茎-环反转录实时PCR技术分析miR-93和miR-342在乳腺癌细胞系中的表达

目的:应用高灵敏度的特异性茎-环反转录实时PCR技术检测分析小的非编码分子miR-342和miR-93在乳腺癌细胞中的表达。方法:用miR特异性试剂盒(miRNeasy Mini Kit)提取了总RNA和miRNA,进行特异性茎-环反转录和实时PCR(stem-loop reverse transcription real-time PCR,stem-loop RT-qPCR),检测miR-342和miR-93在5种乳腺癌细胞中的表达,并进行比较分析。结果:用高灵敏度的特异性茎-环反转录实时PCR技术检测发现miR-93在T47D细胞系中呈非常高的表达,BT-549和MCF7细胞系中呈相对高表达,在MDA-MB-231和MDA-MB-435细胞系低表达;而miR-342在MCF7中呈非常高的表达,MDA-MB-231,BT-549和T47D中呈相对低表达,在MDA-MB-435中表达特别低。结论:miR-93和miR-342的表达在某种程度上与乳腺癌细胞高侵袭性呈一定负相关,表明miR-93和miR-342可能是乳腺癌的抑癌基因并可能具有抑制其转移的作用,为深入分析miR-93和miR-342抑制乳腺癌转移的作用机制奠定了基础。

非编码小RNA分子miR-34a在乳腺癌细胞系中的表达及意义

目的:比较各种不同类型的乳腺癌细胞系miR-34a的表达,探索作为抑癌基因的miR-34a在抑制肿瘤转移中的临床意义。方法:用micro RNA特异性试剂盒提取总RNA,应用特异性茎-环反转录实时PCR技术检测miR-34a在各种乳腺癌细胞中的表达,并进行比较分析。结果:提取的RNA质量完好,miR-34a在所检测的高侵袭性乳腺癌细胞MDA-MB-231,MDA-MB-435和BT-549中呈低表达;而在低侵袭性细胞MCF7和T47D中呈相对高表达。结论:建立了特异性茎-环反转录实时PCR检测非编码小RNA分子技术;miR-34a的表达与肿瘤细胞高侵袭性可能呈负相关,提示miR-34a作为抑癌基因可能在抑制肿瘤转移中起重要作用,在乳腺癌诊断、预防和治疗中具有重要的潜在价值。