龙胜凤鸡IGF2BP1基因的克隆、序列分析和过表达载体构建

为研究胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(Insulin-like growth factor 2 mRNAbinding protein 1,IGF2BP1)基因的序列和在鸡肌肉发育中的功能,研究克隆IGF2BP1基因并进行生物信息学分析,构建IGF2BP1的过表达载体pEGFP-IGF2BP1,在成肌细胞验证载体的功能。结果显示:龙胜凤鸡IGF2BP1基因CDS区序列全长1 731 bp,编码576个氨基酸,与参考序列相比,存在6处同义突变;物种间同源性分析显示,龙胜凤鸡IGF2BP1基因与原鸡(Gallus gallus)、火鸡(Meleagris gallopavo)、绿头鸭(Anas platyrhynchos)、猪(Sus scrofa)、奶牛(Bos taurus)、小鼠(Mus musculus)的相似性分别为99.7%、94.7%、92.5%、82.4%、82.8%、82.7%;蛋白质二级、三级结构主要含有无规卷曲(45.83%)、α螺旋(27.26%)和延伸链(20.83%);经过酶切和测序鉴定显示,成功构建了pEGFP-IGF2BP1质粒,并且该质粒可在成肌细胞中表达绿色荧光,qRT-PCR结果显示IGF2BP1在试验组(转染pEGFP-IGF2BP1)的表达量极显著高于对照组(转染pEGFP-N1)(P<0.01)。结果表明,成功克隆IGF2BP1基因,构建的IGF2BP1基因过表达载体在成肌细胞中成功表达。

小麦茎基腐病原菌定量检测方法构建及应用

为进一步明确天津地区小麦茎基腐病发病状况并开展防控预测,针对小麦茎基腐两大主要病原菌假禾谷镰刀菌和小麦根腐离蠕孢菌,建立病原菌实时荧光定量检测体系。基于病原菌ITS序列设计并筛选出特异性引物Fpg-qrt-F/R和Bs-qrt-F/R,扩增片段大小分别为298 bp和116 bp。以病原菌基因组为标准品构建实时荧光定量标准曲线,建立了病原菌含量检测方法,并对天津地区小麦茎基腐发病田小麦根际土壤及麦种中携带假禾谷镰刀菌和小麦根腐离蠕孢菌的含量进行了定量检测。试验结果表明:天津地区发病田块小麦根际土壤中假禾谷镰刀菌基因组含量为0.3438~77.6867 pg.g^(-1),小麦根腐离蠕孢基因组含量为1.6853~844.2290 pg.g^(-1)。此外对15个不同地区的小麦种子进行检测,其中假禾谷镰刀菌检出率为40%,麦种带菌量为0.2617~0.2690 pg.g^(-1),未检出小麦根腐离蠕孢。本研究建立了病原菌荧光定量检测体系,摸清了天津地区小麦茎基腐的发病情况,确定了病田土壤中小麦茎基腐病原菌菌量的最低阈值,为相关土传病害的发生提供早期预警。

广西成功研发首张优质肉鸡种芯片“桂芯一号”

在中央深入推进实施种业振兴行动的指引下,针对当前广西优质肉鸡分子育种中存在的痛点和难点,广西大学杨秀荣教授团队基于十三五期间主持实施完成的广西创新驱动发展专项(科技重大专项):广西地方鸡种质资源优良基因的挖掘与新品种培育(AA 17204027),挖掘到一批优质肉鸡重要经济性状的候选基因和分子标记,于2022年3月,成功研发出首张广西优质肉鸡基因育种芯片“桂芯一号”。该芯片包含2万个位点,涵盖1.77万个与生长、繁殖、肉质、抗病、饲料报酬和外观性状等多种经济性状相关的功能位点,芯片位点在群体中的检出率平均可达99.6%以上。

