗原的B细胞表位预测

目的 预测MUC1抗原的B细胞表位。方法 联合运用多种方法对MUC1的二级结构和表面特性,如理化 性质、亲水性、可塑性、溶剂可及性及免疫原性等方面进行分析,预测MUC1的抗原表位。结果 MUC1存在有多个潜在的 抗原表位位点,可能的蛋白质抗原表位区域:1 -10,24 -54,65 -77,84 -91,108 -134,140 -156,159 -174,179 -196,199- 210,220- 233, 237- 265,270- 299,316 -337,351 -362,369- 396,411- 420,445 -502。结论 应用多参数预测MUC1抗原的B细胞表位,为进一步 研究MUC1结构和功能、构建MUC1突变体和选择表达新型MUC1分子奠定了基础。

MUC1抗原的表位预测及模拟位的筛选

目的预测MUC1抗原的B细胞表位,从噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟位。方法联合运用多种方法对MUC1的二级结构和表面特性,如理化性质、亲水性、可塑性、溶剂可及性及免疫原性等方面进行分析,预测MUC1的抗原表位。利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列,竞争性抑制实验鉴定阳性噬菌体克隆。结果MUC1存在有多个潜在的抗原表位位点,可能的蛋白质抗原表位区域:110,2454,6577,8491,108134,140156,159174,179196,199210,220233,237265,270299,316337,351362,369396,411420,445502。经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论应用多参数预测MUC1抗原的B细胞表位,为进一步研究MUC1结构和功能、选择表达新型MUC1分子奠定了基础。所得序列TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。

腹膜后纤维化的临床诊治分析

目的 为了提高对腹膜后纤维化的诊断和治疗水平。方法 总结我院1975年2月至2001年12月收治的腹 膜后纤维化患者36例,男20例,女16例。原发者12例,继发恶性肿瘤者10例,继发于肿瘤放疗后14例。手术治疗28 例,术前术后均加用激素。结果 随访6～42个月,术后肾功能均有改善或恢复正常,预后良好,仅4例继发于恶性肿瘤患 者死亡。结论 对于腹膜后纤维化引起的肾积水,尽早手术解除梗阻,引流尿液是有效的治疗方法。

噬菌体随机肽库筛选MUC1抗原模拟表位

目的噬菌体随机多肽文库筛选及鉴定MUC1抗原的模拟表位。方法利用纯化获得的BC2抗体筛选噬菌体随机7肽库,通过夹心ELISA分析噬菌体克隆,测定阳性克隆DNA序列并进行同源性及氨基酸分析,竞争性抑制实验鉴定噬菌体克隆。结果经3轮筛选,获得了30个阳性克隆,DNA序列分析并推导出氨基酸序列:TAPDLRP、SAPDLRP、AAPDSRP及LAPDFRP。鉴定结果表明:4个噬菌体展示肽克隆抑制率均在50%以上。结论所得序列TAPDLRP、SAPDLRPAAPDSRP及LAPDFRP模拟MUC1抗原表位。

噬菌体展示肽表位的免疫原性研究

目的研究模拟表位TAPDLRP的噬菌体展示肽的免疫原性。方法用我们筛选获得的展示MUC1抗原模拟表位的噬菌体阳性克隆免疫小鼠。以最大OD450值之纯化血清做为一抗行蛋白印迹分析。检测小鼠脾脏淋巴细胞增殖率。结果3次免疫小鼠后,血清(1∶1 000)中能检测到较强的MUC1抗体阳性。纯化血清可识别MUC1蛋白。噬菌体展示肽表位可在无佐剂存在情况下,大大促进小鼠的脾淋巴细胞的增殖。结论噬菌体是一种较好的生物载体。该模拟抗原免疫小鼠后能激发体液及细胞免疫应答,具有良好的免疫原性。

膀胱癌中Ha－ras癌基因点突变和ras P21表达的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术和寡聚核甘酸探针杂交法检测膀胱癌中Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子Ｇ→Ｔ突变，同时应用免疫组织化学方法检测了ｒａｓＰＺＩ在膀胱癌中的表达。在２９例膀胱癌中有１０例存在Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变，突变率为３４．５％，有１８例ｒａｓＰ２１表达为阳性，阳性率为６２．１％。结果提示Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变和ｒａｓＰ２１的表达与膀胱癌病理分级、临床分期和膀胱癌的复发密切相关。Ｈａ－ｒａｓ癌基因第１２位密码子点突变与ｒａｓＰ２１的表达是一致的。

