香芹酚对白血病细胞生物学行为的影响及其机制

目的:探讨香芹酚对白血病细胞生物学行为的影响及其对circ-0008717/miR-217分子轴的调控作用。方法:体外培养人急性淋巴细胞白血病细胞Molt-4,分别加入不同浓度的香芹酚处理细胞;si-NC、si-circ-0008717分别转染入Molt-4细胞(si-NC组、si-circ-0008717组),pcDNA、pcDNA-circ-0008717、anti-miR-NC、anti-miR-217分别转染入Molt-4细胞后加入香芹酚处理细胞(香芹酚+pcDNA组、香芹酚+pcDNA-circ-0008717组、香芹酚+anti-miR-NC组、香芹酚+anti-miR-217组);MTT、平板克隆形成实验、流式细胞术分别检测细胞活力、集落形成数、细胞凋亡率;RT-qPCR法检测circ-0008717和miR-217的表达量;双荧光素酶报告基因实验检测circ-0008717与miR-217的靶向关系。结果:经香芹酚处理后,细胞活力明显降低(r=-0.9405),circ-0008717的表达水平明显降低(r=-0.9117),集落形成数明显减少(r=-0.9256),细胞凋亡率明显升高(r=0.8464),miR-217的表达水平明显升高(r=0.9468);与si-NC组比较,si-circ-0008717组miR-217的表达水平升高(P<0.001),细胞活力降低(P<0.001),集落形成数明显减少(P<0.001),细胞凋亡率升高(P<0.001);与香芹酚+pcDNA组比较,香芹酚+pcDNA-circ-0008717组细胞活力升高(P<0.001),集落形成数明显增多(P<0.001),细胞凋亡率明显降低(P<0.001);circ-0008717可靶向调控miR-217的表达;与香芹酚+anti-miR-NC组比较,香芹酚+anti-miR-217组细胞活力明显升高(P<0.001),集落形成数明显增多(P<0.001),细胞凋亡率明显降低(P<0.001)。结论:香芹酚可通过下调circ-0008717的表达而促进miR-217的表达从而减弱白血病细胞增殖、克隆形成能力及促进细胞凋亡。

M2型急性髓系白血病患者骨髓中MMSA-8、MMSA-1表达及临床意义

目的:检测急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中多发性骨髓瘤相关抗原(MMSA)-8、MMSA-1表达情况,探讨二者在急性髓系白血病中的临床意义。方法:纳入2019年1月-2020年1月本院M2型急性髓系白血病患者83例为研究组,同期血液科诊断为单纯缺铁性贫血患者15例为对照组,实时荧光定量PCR检测骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1表达水平。将研究组患者根据疗效分为缓解、未缓解,根据预后状况分为预后良好、预后中等和预后不良,分析MMSA-8、MMSA-1与疗效、预后的关系。另收集研究组患者的一般资料,包括入院时血常规白细胞数、血红蛋白、血小板数和骨髓原始细胞百分比,Pearson法分析MMSA-8、MMSA-1与患者临床资料以及MMSA-8与MMSA-1的相关性。结果:对患者骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1 mRNA水平分析结果显示,研究组患者明显高于对照组患者(P<0.05);研究组中未缓解患者明显高于缓解患者(P<0.05),预后中等、预后不良患者均明显高于预后良好患者(P<0.05),预后不良患者仅MMSA-1 mRNA水平明显高于预后中等患者(P<0.05)。Pearson法分析结果显示,研究组患者MMSA-8、MMSA-1与白细胞数呈正相关(r=0.468,r=0.516),MMSA-8与MMSA-1呈正相关(r=0.318)。结论:M2型急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中MMSA-8、MMSA-1水平升高,二者均与疾病发生发展关系密切,且对预后有一定预测价值。

巨桉与柳桉、邓恩桉杂种子代测定初报

对巨桉与柳桉、邓恩桉22个组合杂种子代测定林适应性和生长性状、耐寒性状及其遗传变异规律进行分析表明,杂种桉子代成活率、保存率和耐寒指数差异极显著,树高、胸径、单株材积差异显著。耐寒指数和树高受中等偏强遗传力控制,胸径、单株材积受中等偏弱遗传力控制;变异系数材积>胸径>树高。以7年生保存率、树高、胸径、单株材积和4年生耐寒指数为选择指标,初选3个优良组合及10个优良单株杂种桉,优良组合平均单株材积比对照巨桉增长9. 76%~20. 41%,耐寒指数比对照柳桉高0. 31;优良单株耐寒指数均为5,平均单株材积0. 34947 m3,比对照平均值增长110. 31%。

JAK1抑制剂SHR0302和芦可替尼对骨髓增殖性肿瘤SET2细胞系和原代细胞增殖抑制和抗炎作用机制的研究

目的探究选择性JAK1抑制剂SHR0302和芦可替尼对骨髓增殖性肿瘤(MPN)细胞株SET2细胞和MPN患者原代细胞的影响以及分子作用机制。方法CCK8法检测不同浓度SHR0302和芦可替尼对SET2细胞增殖能力的影响;集落形成实验检测SHR0302和芦可替尼对MPN患者原代细胞红系爆式集落形成单位(BFU-E)的作用;多因子检测试剂盒MSD检测SHR0302和芦可替尼对SET2细胞IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8、IL-12p70蛋白表达水平的影响;以Western blot法检测SHR0302和芦可替尼对SET2细胞JAK-STAT信号通路分子磷酸化水平的影响。结果0.1、1.0、2.5、5.0μmol/L SHR0302作用SET2细胞24、48、72 h,细胞增殖抑制率随药物浓度的增大而增高(P<0.001);0.01、0.05、0.10μmol/L芦可替尼作用SET2细胞48、72 h,细胞增殖抑制率亦随药物浓度的增大而增高(P<0.001),且均在72 h抑制作用最显著。2.5μmol/L SHR0302、0.1μmol/L芦可替尼作用SET2细胞72 h,细胞增殖抑制率分别为(59.94±0.60)%、(64.00±0.66)%,提示SHR0302的增殖抑制作用弱于芦可替尼。与对照组比较,0.1、1.0、5.0μmol/L SHR0302和0.1、0.2、0.4μmol/L芦可替尼均浓度依赖性地抑制MPN患者BFU-E形成,1.0µmol/L SHR0302对MPN患者BFU-E集落形成抑制程度与0.2µmol/L芦可替尼相当。除IL-12外,1.6μmol/L SHR0302作用SET2细胞24 h可明显抑制炎性介质蛋白IL-6、TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-8表达(P<0.01),与1.0μmol/L芦可替尼对炎性介质抑制作用相当。不同浓度SHR0302作用SET2细胞3 h后JAK-STAT信号通路显著抑制,在1.0μmol/L时可显著抑制p-STAT1(Tyr701)、p-STAT3(Tyr705)蛋白磷酸化,在5.0μmol/L时可使p-JAK1(Tyr1022/1023)、p-STAT5(Tyr694)蛋白磷酸化水平明显下调(P<0.05),而芦可替尼在0.1μmol/L即可明显抑制下游STAT蛋白磷酸化水平。结论SHR0302能有效抑制MPN细胞株和患者原代细胞的增殖以及炎性因子表达,其机制可能与下调p-JAK1及其下游p-STAT1、p-STAT3、p-STAT5蛋白磷酸化水平相关,但其抗增殖、抗炎作用弱于芦可替尼。