南丹瑶鸡鸡冠与繁殖性状的相关分析

为探究优质鸡鸡冠与繁殖性状的关系,试验以南丹瑶鸡300只母鸡、150只公鸡为研究对象,测量鸡冠面积、冠高、冠长及冠厚,分别将其与母鸡开产至40周龄的产蛋量、22周龄公鸡的精子活力及密度进行相关性分析,并根据面积大小将公鸡分为两组,在22周龄和28周龄时比较两组间精液品质的差异。结果显示:母鸡的鸡冠面积与产蛋量呈显著正相关(P<0.05);22周龄公鸡的精子密度与鸡冠面积、鸡冠高、鸡冠长、鸡冠厚度均呈显著正相关(P<0.05),精子活力与鸡冠面积和厚度呈显著正相关(P<0.05),且大鸡冠组的精子密度显著高于小鸡冠组的精子密度(P<0.05);28周龄大鸡冠组的精液量显著高于小鸡冠组(P<0.05)。研究表明,鸡冠与鸡产蛋量、精子密度等繁殖性状有关,在公鸡中虽然不同周龄中的精液品质有所不同,但大鸡冠公鸡精子质量略高于小鸡冠公鸡,可通过对鸡冠大小的选择来间接对优质鸡的繁殖性状进行选育。

几种植物生长调节剂对黄瓜冬春季穴盘育苗的影响

为培育健壮的黄瓜幼苗,解决黄瓜冬春季穴盘育苗存在的幼苗徒长、质量差等问题,本试验采用药液浸种的方法,研究了植物生长调节剂1.2%吲哚丁酸水剂、5%萘乙酸可溶液剂、5%吲哚丁酸·萘乙酸可溶液剂和0.01%28-高芸薹素内酯可溶液剂对黄瓜幼苗生长的影响。试验结果表明,1.2%吲哚丁酸水剂10 mg/kg在25℃下浸种48 h后,能显著促进黄瓜根系生长,提高幼苗壮苗指数,壮苗指数增加率为39.73%。本研究为培育优质黄瓜秧苗提供了参考依据。

静息态功能MRI应用于原发性失眠并认知障碍患者的诊断价值研究

目的:研究分析静息态功能MRI应用于原发性失眠并认知障碍患者的诊断价值。方法:选取2020年1月至2021年12月福建省厦门大学附属第一医院放射科收治的原发性失眠患者51例作为研究对象。对患者采用蒙特利尔认知评估量表(MoCA)进行认知功能评价,选择MRI图像采集进行数据分析。根据评价原发性失眠并认知障碍患者的数量,同时评价认知障碍患者与非认知障碍患者的ReHo值,判断静息态功能MRI应用于原发性失眠并认知障碍患者的诊断价值。结果:根据蒙特利尔认知评估量表(MoCA)的评估结果可知原发性失眠并认知障碍患者为21例,发生率为41.18%;认知障碍患者分别在左侧海马旁回、左侧颞中回、左侧颞下回、右侧颞下回、右侧额下回、右侧后扣带回均显著高于非认知障碍组(P<0.05);认知障碍患者分别在左侧角回、左侧顶上小叶、左侧颞上回、左侧颞下回、右侧梭状回、右侧颞上回、右侧前扣带回均显著低于非认知障碍组(P<0.05);本研究以MoCA量表的评价结果作为金标,计算静息态功能MRI的诊断效果,灵敏度、特异度、准确度分别为76.19%、76.67%、76.47%。结论:静息态功能MRI应用于原发性失眠并认知障碍患者具有理想的诊断价值,可以为临床早期诊断、早治疗提供参考依据。

天津水稻穗腐病病原菌鉴定及室内毒力测定

近年来,水稻穗腐病在天津地区发生较重,成为影响水稻产量和品质的重要病害之一。本试验连续两年对天津地区水稻主产区穗腐病危害进行调查、病原菌分离鉴定,并采用生长速率抑制法测定病原菌对9种杀菌剂的敏感性。病原菌分离鉴定结果显示,引起天津地区水稻穗腐病的病原菌为稻黑孢霉(Nigrospora oryzae)。药剂敏感性测定结果显示,95%咯菌腈和95.3%丙环唑对稻黑孢霉抑菌效果最好,2020年EC_(50)值分别为0.2776、1.3102μg/mL,2021年EC_(50)值分别为0.5171、2.0188μg/mL;80%代森锰锌可湿性粉剂对两年菌株的抑制效果差异较大,对2020年菌株EC_(50)值为8.0151μg/mL,对2021年菌株的EC_(50)值为24.6704μg/mL。75%三环唑对该病原菌无抑制作用,生产上不推荐使用。本研究明确了天津地区水稻穗腐病的致病菌株并筛选了高效抑菌药剂,为生产中该病害的防治提供了参考。

