弓形体抗原纯化的初步研究

弓形体速殖子粗抗原、纯化抗原 F_1和F_2相比较,F_1活性高于F_2;F_1、粗抗原用于 ELISA 检测弓形体感染兔血清的阳性率分别为100%和87.8%:用于检测其他寄生虫病患者及献血员等,差异均不显著(P>0.05).

浙江省钉螺分布抽样调查

目的 了解浙江省钉螺及感染性钉螺分布 ,为制定血吸虫病防治计划提供科学依据。 方法 采用分层整群随机抽样法抽取调查点 ,5m系统抽样结合环境抽查 2框方法查螺 ,压碎法检查钉螺感染情况 ,设置假螺点考核查螺质量。 结果 在全省 5 5县 710 6个村中抽取 3 4县的 10 0村为调查点 ,在 2 1县的 3 2村中查出有螺条块 2 2 3个 ,15 72框有螺 ,有螺面积 73 3 0 0m2 。其中山丘型 18县 2 9村有螺 ,有螺面积 72 64 0m2 ,占总数的 99.1% ,与水网型比较差异具有显著性 (t =3 .0 4,P <0 .0 1) ;1,2层有螺面积 71680m2 ,占总数的 97.8% ,与 3层比较差异具有显著性 (t=3 .71,P <0 .0 1) ;沟和渠有螺面积占总数的 62 .6% ,显著高于田环境 (t =3 .0 2 ,P <0 .0 1)。解剖活螺 7892只 ,均阴性。推算全省有螺面积理论值为 13 61940m2 。 结论 估算浙江省当前有螺面积 15 0 0 0 0 0～ 2 0 0 0 0 0 0m2 ,主要分布在山丘地区近 4年内有螺村 ,以沟渠为主 ,但未查到感染性钉螺。

ELISA双单克隆抗体夹心法检测弓形虫循环抗原的实验研究

用酶联免疫吸附试验(ELISA)双单克隆抗体夹心法,检测人工感染弓形虫家兔血清循环抗原(CAg)的累积阳性频率。在潜伏期内,重、中度感染兔CAg阳性率分别为30.8及11.1％;急性期、亚急性期和慢性早期的阳性率,中度感染兔分别为86.1及76.7％,轻度感染兔分别为43.3及32％。中、轻度感染兔的CAg阳性率在急性期逐步上升,而在亚急性、慢性早期逐步下降。健康兔、血吸虫病及球虫病兔的血清试验,均阴性。本法检测CAg的效果高于其他3种双抗体法,提示有较高的特异性、敏感性和重现性,可诊断弓形虫急性或活动性感染。

肠道线虫病防治效果纵向观察

[目的 ]探索短期内有效控制钩虫、蛔虫及鞭虫等肠道线虫病流行和长期巩固其防治效果的措施。[方法 ]1986～ 1988年全民普查 ,对钩虫、蛔虫和鞭虫卵阳性者予以治疗。 1989～ 1992年重点人群治疗。 1993～2 0 0 0年不采取任何主动干预措施。[结果 ]阿苯达唑每年治疗两次 ,连续 3年 ,钩虫、蛔虫和鞭虫感染率分别降至 3 2 %、 37 3 %和 3 5 % ,达到短期内基本控制其流行的目的。采取重点人群治疗 ,钩虫感染率降至 0 5 %。1993～ 2 0 0 0年不采取任何主动干预措施 ,钩虫感染率降至 1%以下 ,感染度降至 10 /LPG以下 ,且持续 8年无回升 ,土壤中分离不到钩蚴。 [结论 ]钩虫。

