靶向核抗原的嵌合抗原受体T细胞构建及其分泌IFN-γ功能验证

目的构建靶向实体瘤微环境嵌合抗原受体T细胞(CAR-T细胞),诱导微环境中IFN-γ的表达,以达到抗肿瘤的目的。方法筛选核抗原特异性单克隆抗体,通过基因工程技术构建嵌合抗原受体(CAR);将CAR亚克隆到慢病毒载体后转染HEK293细胞,包装成表达CAR的慢病毒,转导HEK293F细胞后,以流式细胞术检测CAR表达细胞比例判断转导效率;将CAR表达慢病毒转导活化T细胞后形成CAR-T细胞,采用流式细胞术检测在不同抗原(核小体抗原、Brefeldin A、二者联合)诱导下或核小体抗原单独诱导0、2、48 h时CAR-T细胞分泌IFN-γ情况。结果在培养10~15 d时,表达CAR的HEK293F细胞比例达53.04%~87.17%。在核小体抗原、Brefeldin A、二者联合组诱导下,分泌IFN-γ的T细胞比例分别为0.028%、0.034%、3.570%;核小体抗原诱导0、48 h时检测不到分泌IFN-γ的CAR-T细胞,2 h时分泌IFN-γ的CAR-T细胞最多。结论成功构建靶向核抗原的CAR-T细胞,且该细胞具有IFN-γ分泌功能。

我国干细胞抗衰老行业市场探析

随着生物技术日新月异的发展,干细胞抗衰老行业市场新产品新服务层出不穷并表现出强大的发展潜力。本文将通过数据分析及文献查询,从目前我国“干细胞抗衰老”技术的发展现状,来分析探讨其未来的市场发展前景,并对干细胞抗衰老行业提出相应的营销策略建议。

替诺福韦联合拉米夫定治疗HIV与HBV合并感染的Meta分析

目的系统评价替诺福韦联合拉米夫定治疗艾滋病病毒（HIV）与乙型肝炎病毒（HBV）合并感染的有效性和安全性。方法计算机检索Elsevier、PubMed、中国知网（CNKI）、维普中文期刊服务平台、万方数据医药信息镜像系统,从建库至2017年7月公开发表的替诺福韦联合拉米夫定治疗HIV与HBV合并感染的随机临床对照试验。由3位研究者独立筛选评价文献并提取资料,统一后采用RevMan5.3系统评价软件对待评价研究进行统计分析。结果最终共纳入7篇文献,552例患者。替诺福韦联合拉米夫定相对于拉米夫定单独用药在HBV的脱氧核糖核酸（HBV-DNA）转阴率显著提高[24周：危险比（RR）=1.80,95%可信区间（CI）：1.392.35,P〈0.000 1;48周：RR=1.60,95%CI：1.311.94,P〈0.000 01],HBV-DNA载量显著降低[24周：权重均数差（WMD）=-1.46,95%CI：-1.71-1.21,P〈0.000 01;48周：WMD=-1.35,95%CI：-1.55-1.16,P〈0.000 01],丙氨酸转氨酶（ALT）复常率显著提高（24周：RR=1.37,95%CI：1.121.67,P=0.002;48周：RR=1.36,95%CI：1.161.60,P=0.000 1）,HIV的核糖核酸（HIV-RNA）转阴率显著提高（48周：RR=1.24,95%CI：1.041.49,P=0.02）,差异均具有统计学意义。安全性方面,多为无不良反应发生。结论替诺福韦联合拉米夫定治疗HIV与HBV合并感染更为有效,安全性良好。

UHPLC-MS/MS法考察FGF21-164融合蛋白在小鼠体内的药代动力学

FGF21-164是通过对内源性FGF21多肽的结构修饰、偶联得到的融合蛋白,拟用于治疗肥胖引起的糖脂代谢紊乱。本文通过Skyline软件预测得到该蛋白经胰蛋白酶酶解后的候选肽段质谱信息,采用高分辨质谱法验证预测的候选肽段。通过优化超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)法分析条件,选择具有最佳质谱响应的FGF21-164特征替代肽段(YLYTDDAQQTEAHLEIR)。血清样品经磷酸缓冲液稀释后, 60℃变性并烷基化,在37℃下与胰蛋白酶孵育2 h直接酶解产生替代肽段,该肽段在质谱ESI正离子模式检测下,产生特征离子对,即三电荷的母离子m/z 689.3和单电荷的子离子m/z 738.4。色谱分离使用含0.1%甲酸的水溶液(A相)和0.1%甲酸的乙腈溶液(B相),在EclipsePlus C18柱(2.1 mm×50 mm, 1.8μm)上进行,以多反应监测模式对上述离子对监测,以外标法定量分析小鼠血清中FGF21-164融合蛋白的浓度。该方法在2.50~500μg·mL^(-1)内呈良好的线性关系(r=0.998 8),定量下限为2.50μg·mL^(-1)。该方法成功应用于FGF21-164融合蛋白在小鼠体内的药代动力学研究。动物实验经中国科学院上海药物研究所实验动物伦理委员会(批号:20180004040450)批准。药动学实验结果表明,相比于内源性FGF21, FGF21-164融合蛋白在小鼠体内的t1/2由0.5 h延长至2.6 h,有望延长该蛋白的疗效。

中国妇女孕期及哺乳期暴露前预防人类免疫缺陷病毒感染的成本-效果分析

目的评价中国妇女孕期及哺乳期暴露前预防(Pr EP)人类免疫缺陷病毒(HIV/AIDS)感染的成本-效果。方法构建决策树模型,采用模型分析软件Treeage Pro 2011进行药物经济学分析,对Pr EP的有效性进行成本-效果分析。结果进行HIV暴露前预防技术方法与未口服Pr EP方法人均成本分别为14 893.76元和8206.11元,其产出分别为0.096DALY和0.039DALY。因此,增量成本效果比值为117 327.37元/DALY,即避免一个DALY需要花费117 327.37元。该结果小于3倍2016年中国人均国内生产总值(GDP)166 236元,因此口服Pr EP药物相较之下为相对优势方案。结论建议政府将孕期妇女Pr EP方案列为艾滋病防控工作中的可推广方案,具备相对卫生经济性。