骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠肾脏nephrin表达的影响

背景:目前对于骨髓间充质干细胞移植治疗急性肾损伤的研究较多,但对治疗慢性肾脏疾病的研究报道甚少。目的:观察经腹主动脉近肾动脉处移植的骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠足细胞的修复作用及对肾脏Nephrin mRNA表达的影响。方法:全骨髓法+贴壁筛选法分离培养纯化SD大鼠骨髓间充质干细胞用于移植。SD大鼠随机数字表法分为3组:正常组为正常SD大鼠,无任何干预措施;模型组大鼠尾静脉1次注射阿霉素5mg/kg+当日腹主动脉注入生理盐水1mL;骨髓间充质干细胞治疗组大鼠尾静脉1次注射阿霉素5mg/kg+当日腹主动脉注入干细胞1×107个,体积约1mL。各组于处理后7,14,28d3个时间点各取8只大鼠用于取材。流式细胞仪对骨髓间充质干细胞表面分子进行鉴定,磺基水杨酸-硫酸钠比浊法测24h尿蛋白,全自动生化分析仪测血生化指标(白蛋白、血脂),苏木精-伊红染色及透视电镜下观察肾组织的病理变化,RT-PCR检测肾组织NephrinmRNA的表达。结果与结论:①与正常组相比,模型组大鼠均出现肾病综合征表现,以腹水、大量蛋白尿、低蛋白血症、高胆固醇血症及足细胞足突广泛融合为特征;骨髓间充质干细胞治疗组较模型组则有明显改善。②与正常组相比,模型组大鼠肾组织Nephrin mRNA表达明显降低(P<0.05);骨髓间充质干细胞治疗组与模型组相比,肾组织Nephrin mRNA表达有所回升(P<0.05)。提示骨髓间充质干细胞移植能明显增加阿霉素肾病大鼠肾组织nephrin mRNA的表达,并对受损的肾脏组织起到一定的保护作用。

儿童活动性狼疮性肾炎标准治疗早期和晚期应用贝利尤单抗对比观察

目的对比观察标准治疗早期和晚期静滴贝利尤单抗(BLM)治疗儿童活动性狼疮性肾炎(LN)的效果。方法22例儿童活动性LN患儿按照BLM治疗时间不同分为早期组(12例)和晚期组(10例),两组均采用标准治疗,早期组于标准治疗0.65(0.50~1.00)个月后应用BLM治疗,晚期组于标准治疗6(6.00~7.25)个月后应用BLM治疗。比较不同时点(BLM治疗0、4、8、12、24、32 w)尿微量白蛋白、24 h尿蛋白定量、血清学指标(Alb、Cr、C3、C4、IgG)、CD19+B细胞计数、SLEDAI-2K活动评分及糖皮质激素用量、不良反应。结果两组治疗0、4、8、12、24、32 w尿微量白蛋白和24 h尿蛋白定量比较,两组治疗4、8、12、24、32 w尿微量白蛋白和24 h尿蛋白定量较同组治疗0 w比较(P均<0.05)。与同组治疗0 w比较,早期组治疗4 w血清学指标Alb、C3、C4水平升高,血Cr、IgG水平降低(P均<0.05);与同组治疗0 w比较,两组治疗4、8、12、24、32 w的CD19+B细胞计数及SLEDAI-2K评分均降低(P均<0.05)。同组治疗4、8、12、24、32 w的GC剂量与治疗0 w比较,两组间治疗0、4、24、32 w的GC剂量比较,P均<0.05。两组患儿治疗期间均无过敏反应,肾功能均无恶化,均未继发机会感染。结论活动性LN患儿早期静滴BLM治疗可尽快达到临床缓解,可减轻蛋白尿,改善血清学指标,降低疾病活动度,减少糖皮质激素使用量,具有良好的安全性;晚期静滴BLM治疗虽不如早期应用效果,但仍可使患儿蛋白尿下降缓慢,延缓疾病进展。

