人脐带间充质干细胞外泌体的分离鉴定及其溶血性能研究

目的:分离并鉴定人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,HUCMSC)分泌的外泌体,研究其对人血的溶血性能。方法:通过超速离心法从脐带干细胞培养上清中分离外泌体,采用蛋白免疫印迹法、透射电镜和纳米颗粒跟踪分析法进行鉴定;制备人红细胞悬液,加入不同浓度外泌体,进行溶血试验,用试管法观察并用紫外分光光度法测定计算溶血度。结果:分离获得的外泌体特异富集蛋白CD9、CD81、Alix,不含有高尔基体蛋白Gm130;透射电镜下可见其呈杯盘状结构,粒径直径为40～120 nm;脐带干细胞外泌体对人血的溶血率小于5%。结论:HUCMSC分泌的外泌体具有外泌体的经典结构及典型特征,不引起人血溶血反应,为未来脐带干细胞外泌体作为载体进行药物递送提供了实验依据。

正畸联合修复治疗牙列缺损伴牙颌畸形的效果和安全性分析

目的探究对牙列缺损伴牙颌畸形患者实施正畸联合修复治疗的效果。方法简单随机选择2019年1—12月收治的牙列缺损伴牙颌畸形患者共60例为作为该次研究对象,采取随机分组法分为每组30例。对照组为单纯修复治疗,观察组为正畸联合修复治疗。均随访3个月,对比两组患者治疗效果、满意度评分、菌斑指数、软垢指数、生活质量评分、牙齿功能及不良反应发生率。结果观察组治疗优良率93.33%高于对照组73.33%,差异有统计学意义(χ^(2)=4.320,P<0.05);观察组满意度评分较对照组更高,差异有统计学意义(t=23.987,P<0.05);观察组治疗后3个月生活质量评分较对照组更低,差异有统计学意义(t=14.950,P<0.05);观察组治疗后3个月菌斑指数、软垢指数评分较对照组更低,差异有统计学意义(t=4.284、5.817,P<0.05);观察组治疗后3个月咬合力及咀嚼效率均较对照组高,差异有统计学意义(t=7.836、9.987,P<0.05);观察组不良反应发生率3.33%低于对照组20.00%,差异有统计学意义(χ^(2)=4.043,P<0.05)。结论对牙列缺损伴牙颌畸形患者实施正畸联合修复治疗的效果更佳,且不良反应更少,患者满意度更高。

干细胞及组织工程技术在生殖医学领域应用的研究进展

目前,约15%的育龄夫妻面临着不孕不育的困扰,严重影响了家庭和社会的稳定。随着辅助生殖技术的发展,输卵管性不孕和男性重度少弱畸精子症已经不是生育的最大障碍,子宫和卵巢的生殖功能下降成为制约生育的瓶颈。子宫和卵巢的结构及功能损伤导致的生殖功能障碍是临床治疗的难点。

多囊卵巢综合征患者卵泡液中6种miRNAs表达的检测

目的:分析多囊卵巢综合征(PCOS)患者卵泡液外泌体中miRNA-9、miRNA-18b、miRNA-19、miRNA-24、miRNA-199和miRNA-320水平,初步探讨其在PCOS发生、发展中的潜在意义。方法:48例接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)治疗的不孕症患者,分为PCOS组(23例)和对照组(25例),留取其卵泡液。采用超速离心法提取卵泡液外泌体,分别用外泌体粒径分析(NTA)、蛋白质印迹(Western blotting)和透射电镜验证外泌体。通过实时荧光聚合酶链式反应(PCR)法检测卵泡液和外泌体miRNA-9,miRNA-18b,miRNA-19,miRNA-24,miRNA-199,miRNA-320的表达情况。结果:卵泡液中PCOS组miRNA-199的表达水平高于对照组(5.42±0.80 vs.1.02±0.94,P<0.01),miRNA-320的表达水平低于对照组(0.47±0.06 vs.1.23±0.09,P<0.01);2组间miRNA-9,miRNA-18b,miRNA-19和miRNA-24的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。在外泌体中,PCOS组miRNA-9和miRNA-18b的表达水平高于对照组(8.94±0.54 vs.1.01±0.97,2.66±0.19 vs.1.12±0.06,均P<0.01),miRNA-199和miRNA-320的表达水平则低于对照组(0.43±0.11 vs.1.22±0.07,0.53±0.09 vs.1.18±0.15,均P<0.01)。结论:PCOS患者卵泡液和外泌体存在miRNA-9,miRNA-18b和miRNA-199的表达,可能与PCOS发生、发展相关。

妇科恶性肿瘤淋巴结标本存放器的设计与应用

目的设计妇科恶性肿瘤淋巴结标本存放器(以下简称“标本存放器”)并进行应用。方法标本存放器由存放框、分隔板、标记板3个部分组成。2022年1月—12月,便利选取浙江省某三级甲等医院手术室391例需收集腹膜后淋巴结的妇科恶性肿瘤手术患者作为研究对象,随机分为试验组和对照组,试验组196例采用标本存放器收集淋巴结标本,对照组195例采用传统弯盘收集标本。比较两组额外核对标本率、处置淋巴结标本的时间以及医护人员的满意度。结果试验组额外核对标本率为10.62%,对照组为72.48%,两组比较,差异具有统计学意义(χ^(2)=1687.85,P<0.001)。试验组处置淋巴结标本的时间为(5.2±0.3)min,短于对照组的(8.3±0.9)min,两组比较,差异具有统计学意义(t=17.898,P<0.001)。试验组医生及护士对标本存放器的满意度均高于对照组(P<0.05)。结论该研究设计的标本存放器可减轻医护人员的工作负荷,提高工作效率,提升工作满意度,保证病理结果的准确性。

姜黄素通过激活GSK-3β/β-catenin通路抑制正畸牙齿移动过程中牙周膜自噬

【目的】观察姜黄素对正畸牙齿移动(OTM)的作用及其潜在机制。【方法】将30只大鼠随机分为5组,即正常组,模型组,姜黄素40、80、160 mg/kg组,每组6只。除正常组,其余各组大鼠均构建OTM模型。干预后,微型CT断层扫描上颌骨观察位移,苏木素-伊红(HE)染色法观察上颌组织病理形态,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记(TUNEL)染色法观察牙周膜组织细胞凋亡,采用流式细胞术测定牙周膜活性氧簇(ROS)水平,酶标仪测量牙周膜组织丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,分别采用免疫荧光染色法、Western Blot法检测牙周膜组织中糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)/β-连环蛋白(β-catenin)通路相关蛋白表达和自噬水平。【结果】与模型组比较,姜黄素各剂量组OTM诱导的牙周膜成纤维细胞增多,牙周膜中MDA和ROS水平降低,SOD和GSH-Px活性升高,牙周膜自噬指标Beclin1、Lamp和LC3B的蛋白表达水平降低,牙周膜p-GSK-3β/GSK-3β和β-catenin蛋白表达水平降低(均P<0.05)。【结论】姜黄素可能通过阻断GSK-3β/β-catenin通路抑制氧化应激,从而抑制正畸牙齿移动过程中牙周膜自噬。