伊维菌素驱治肠道线虫的临床观察

目的 观察伊维菌素驱治肠道线虫感染的效果及副作用。方法 用伊维菌素0.1、0.2、0.2和0.2mg/kg顿服分别治疗蛔虫、钩虫、鞭虫和蛲虫感染者,并与阳性对照药阿苯达唑400mg顿服进行比较。结果 随机双盲治疗,伊维菌素和阿苯达唑对蛔虫感染的虫卵阴转率均为100％(34/34),对钩虫感染的虫卵阴转率分别为17.6％(6/34)和76.5％(26/34),对鞭虫感染的虫卵阴转率分别为67.6％(23/34)和47.1％(16/34),对蛲虫感染的虫卵阴转率分别为58.8％(20/34)和100％(34/34)。服药后1～2d排虫达高峰。不良反应发生率低,血液学、肝肾功能和心电图检查无明显影响。结论 伊维菌素治疗鞭虫感染疗效优于阿苯达唑,治疗蛔虫感染疗效与阿苯达唑相同,治疗钩虫、蛲虫感染疗效不及阿苯达唑。

一种简易、快速检测弓形虫循环抗原的酶联免疫吸附试验

应用双抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法,检测人工感染弓形虫兔血清循环抗原(CAg)的结果:潜伏期内的阳性检出率为10％;急性期和亚急性期的阳性率为40％～100％;慢性早期为20％。检出弓形虫抗原量为0.63μg/ml。本法与血吸虫、肺吸虫、丝虫、钩虫、蛔虫及旋毛虫抗原试验,均呈阴性。上述结果表明,本法具有特异、敏感、简易、快速等特点,可作为急性弓形虫病的快速诊断方法。

钩蚴抗原收集和ELISA检测钩蚴抗体的研究

进行钩虫免疫学研究,需收集大量钩蚴制备抗原和建立检测钩蚴抗体的ELISA法。为此,我们于1990年1月对几种常用钩蚴培养方法作了对比,并对ELISA法的敏感性、特异性、稳定性和孵育时间等进行了研究。现将结果综合报告如下。

中枢神经系统弓形虫病的快速诊断方法的探讨

本文取ELISA检测弓形虫循环抗原（CAg）、特异性IgM及IgG抗体阳性者的脑脊液样本13例，作弓形虫的病原学对比检查，个别样本同时进行ELIB分析。结果，CAg与IgM双阳性2例、IgM阳性1例，采用涂片法查见弓形虫；CAg阳性2例、CAg与IgM双阳性1例，经接种分离而获得3株弓形虫；其余7例CAg阴性而IgM阳性或IgM与IgG双阳性的脑脊液样本，均卡检获病原体。1例CAg与病原学均为阳性的脑脊液样本，与弓形虫速落子代谢抗原同步进行ELIB，前者在50kD处出现明显的反应区带，后者分别在50、97和108kD处出现3条反应区带。从而表明，脑脊液中弓形虫CAg检出率与病原阳性率相符合，ELISA—CAg可作为中枢神经系统弓形虫病的快速诊断方法；而ELIB技术，对确定及区别弓形上现症患者，均具进一步探讨的价值。

弓形虫速殖子抗原组分分析及其免疫反应性的比较研究

应用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、酶联免疫印渍试验(ELIB)和酶联免疫吸附试验(ELISA),对四种不同地理株弓形虫-CN、RH、BH、HH速殖子细胞质、细胞膜和代谢抗原组分及株间抗原差异、免疫反应性进行比较研究。ELIB实验结果:RH株高免兔血清与四株细胞质抗原反应,分别出现10、7、4、6条显色的反应区带,其中在35～38kD处都出现极明显的反应区带;与四株细胞膜抗原反应,分别出现5、6、6、9条显色反应区带,其中在31～35kD处都出现极明显的反应区带;与四株代谢抗原反应,分别出现8、7、6、7条反应区带,其中在50kD处、100～108kD处都有明显反应区带。实验结果提示,高免兔血清与四株12种抗原反应结果所出现的区带存在不同程度差异。ELISA检测免疫比值(P/N)大小比较结果表明,无论是细胞质、细胞膜或代谢抗原,在检测人弓形虫抗体阳性血清时,HH、BH较CN、RH的免疫比值高,株间抗原免疫反应似存在一定差异。