首次发现1例局灶性节段性肾小球硬化症患儿PAX2基因新的移码变异及文献复习

目的了解儿童遗传性慢性肾脏病的临床与病理特点,寻找其致病基因突变位点并分析基因突变与临床表型的关系,以期早期诊断,早期预防。方法收集徐州医科大学附属徐州儿童医院1例疑似为遗传性因素所致慢性肾脏病患儿及其直系亲属的临床资料,并行肾穿刺病理检查,同时采用二代基因测序方法对该患儿、患儿父母及妹妹进行基因检测,寻找可能的突变位点,并与该家系中正常个体进行比较。结果患儿为14岁男孩,3岁时起病,主要临床表现为蛋白尿、夜尿增多,未正规治疗。期间多次尿蛋白++~+++,且逐渐出现尿床症状,家长一直未予重视。2年前于当地医院查肝、肾功能,家长诉未见异常,2019年8月19日因尿床至我院就诊,门诊查尿蛋白+++,血尿素氮13.54 mmol/L,肌酐188μmol/L,肾脏超声提示双肾缩小,肾穿刺活检病理结果为局灶性节段性肾小球硬化症(FSGS)。基因检测示患儿PAX2基因存在c.143delGp.Gly48Valfs*35剪切位点突变,且目前尚未有人群携带记录,因而考虑该患儿为PAX2基因出现新的移码突变。结论该例患儿临床表现为慢性肾脏病,肾活检确诊为FSGS,基因检测PAX2基因发生新的移码变异。对于病因不明的慢性肾脏病患儿应注意完善肾脏病理及基因检测,有助于明确诊断。

尿激酶联合激素治疗小儿溶血尿毒综合征的疗效观察

目的探讨激素联合尿激酶治疗溶血尿毒综合征(HUS)患儿的机制及疗效。方法回顾性分析2010年1月至2016年1月苏州大学附属儿童医院肾脏风湿科收治的9例溶血尿毒综合征患儿的临床资料。其中重症7例,轻症2例,患儿入科后在对症支持治疗的基础上给予甲强龙冲击治疗(250～500 mg/d),3 d后改泼尼松(1 mg·kg^(-1)·d^(-1))口服并逐渐减量,病程中给予尿激酶抗凝治疗(1 500～2 000 IU·kg^(-1)·d^(-1))。其中4例重症HUS患儿因合并大量蛋白尿,完善肾穿刺检查示中-重度系膜增生,后续加用环磷酰胺序贯冲击治疗。结果所有患儿在抗凝过程中无明显出血倾向。7例患儿出院时血红蛋白、血小板恢复正常,肾功能尿素、肌酐正常,尿蛋白好转,血压正常。2例患儿肾功能及血红蛋白接近正常,尿蛋白、尿红细胞正常,血压略高。出院后根据病情门诊规律随诊或定期住院环磷酰胺冲击治疗。所有患儿追踪随访6～12个月,血常规、肾功能均恢复正常,血尿、蛋白尿转阴、血压降至正常,无死亡及慢性透析患儿出现。结论激素联合尿激酶治疗可改善HUS患儿的预后,减少后遗症的发生,是安全有效的。

过敏性紫癜合并链球菌感染的临床特点及血清免疫球蛋白和补体的变化

目的探讨过敏性紫癜(HSP)合并链球菌感染的临床特点,为HSP防治提供依据。方法研究对象为435例HSP患儿,根据血抗链球菌溶血素O(ASO)检查分为两组,HSP合并链球菌感染者为HSP+ASO组78例,HSP不合并链球菌感染者为HSP-ASO组357例,同时选用30例健康儿童作为对照组。分析各组患儿临床特点、血清免疫球蛋白IgA、IgM、IgG及补体C3、C4的变化。结果 (1)HSP发病以秋冬季节为主,男童多于女童。链球菌感染阳性率为17.93%,HSP+ASO组关节肿痛发生率及年龄较HSP-ASO组偏高。与HSP-ASO组相比,HSP+ASO组男童所占的比例偏高,差异有统计学意义(χ~2=5.035,P=0.025)。而两组间腹痛及肾脏损害差异无统计学意义(χ~2=0.256,P=0.613);(2)与HSP-ASO组相比,HSP+ASO组血清IgG、IgA有明显增高(t=4.68,t=3.20,P=0.000,P=0.002);(3)与HSP-ASO组相比,HSP+ASO组血清C3、C4有下降(t=2.49,t=2.43,P=0.025,P=0.023),而HSP-ASO组及对照组相比,血清C3、C4差异无统计学意义(t=1.26,t=1.31,P=0.206,P=0.200);(4)各组血清IgM差异无统计学意义。结论 HSP合并链球菌感染在较大年龄男童更常见,实验室检查以严重的体液免疫功能紊乱及低补体血症为主,临床能增加关节肿痛的发生率,对腹痛及肾脏损害的发生率无明显影响。但其远期的损害有待进一步研究。