人膀胱癌多药抗药性建立及逆转的实验研究

目的建立抗药细胞模型，研究维拉帕米和奎宁对膀胱癌抗药性的逆转及其机制。方法应用阿霉素（ＡＤＭ）大剂量短暂冲击结合低浓度递增法，建立抗药细胞模型，测定抗癌药物５０％抑制浓度和细胞内阿霉素浓度。结果获得了具有多药抗药性的ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞，该细胞对ＡＤＭ的敏感性下降了２１倍，同时对表柔比星（表阿霉素，ｅｐｉｒｕｂｉｃｉｎ）、长春新碱、依托泊甙也具有显著的交叉耐药性，对顺铂、丝裂霉素、氟尿嘧啶和甲氨蝶呤无抗药性。ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞在脱离ＡＤＭ诱导第８周后，其抗药性保持９０％以上。ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞内ＡＤＭ聚积量显著低于ＢＩＵ－８７细胞（Ｐ＜０．０５）；维拉帕米、奎宁能使ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞内ＡＤＭ聚积量增加（Ｐ＜０．０５），两者联合应用基本上可逆转ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞的抗药性。结论（１）ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞具有多药抗药性（ＭＤＲ）表型，且抗药性稳定。（２）细胞内ＡＤＭ聚积量减少是抗药细胞的重要变化，维拉帕米、奎宁能逆转ＢＩＵ－８７／ＡＤＭ细胞的抗药性，可能与增加细胞内ＡＤＭ聚积量有关。

MUC1抗体BC2的纯化研究

目的为了得到较高纯度的MUC1抗体BC2。方法应用RESOURSEQ离子交换柱进行阴离子交换层析 ,对腹水中的MUC1单抗BC2进行纯化。结果所得BC2抗体纯度约为 90 %。结论所获得高纯度的BC2抗体可做为筛选配基 ,用于下一步噬菌体随机肽筛选MUC1抗原模拟表位。

P^（53）蛋白表达与膀胱癌预后关系的探讨

我们应用免疫组织化学方法，对３４例石蜡包埋的膀胱癌组织标本Ｐ５３蛋白表达进行了检测。结果发现，３４例膀胱癌标本中有１４例Ｐ５３蛋白表达阳性，且Ｐ５３蛋白的表达与膀胱癌病理分级和临床分期密切相关。１４例Ｐ５３阳性病例膀胱癌的复发率为８５．７％，而２０例Ｐ５３阴性者膀胱癌的复发率为４５％。Ｐ５３阳性病例几乎全有淋巴结转移，明显高于Ｐ５３阴性者。提示Ｐ５３蛋白阳性病例预后较差。

胰肾一期联合移植手术方法探讨

目的 探讨胰肾一期联合移植手术方法中有关问题。方法 采用原位低温灌注 ,整块切除的方法切取供胰。将供胰移植于病人的右侧髂窝 ,供肾移植于左侧髂窝 ,供体十二指肠与受者的膀胱侧侧吻合。结果 5例病人中 ,3例术后胰腺及肾脏功能满意 ,未使用胰岛素 ,进正常饮食 ,血糖一直在正常范围 ,肾功能良好 ,至今已分别生存 2 0月、1 4月、1 1月。其余 2例中 ,1例因排斥反应 ,于术后第 47天死于急性心功能衰竭。另 1例因血栓形成 ,于术后第 33天切除移植胰腺 ,但肾功能良好。