重症脑卒中患者益生菌联合早期肠内营养治疗前后营养指标、炎症因子水平变化及预后危险因素分析

目的分析重症脑卒中患者益生菌联合早期肠内营养治疗前后营养指标、炎症因子水平变化及预后危险因素。方法回顾性选取自2020年1月至2022年10月邢台市第三医院收治的104例重症脑卒中患者作为研究对象,按照治疗方法不同将其分为对照组和观察组,各52例。两组均在常规治疗的基础上,对照组予以早期肠内营养治疗,观察组予以益生菌联合早期肠内营养治疗,持续治疗14 d。比较两组治疗后1 d的营养指标(总蛋白、前清蛋白、血红蛋白、甘油三酯)、炎症因子[超敏C-反应蛋白(hs-CRP)、降钙素原、白细胞计数(WBC)]、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、急性生理学及慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、格拉斯哥昏迷指数(GCS)评分,以改良Rankin量表评分评价预后,使用单因素分析及多因素Logistic回归分析重症脑卒中患者预后的危险因素。结果观察组治疗后1 d的总蛋白、前清蛋白、血红蛋白、甘油三酯水平分别为(67.83±5.60)g/L、(224.15±26.75)mg/L、(144.13±8.77)g/L、(1.64±0.52)mmol/L,均高于对照组[(61.37±4.56)g/L、(172.56±18.73)mg/L、(130.68±6.74)g/L、(1.42±0.36)mmol/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后1 d的hs-CRP、降钙素原、WBC水平分别为(17.04±4.14)mg/L、(3.06±0.57)ng/L、(10.08±2.12)×10^(9)/L,均低于对照组[(26.14±5.62)mg/L、(5.17±1.28)ng/L、(13.30±2.87)×10^(9)/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组治疗后1 d NIHSS评分、APACHEⅡ评分分别为(7.68±1.43)、(9.76±2.31)分,均低于对照组[(10.45±1.72)、(13.16±2.85)分],GCS评分为(13.48±0.52)分,高于对照组[(12.26±0.48)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。经单因素分析及多因素Logistic回归分析,高龄、NIHSS评分高、营养不良及APACHEⅡ评分高均是重症脑卒中患者预后的危险因素(P<0.05)。结论益生菌联合早期肠内营养治疗能够有效改善重症脑卒中患者的营养状态,降低炎症反应水平,提高疗效,而患者的预后与年龄、病情轻重和营养状态有关,值得临床予以重视。

广西麻鸡STMN2基因克隆、生物信息学及组织表达分析

为了探究Stathmin-like 2(STMN2)在广西麻鸡中的蛋白结构和组织表达水平,本研究克隆了广西麻鸡STMN2基因并进行生物信息和组织表达谱分析。通过克隆获得STMN2基因CDS序列全长,利用qRTPCR分析STMN2基因在不同组织中的表达水平。结果显示,STMN2基因编码区序列全长540bp,共编码179个氨基酸。生物信息学分析表明,广西麻鸡STMN2氨基酸序列与原鸡、雉鸡、绿头鸭、鸽、人、小鼠的同源性分别为99.3%、98.8%、96.1%、97.8%、85.7%、87.9%。进化树分析结果显示,STMN2基因在禽类和哺乳类之间存在明显的遗传距离,其中广西麻鸡与原鸡的亲缘关系最近,与雏鸡的亲缘关系较近,鸽和绿头鸭次之。STMN2蛋白的分子质量20.88 ku,等电点为8.72,是不具有跨膜结构和信号肽的不稳定亲水碱性蛋白。qRT-PCR结果显示,STMN2基因在脑中表达量最高,显著高于其他组织或器官。本实验结果为进一步研究鸡STMN2基因功能提供了理论参考。