468例泌尿道感染患儿临床特点分析

目的分析不同年龄段小儿泌尿道感染的临床特点、致病菌分布及影像学检查情况。方法选取468例泌尿道感染患儿为研究对象,将其分为婴儿组(1个月~1岁)、幼儿组(>1~3岁)及儿童组(>3岁),分析3组的临床资料。结果小儿泌尿道感染以婴幼儿多见,婴儿组中以发热为首发症状的患儿比率为52.15%,高于幼儿组(17.27%)及儿童组(5.23%),差异有统计学意义(P<0.05);儿童组中尿路刺激征患儿比率为63.37%,高于婴儿组(8.60%)及幼儿组(41.82%),差异有统计学意义(P<0.05);婴儿组中合并泌尿系发育异常者比率为32.80%,与幼儿组(21.82%)及儿童组(17.44%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。468例患儿中段尿培养检出病原菌共105例(22.43%),其中革兰阴性菌71例(67.62%),以大肠埃希菌为主;革兰阳性菌31例(29.52%),其中以屎肠球菌为主。结论婴儿泌尿道感染患儿以男童多见,临床症状缺乏特异性,多以发热为临床表现,局部症状不明显,应注意尿常规检查。随着年龄的增长,女童泌尿道感染比率逐渐升高,临床以尿路刺激症状为主要表现的患儿比率也逐渐上升。泌尿道感染的病原菌仍以革兰阴性菌为主,大肠埃希菌占比最高,而革兰阳性菌中屎肠球菌的检出率也相对较高。

骨髓间充质干细胞对肾病综合征大鼠CD4^+CD25^+调节性T细胞的影响

背景:CD4+CD25+调节性T细胞功能降低、数量下降已被公认为是肾病综合征患儿免疫失调的重要表现。骨髓间充质干细胞具有免疫调节功能,可上调CD4+CD25+调节性T细胞,抑制淋巴细胞增殖,并已在许多免疫性疾病方面成功应用。目的:观察骨髓间充质干细胞移植对原发性肾病综合征大鼠外周血CD4+CD25+调节性T细胞的影响。方法:自SD大鼠分离骨髓间充质干细胞,经体外传代培养及鉴定后制备细胞悬液。30只SD大鼠随机均分为3组,生理盐水组和干细胞移植组尾静脉注射阿霉素建立阿霉素肾病大鼠模型,干细胞移植组注射阿霉素当日尾静脉射干细胞1×107;正常组不做处理。结果与结论:①与正常组比较,生理盐水组大鼠均出现肾病综合征表现,以腹水、大量蛋白尿、低蛋白血症、高胆固醇血症为特征;干细胞移植组较生理盐水移植组则有明显改善(P<0.05)。②造模第28天,干细胞移植组和生理盐水组大鼠造模后外周血CD4+CD25+Treg/CD4+Treg均明显高于正常组(P<0.05);干细胞移植组与生理盐水组比较差异无显著性意义(P>0.05)。③造模第28天,干细胞移植组大鼠外周血单个核细胞FoxP3mRNA的表达显著高于生理盐水组和正常组(P<0.05)。提示骨髓间充质干细胞移植对阿霉素肾病综合征模型有一定的治疗作用,其机制可能与上调FoxP3在组织局部的表达而诱导CD4+CD25+Treg产生有关。