弓形虫感染兔T淋巴细胞免疫反应的初步观察

近年来,众多的研究者认为,不能确定抗体滴度与抵抗弓形虫能力之间有任何关系,而证明在对弓形虫的免疫作用中,细胞免疫占有重要地位。本文应用淋巴细胞转化试验形态法,测定人工感染弓形虫兔外周血的淋转率,并与检测血清CAg进行同步试验,观察家兔感染弓形虫后不同临床期的细胞免疫反应变化。现将结果报告如下。 材料和方法 一、动物 新西兰纯种雌性兔19只,实验前经IHA及ELISA检测弓形虫抗体均为阴性。取14只为感染组,每兔腹腔接种弓形虫强毒株(CN)速殖子2万个,接种后分期采血。另5只兔为对照组,与感染兔同时采血。

双抗体ELISA检测人血清弓形虫循环抗原的初步研究

应用抗弓形虫抗体酶联免疫吸附试验夹心法(双抗体ELISA),检测不同人群血清循环抗原(CAg)。肉类加工人员、饮食服务人员的阳性率分别为9.3%(15/161)及3.9%(3/76),献血员未检出阳性者(0/72),肉类加工人员与献血员的CAg阳性率间差异非常显著(P<0.01),提示弓形虫感染与接触肉类食品似有密切关系。该法检测抗核抗体、类风湿因子、抗链球菌溶血素“O”等阳性者血清93份,均为阴性。方法的特异性试验的抑制率>70%;重现性试验的变异系数<10%。结果表明,该法具有较高的敏感性和特异性,认为可作为人体弓形虫急性感染的诊断方法。

感染弓形虫家兔血清循环抗原、免疫复合物及抗体消长规律的实验研究

本文应用酶联免疫吸附试验(ELISA)观察人工感染弓形虫家兔血清循环抗原(CAg)、免疫复合物(CIC)及抗体(CAb)的消长规律。发现在临床病程中,CAg消长情况与文献已证实的弓形虫的增殖消长情况相一致。对弓形虫活动性感染具有最好的诊断价值。感染兔临床各期的不同水平CAg、CIC及CAb构成的综合指标显示不同的免疫学特征,可用于弓形虫病临床分期。本文根据实验结果对血清学试验检测CAg、CIC及CAb的诊断价值及指标作了系统的评价。

伊维菌素治疗肠道线虫感染临床试验观察

目的 观察不同剂量、疗程的国产伊维菌素治疗肠道线虫感染的疗效及不良反应。 方法 以饱和盐水浮聚法筛选肠道线虫感染者,并观察伊维菌素疗效及不良反应。第 1 阶段对蛔虫、钩虫、鞭虫感染者分别以伊维菌素 0.1、0.15和0.2 mg/kg,蛲虫感染者 0.2 mg/kg顿服治疗,并与阿苯达唑 6.7 mg/kg(蛲虫感染者 13 mg/kg)顿服作疗效比较。第2阶段以伊维菌素0.3、0.4 mg/kg口服1 d或2 d治疗钩虫、鞭虫感染,并与阿苯达唑 6.7 mg/kg相同疗程作疗效比较。 结果 第1阶段:伊维菌素0.1、0.15、0.2 mg/kg顿服治疗蛔虫感染的治愈率均达 100%(44/44、8/8、8/8),与阿苯达唑疗效相同(100%)(34/34);治疗中度、重度钩虫感染者的治愈率分别为 12. 50% (2/16)、18. 75% (3/16)、17.39%(8/46),显著低于阿苯达唑治愈率76.47%(26/34)(P<0.01);治疗鞭虫感染者治愈率分别为 83.33%(10/12)、100%(12/12)和76.09%(35/46),显著高于阿苯达唑治愈率 47.06%(16/34)(P<0.01);0.2 mg/kg伊维菌素治疗蛲虫感染者治愈率为58.82%(20/34),低于阿苯达唑 13 mg/kg治愈率 100%(34/34)(P<0.01)。第 2 阶段:伊维菌素 0.3mg/kg口服1 d或2 d疗法对轻度钩虫感染者治愈率分别为85.29%(29/34)和79.41%(27/34),0.4 mg/kg口服1 d或2 d的治愈率分别为75.