水稻恶苗病病菌鉴定及其对化学药剂的敏感性分析

为进一步明确天津地区水稻恶苗病发病特点及引发该种病害的病原菌,同时摸清水稻恶苗病病原菌对目前生产上常用化学药剂的抗药性,以对天津地区水稻恶苗病的发生特点及化学药剂防治提出解决方案和优化措施。通过采集天津市不同地区不同栽培管理条件下水稻发病植株,依据发病植株的田间症状表现,并通过病原菌分离观察菌株形态特征和构建系统发育树等分子生物学鉴定方法,明确该病是由藤仓镰刀菌(Fusarium fujikuro)引起的水稻恶苗病;通过对苯醚甲环唑、丙硫菌唑、多菌灵、福美双、咯菌腈、咪鲜胺、氰烯菌酯、肟菌酯、戊唑醇等9种常用化学杀菌剂的敏感性测定,结果表明该病原菌对生产上使用频率最高的氰烯菌酯、咯菌腈和咪鲜胺3种药剂均产生了严重的抗药性,其抗性倍数分别为730.16、107.27、326.73,而且8个不同来源菌株的抗药性地域差异较大,根据其EC50可分成3、2、3、3、3、2、3、3、2个聚类组。结果表明,藤仓镰刀菌是天津地区水稻恶苗病的主要侵染病原菌,由于抗药性较严重近1~2年内应当停止使用氰烯菌酯、咪鲜胺、咯菌腈等3种杀菌剂,其他类型杀菌剂也应交替、轮换使用,避免连续、单一用药,以降低水稻恶苗病给水稻生产造成的损失。

乙酰丁香酮对根癌农杆菌介导的甘薯遗传转化的影响

研究了乙酰丁香酮 (AS)对根癌农杆菌介导的甘薯离体遗传转化的影响 .结果表明 :①菌液中加入AS不利于遗传转化 ;②AS的作用效果与培养基的 pH值有关 .培养基的 pH值为 5 8时 ,加入AS不能提高转化频率 ;而pH值为 5 2时 ,加入AS则能显著提高转化频率 ,特别是AS浓度为 2 5mg·L-1时 ,Kanr 芽获得率提高到 35 7%;③茎段外植体切口两端各滴加 2 μL 2 0 0 μmolL-1的AS ,可使Kanr 芽获得率达 13 3%.

生防细菌B579对土传病害的防治效果及促长作用

通过对生防细菌B579防治土传病害效果及促进黄瓜生长作用的研究,结果表明,生防细菌B579能够抑制立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)等5种天津地区常见土传病原菌,平皿抑菌率达到78%以上。盆栽试验表明,B579发酵液(10~8cuf/ml)浸泡黄瓜种子对黄瓜立枯病的防治效果达71.8%;提高黄瓜发芽率并且促进黄瓜生长,促长率达到30%以上。

利用响应面分析方法优化生防细菌B579增殖培养基

采用响应面法（Response Surface Methodology,RSM）对影响生防细菌B579生长的黄豆饼粉、玉米粉、牛肉膏3个主要因子的最佳水平及其交互作用进行了研究与探讨。结果表明黄豆饼粉、玉米粉、牛肉膏分别在30.2、31和23.5g/L的条件下,可使B579获得最大菌体量。验证试验证实了该方程的预测值与实际值之间吻合较好。优化后的培养基使菌体量从起始LB培养基的8×10^9cfu/mL提高到8×10^11cfu/mL。

植物生长调节剂及其研究与应用

介绍了植物生长调节剂的定义、特点、研究应用的现状及其较新的研究应用领域,提出了植物生长调节剂在未来农业中的应用前景。

鸟类性别决定与性别分化机制

鸟类的性别由性染色体(ZZ雄性,ZW雌性)的遗传物质决定。在胚胎期,1条或2条性染色体上的基因控制着鸟类性别的分化,ZZ雄性性腺发育成睾丸,ZW雌性性腺发育成卵巢。DMRT1(Doublesex and mab-3 relatedtranscription factor 1)被认为是目前为止调节性腺分化的最佳候选基因。然而,最近的研究发现,鸟类的性别独立于性激素信号而表现为细胞自主性。因此,鸟类的性别决定基因不仅仅要控制性腺的分化,而且能操纵全身的细胞。从这个意义上说,DMRT1不可能是鸟类性别决定的开关基因。文章将从W染色体与卵巢发育、Z染色体与睾丸发育及性别决定的自主性等3个方面对鸟类性别决定与性别分化机制取得的最新进展进行阐述,为研究鸟类性别决定的开关因子、性别决定的分子机理奠定基础。