儿童过敏性紫癜肾损害的临床危险因素分析

目的探讨和分析儿童过敏性紫癜发生肾损害的相关危险因素,为临床降低儿童过敏性紫癜肾损害的发生提供一定理论依据。方法选取2017年8月至2019年7月徐州医科大学附属徐州儿童医院收治的116例过敏性紫癜患儿为研究对象,根据是否伴有肾损害分为紫癜性肾炎组(64例)和非紫癜性肾炎组(52例)。对两组患儿的临床资料进行回顾性分析,采用单因素和多因素logistic回归分析紫癜性肾炎的相关危险因素。结果两组患儿在年龄≥6岁、皮疹反复发作≥3次、血小板计数升高、皮疹持续时间≥4周、消化道出血、血浆纤维素蛋白酶原升高、高密度脂蛋白降低等方面比较,差异有显著性(P<0.01或P<0.05);两组在性别、发病季节、关节肿痛、血红蛋白、低密度脂蛋白和总胆固醇等方面比较,差异无显著性(P>0.05);logistic回归分析发现年龄≥6岁、皮疹反复发作≥3次、皮疹持续时间≥4周、消化道出血、血小板计数升高、低高密度脂蛋白对紫癜性肾炎的影响具有显著意义,属于独立危险因素。结论引起儿童过敏性紫癜肾损害的危险因素较多,其中年龄≥6岁、皮疹反复发作≥3次、皮疹持续时间≥4周、消化道出血、血小板计数升高、低高密度脂蛋白属于独立危险因素,对上述危险因素的过敏性紫癜患儿应加强预防和早期治疗,以减少或避免肾损害的发生。

白芍总苷辅助治疗过敏性紫癜患儿的临床疗效

目的探讨白芍总苷辅助治疗过敏性紫癜患儿的临床疗效。方法选取过敏性紫癜患儿86例随机分为观察组45例和对照组41例。两组均给予常规治疗,对照组给予阿魏酸哌嗪片、氯雷他定颗粒、孟鲁司特钠咀嚼片口服,观察组在对照组基础上加用白芍总苷胶囊口服,两组均治疗1个月。比较两组的临床疗效、住院时间、临床症状消失所需时间、复发率及紫癜性肾炎发生率。结果观察组的总有效率高于对照组,住院时间短于对照组,临床症状消失所需时间短于对照组,半年内复发率及紫癜性肾炎发生率均低于对照组(均P<0.05)。结论白芍总苷辅助治疗过敏性紫癜患儿可有效缓解临床症状,减少紫癜性肾炎的发生。

以外科并发症首发的不完全川崎病误漏诊分析

目的分析不完全川崎病(kawasaki disease,KD)的误诊原因。方法对我院收治的3例以外科并发症首发的不完全KD的临床资料进行回顾性分析。结果本组3例均以外科并发症首发而收治于外科。1例因左颈部肿块误诊为颈部脓肿行手术治疗,术中引流出较多血液,无脓液,经内科会诊,仔细查体并完善检查,确诊为不完全KD。2例以消化道症状首发,先后误诊为急性胃肠炎和肠梗阻,其中1例行手术治疗切除坏死肠段,术后逐步出现KD典型体征,经仔细查体及相关检查,确诊为不完全KD;另1例保守治疗无效,病程中逐步出现KD典型症状体征,确诊不完全KD。予丙种球蛋白、阿司匹林治疗,3例均痊愈出院,预后较好。结论 KD为多系统侵犯性疾病,可以颈部包块、肠梗阻等外科并发症首发,临床应注意鉴别,并密切观察病情变化,以尽早确诊,同时对外科并发症也应积极处理。

以骨关节痛为首发表现的血液肿瘤性疾病患儿临床特点分析

骨关节痛在儿童中常见,但在临床工作中常不被重视,多被误诊为生长痛、滑膜炎、缺钙等.当患儿出现生活质量严重受影响,伴有肢体明显活动障碍后才被重视,但血液肿瘤性疾病早期可能以骨关节痛为首发症状,多被误诊为关节炎、骨髓炎等[1,2],延误诊治.本研究收集以骨关节痛为首发表现的血液肿瘤性疾病患儿临床资料,分析其骨关节痛与关节炎患儿关节痛早期临床表现及实验室、影像学表现的不同,以提高对血液肿瘤性疾病的进一步认识,减少临床误诊.