ELISA阳性反应阈值的确定方法探讨

本文运用统计学原理探讨了分光光度法ELISA反应系统中阳性反应判断阈值的最佳确定方法。本文还就其原理、意义和实际应用等作了讨论。

酶联免疫吸附试验检测弓形虫抗体的有关因素及诊断价值研究

近年来,酶联免疫吸附试验(ELISA)广泛地应用于各种疾病的血清学诊断研究,并在技术上进行不断改进和完善。本文对ELISA检测弓形虫抗体的有关因素及诊断价值进行了探讨,现将结果报告如下。材料和方法1.弓形虫(CN株)速殖子可溶性抗原:系上海市农业科学院畜牧兽医研究所提供。2.羊抗兔IgG酶标记物(简称酶结合物):采用快速过碘酸钠标记法制备。

杭州地区ELISA人畜弓形虫抗体调查

1986～1987年,我们应用ELISA对杭州地区人群及几种动物进行弓形虫抗体检测,现将结果报告如下。一,材料和方法采用弓形虫速殖子(CN株)可溶性抗原(上海市农科院畜牧兽医研究所);本室以过碘酸钠法制备的马抗人、羊抗猪、羊抗兔及兔抗鼠的IgG-HRP结合物;参考血清分别以IHA检测抗体滴度≥1:1024的阳性血清及滴度在≤1:8的阴性参考血清混合。采用ELISA间接法,经棋盘滴定法测定抗原。

应用单克隆抗体-ELISA检测弓形体循环抗原及免疫复合物的有关因素

本文对 McAb-ELISA 检测弓形体 CAg 及 CIC 的有关因素进行了研究.结果表明:(1)用 McAb 包被液致敏反应板的效果,碳酸盐缓冲液(pH9.6)优于磷酸盐缓冲液(pH7.4).(2)纯化的 McAb 及 McAb-HRP 冷藏贮存,一年内对 FLISA 的检测效果无影响.但 McAb 致敏的反应板只能冷藏一个月.(3)McAb 致敏反应板时,置37℃温育2小时的检测效果似较冰箱过夜为优.(4)普通血清、灭活血清及滤纸血的 ELISA 结果,均无明显差别.(5)检测 CAg 的血清及酶结合的孵育方法可采用 ELISA一步法,而检测 CIC 则必须采用常规二步法.

单克隆抗体检测循环血吸虫抗原的实验研究

将血吸虫成虫多糖抗原的单克隆抗体应用于ELISA直接法检测血清中的循环抗原.重感染兔血清35份、中感染兔血清7份及低感染兔血清10份,阳性率分别为100%,57.1%及20%,健康兔血清25份,弓形虫感染兔血清10份,均未见阳性反应.重感染兔于感染后5周OD均值明显上升,是感染前的2.95倍,以后逐周上升.中感染兔5周后,OD均值开始上升,5周和6周时的OD均值是感染前的1.27倍和3.49倍.低感染兔OD均值一直维持较低水平,至9周时OD均值才是感染前的2.56倍.结果表明,血吸虫病兔血清中的循环抗原出现时间或阳性率均与血吸虫尾蚴的感染度密切相关.

浙江省猪弓形体病血清学调查

对浙江省14个县、市的猪弓形体病,采用ELISA进行血清学调查。共检测种猪1228头,阳性率为55.5％。其中,平原地区为63.5％,丘陵地区为51.6％,沿海岛屿为38.9％。有弓形体病流行史的猪场、一般屠宰猪、有弓形体病流行史的户养猪和无明显流行史地区户养猪的阳性率分别为84.5％、53.0％、65.0％和45.5％。

三种血清学方法检测弓形体抗体的比较

对IHA、IFA及ELISA三种方法检测弓形体抗体作了比较。感染兔血清首次检出抗体时间及阳性兔数:IHA为感染后第5天(1/15)、IFA为第6天(1/15)、ELISA为第4天(8/15);达全阳性时间分别为感染后第13、15及6天,GMT分别为4693、1301及8192。对照兔血清的假阳性率均为1.42％。三法检测猪血清的阳性率分别为42.0、41.0及44.0％。结果表明,三法均具有高度的敏感性和较高的特异性,其中以ELISA法最为灵敏,IHA法操作简便,两法均适用于现场血清学调查。