鸡DMRT1基因CRISPR/Cas9载体构建及打靶效率的检测

DMRT1(Double sex and Mab-3 related transcription factor 1)是鸡性腺分化和发育的关键候选基因,其详细的功能和作用途径还未被阐明。为了解明DMRT1在鸡性腺分化和发育过程中的功能,研究首次利用在线sg RNA平台设计4条鸡DMRT1 sg RNA序列,构建了4个sg RNA表达载体:Guide-1、Guide-2、Guide-3和Guide-4。转染鸡DF-1成纤维细胞后,利用T7E1内切酶的方法检测4个表达载体的打靶效率。结果显示,成功构建了4条正确的鸡DMRT1 sg RNA表达载体,并且都能高效地在DF-1细胞中表达,其中Guide-4表达载体能有效地打靶DMRT1基因,打靶效率为24.82%。研究结果为进一步在鸡胚敲除DMRT1基因,研究其功能奠定了基础。

生防细菌防治土传病害的研究进展

介绍了土传病害危害程度及生防细菌的种类、作用机制、防治土传病害的研究概况,提出了目前利用生防细菌防治土传病害存在的问题及应用前景。

广西地方鸡品种群体遗传结构及其遗传关系分析

为探讨广西地方鸡品种遗传关系及群体遗传结构,利用21对荧光标记微卫星引物对广西三黄鸡(SH)、霞烟鸡(XY)、广西麻鸡(GXM)、南丹瑶鸡(NDY)、龙胜凤鸡(LSF)、灵山香鸡(LSX)、凌云乌鸡(LYW)、东兰乌鸡(DLW)和六画山鸡(LHS)等广西地方品种的平均等位基因数(NA)、观察杂合度(Ho)、期望杂合度(He)、多态信息含量(PIC)、品种的杂交情况和群体间的遗传距离进行分析,构建了基于NJ和UPGMA的进化树。结果显示:广西9个地方品种的平均等位基因数为5.26～8.86;观察杂合度最高的是XY,而期望杂合度最高的是GXM;多态信息含量最高的是GXM,最低的是LHS。除了LHS的PIC小于0.5外,其它品种均高于0.5;品种归属分析显示,NDY、LSF、LSX和LHS 4个品种的归属比率都为100%;XY、GXM、LYW和SH。9个品种中SH、XY、LSX和DLW处于Hardy-Weinberg不平衡。群体进化树分析显示,龙胜凤鸡和六画山鸡是一个相对独立的类群,其余7个品种聚为一个较为复杂的大类群。结果表明,广西大部分地方鸡品种的保种效果较理想,保种方案可行,广西地方品种形成与品种所处的地理环境可能存在某种联系。

网箱养殖患病草鱼细菌分离鉴定与回复感染研究

利用常用细菌分离纯化方法从患病草鱼中分离出7株菌株,分别编号为Ⅰ～Ⅶ;对7株菌株的16SrRNA基因序列进行PCR扩增,均得到长约600bp的片段;将扩增结果进行测序,测序结果输入到美国国立生物技术信息中心(NCBI,http://www.ncbi.nlm.nih.gov/),用BLAST工具对序列进行同源性比对分析.结果表明:Ⅰ为沙雷氏菌,同源性达95%;II为腐生葡萄球菌,同源性达99%;III为荧光假单孢菌,同源性达97%;IV为产碱普罗威登斯菌,同源性达99%;V为嗜水气单孢菌,同源性达99%;VI为杀鲑气单孢菌,同源性达97%;VII为不动菌属,同源性达97%.将Ⅰ～Ⅶ号菌株回复感染健康草鱼,结果沙雷氏菌、腐生葡萄球菌、荧光假单孢菌、产碱普罗威登斯菌和嗜水气单孢菌对草鱼的危害较大,而杀鲑气单孢菌和不动菌属的感染症状不明显.