孟鲁司特联合氯雷他定治疗过敏性紫癜患儿的临床效果

目的探讨孟鲁司特联合氯雷他定治疗儿童过敏性紫癜的效果。方法选取2016年3月~2018年3月我院收治的初发型过敏性紫癜患儿60例为研究对象,采用随机数字表法将所有患儿分为对照组与实验组,每组30例。对照组在常规治疗的基础上给予氯雷他定口服治疗,实验组在对照组基础上给予孟鲁司特联合氯雷他定口服治疗,比较两组患儿临床症状持续时间、总有效率、血清IgA、IgG、C3、IL-6指标变化情况。结果治疗后,实验组临床症状持续时间短于对照组(P<0.05),临床总有效率高于对照组(P<0.05),血清免疫指标IgA、IgG、C3、IL-6水平均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用孟鲁司特联合氯雷他定方案治疗儿童过敏性紫癜,可缩短临床症状持续时间,改善免疫指标水平,治疗效果显著,值得临床推广。

骨髓间充质干细胞移植对嘌呤霉素氨基核苷肾病大鼠足细胞修复作用的研究

目的探讨骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对嘌呤霉素氨基核苷(puromycin aminonucleoside,PAN)肾病大鼠足细胞修复作用及其对裂孔隔膜分子Nephrin表达的影响,为BMSCs移植治疗肾病综合征提供实验依据。方法 45只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为3组,每组15只。模型组:一次性腹腔注射PAN(0.15mg/g)造模;BMSCs组:PAN造模+BMSCs移植(细胞移植前经Brdu标记示踪);对照组:不予以造模。实验第10天杀鼠,留取标本行血、尿、肾组织超微结构检测,免疫组化检测肾脏Brdu标记阳性细胞的表达,半定量RT-PCR及Western blot方法检测Nephrin表达变化。结果模型组大鼠出现大量蛋白尿、血白蛋白降低、胆固醇升高,伴有广泛足突的融合。与模型组比较,BMSCs组尿蛋白、血胆固醇降低,血白蛋白回升及足突融合现象改善,差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化显示,BMSCs组肾组织中可见阳性细胞,模型组及对照组未见阳性细胞;半定量RT-PCR及Western blot显示,模型组Nephrin相对表达量较对照组明显下降,BMSCS组与模型组比较有所增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BMSCs移植对PAN肾病大鼠足突融合有一定的改善,Nephrin表达的变化可能在其中发挥了作用。

他克莫司与霉酚酸酯治疗儿童难治性IgA肾病的疗效比较分析

在我院收治的难治性IgA肾病患者临床中探讨应用他克莫司与霉酚酸酯治疗儿童难治性IgA肾病的应用效果及现实意义。方法 本研究的起止时间为2020年8月至2022年8月,研究样本为难治性IgA肾病患者40例,其中20例患者应用霉酚酸酯治疗方案(为对照组),另20例患者应用他克莫司治疗(为观察组),观察两组患者的临床数据指标情况。结果 通过深入对比分析可知,观察组难治性IgA肾病患者的临床疗效优于对照组(p<0.05)。结论 本研究数据结果表明,难治性IgA肾病的过程中应用他克莫司具有较好的治疗效果,可有效改善临床症状,调节肾功能指标,降低炎症因子水平及较少的不良反应,具有较高的安全性与可靠性。