HSP27基因的克隆与表达

目的 构建热休克蛋白2 7(Heatshockprotein 2 7,HSP2 7)真核表达质粒以用于肾脏缺血预适应(ischemiaPre conditioning ,IP)的作用及机制研究。方法 利用乳腺癌细胞系MCS 7,用RT PCR方法扩增HSP2 7全长基因,将HSP2 7基因克隆到真核表达载体pAAV MCS中。重组质粒转染NIH3T3细胞,Westernblot法鉴定重组质粒HSP2 7/ pAAV MCS能在哺乳动物细胞中正确表达。结果 RT PCR方法正确地扩增出全长HSP2 7基因。限制性内切酶酶切和测序结果证实HSP2 7基因克隆完全正确。重组质粒转染哺乳动物细胞系NIH3T3后,ECLWesternblot法证实了目的基因能在其中正确表达。结论 成功地克隆真核表达重组质粒HSP2 7/ pAAV MCS ,为下一步研究HSP2 7对肾脏缺血预适应的作用及其机制打下了基础。

ras癌基因产物P^(21)表达与膀胱癌生物学行为关系的研究

应用免疫组织化学方法,对34例石蜡包埋的膀胱癌标本中P^(21)表达进行了检测.结果显示:P^(21)表达只存在于癌组织中,且膀胱癌病理分级愈高、临床分期愈晚,则P^(21)阳性率越高.21例P^(21)阳性膀胱癌的复发率为90.5%,而13例P^(21)阴性膀胱癌的复发率为46.2%,P^(21)阳性病例几乎全有淋巴结转移,明显高于P^(21)阴性者.提示P^(21)阳性病例预后较差.

肾血管平滑肌脂肪瘤35例临床分析

目的探讨肾血管平滑肌脂肪瘤的临床及病理学特征、诊断要点及治疗。方法对我院1994年1月至2004年6月收治的肾血管平滑肌脂肪瘤35例进行回顾性分析。结果肿瘤直径为0.6～12cm,平均7.8cm。手术治疗34例,其中肾切除24例,肾部分切除5例,肿瘤剜除5例。随访11例无肿瘤复发。选择性肾动脉栓塞1例。3例行保守治疗。结论认真询问病史,结合超声及CT表现,对本病的诊断极为重要。术中宜做冰冻病理检查。手术效果良好。

层状围岩管片衬砌配合陶粒与锚杆的联合支护技术研究

深部层状围岩中修建盾构隧道,管片衬砌易受偏压作用,对结构安全构成挑战。提出一种管片衬砌配合陶粒可压缩层与锚杆的联合支护技术,采用大比例尺相似模型试验针对联合支护技术的支护效果进行研究,进行了可压缩层配合不同长度和间距的锚杆支护效果对比研究,从管片衬砌内力、变形角度分析了联合支护效果,从可压缩层的压缩变形路径和移动特征角度分析了联合支护机理。研究结构表明：联合支护技术一定程度上改变了管片的内力分布形式,降低了围岩偏压作用,削减管片衬砌内力和形变量;锚杆的施作可以有效减小层状围岩变形,陶粒压缩层可以有效吸收围岩变形;联合支护中锚杆的长度和间距存在一个最优值,超过该最优值,锚杆的加固效果不再明显增加;联合支护的作用机理由两部分构成：陶粒压缩层的让压作用与锚杆加固作用。研究结果对层状围岩中修建盾构隧道的支护结构型式设计具有一定参考价值。

层状围岩中管片衬砌受力特征的模型试验研究

深部层状围岩结构强度具有各向异性特点,此类地层中修建盾构隧道,管片衬砌易受偏压作用,对结构安全构成挑战。开展层状围岩与盾构管片衬砌相互作用关系的相似模型试验研究,研究不同层理倾角下管片衬砌壁后围岩压力、管片衬砌内力和变形分布规律。研究结构表明：管片衬砌受力和变形特征受层理面控制明显,管片衬砌受力极不均匀,弯矩、轴力和变形呈现非对称分布;管片衬砌壁后围岩压力最大值集中在强度最弱的层理面法线方向,该方向上管片衬砌的弯矩最大,轴力最小,变形最大;层理倾角对管片衬砌的受力和变形影响显著,层理倾角不仅影响管片衬砌壁后围岩压力分布形状还影响其量值大小;均质地层中,管片衬砌裂缝主要出在封顶块接头处和其他环向接头处,层状地层中管片衬砌裂缝出现位置受接头位置影响减弱,而受层理倾角影响明显,管片衬砌裂缝出现位置主要集中在层理面法向。研究结果对层状围岩中修建盾构隧道的支护结构型式设计具有一定参考价值。