先天性肾病综合征NPHS1基因突变1例并文献复习

目的分析1例先天性肾病综合征芬兰型(CNF)NPHS1基因突变患儿临床资料。方法回顾1例先天性肾病综合征(CNS)患儿的临床资料,包括患儿及其父母的基因检测结果,分析基因突变位点并文献复习。结果该例为52日龄小婴儿,女性,出生时有大胎盘。出生42 d起出现进行性加重的浮肿、蛋白尿、血白蛋白降低和胆固醇增高,临床诊断为CNS。患儿NPHS1基因出现2个杂合突变:c.2928-2A>C(IVS21)剪切位点突变;c.928G>A(exon8),p.(D310N)错义突变。患儿母亲携带c.2928-2A>C(IVS21)杂合突变,父亲携带c.928G>A(exon8),p.(D310N)杂合突变。结论 NPHS1基因的c.2928-2A>C(IVS21)和c.928G>A(exon8),p.(D310N)突变可引起CNF;其中,c.2928-2A>C(IVS21)国内外未见报道。

以蛋白尿为主要表现的儿童紫癜性肾炎临床与病理分析

目的分析以不同程度蛋白尿为主要表现的紫癜性肾炎(HSPN)患儿临床与病理的相关性。方法回顾性分析102例以蛋白尿为主要表现的HSPN患儿的临床资料、病理分级,并根据蛋白尿情况进行分组:轻度蛋白尿组(24-h尿蛋白定量<25mg/kg)、中度蛋白尿组(24-h尿蛋白定量≥25mg/kg且<50mg/kg)、大量蛋白尿组(24-h尿蛋白定量≥50mg/kg)。结果102例患儿病理分级Ⅰ级5例(4.90%),Ⅱ级25例(24.51%),Ⅲ级71例(69.61%),Ⅵ级1例(0.98%)。轻度蛋白尿组Ⅲ级4例(33.33%),中度蛋白尿组Ⅲ级8例(44.44%),大量蛋白尿组Ⅲ级59例(81.94%),三组比较差异有统计学意义(χ^2=52.28,P<0.05)。大量蛋白尿组中,伴肉眼血尿者16例,伴镜下血尿或无血尿者56例,其中合并肉眼血尿组Ⅲ级所占的比率最高,差异有统计学意义(χ^2=7.28,P<0.05)。结论以蛋白尿为主要表现的HSPN肾脏病理分级中Ⅲ级最多见;肉眼血尿与肾脏损害程度密切相关。

儿童非典型溶血尿毒综合征19例临床分析

目的分析儿童非典型溶血尿毒综合征(aHUS)临床特点及治疗情况。方法回顾性分析19例aHUS患儿的临床资料,包括临床表现、实验室检查、辅助检查、治疗及预后。结果患儿首发症状有贫血、皮肤出血点、咳嗽、发热、尿色异常、肾功能异常、血小板减少和抽搐等。19例患儿均有血红蛋白、血小板计数减少,乳酸脱氢酶(LDH)、尿素氮、肌酐升高,且有蛋白尿。18例患儿间接胆红素升高,17例患儿补体C3下降。19例骨髓检查显示骨髓增生活跃,红系明显增生,巨核细胞和血小板均减少。2例患儿肾穿刺病理结果提示血栓性微血管病变。19例患儿行血浆置换和糖皮质激素治疗,其他治疗包括输注洗涤红细胞纠正贫血、输注血小板、补液纠正电解质紊乱和抗感染等。18例患儿治疗后血小板计数升至正常范围,血红蛋白有明显好转,肾功能改善,LDH降至正常,补体升至正常。结论 aHUS患儿往往表现为多系统损害,容易误诊、漏诊,多数伴有补体C3下降。血浆置换联合激素治疗对aHUS有一定的疗效,能改善患儿的预后。

“学生主导型”查房模式在儿科实习带教中的初步探索

探究儿科实习带教中采用学习主导型查房模式的效果。方法:随机在我院选取2019年12月-2020年12月期间接收的80名临床医学实习学生,分为观察组和对照组,对比两组对象不同查房模式的实习效果。结果:观察组的学习能力、文献检索能力、医学理念循证能力、疾病分析能力、问题解决能力、沟通表达能力、人文关怀和学习兴趣均明显高于对照组,P<0.05,差异显著。结论:在儿科实习带教中应用学习主导型查房模式能够体现学生主体地位,发挥学生主动学习能力,提高临床实习水平,具有推广价值。