槐角黄酮调控miR-199a-3p/p38MAPK/NF-κB对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌的影响

目的 探讨槐角黄酮对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症因子分泌的影响。方法 将乳腺癌细胞BT549分为正常对照(NC)组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、miR-NC组、miR-199a-3p组、高剂量+anti-miR-NC组、高剂量+anti-miR-199a-3p组。采用CCK-8、克隆形成实验评估细胞增殖;采用Transwell法评估细胞迁移和侵袭。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-199a-3p表达。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测细胞培养液上清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)以及白细胞介素-1β(IL-1β)水平。采用蛋白免疫印迹(Western blot)检测p-p38MAPK和p-p65蛋白表达。结果 与NC组比较,低、中、高剂量组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数降低,miR-199a-3p表达升高,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与miR-NC组比较,miR-199a-3p组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数降低,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与高剂量+anti-miR-NC组比较,高剂量+anti-miR-199a-3p组BT549细胞活力、克隆形成数、迁移数、侵袭数升高,细胞培养液上清中TNF-α、IL-6以及IL-1β水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与NC组比较,高剂量组BT549细胞p-p38MAPK和p-p65蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与高剂量+anti-miR-NC组比较,高剂量+anti-miR-199a-3p组BT549细胞p-p38MAPK和p-p65蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 槐角黄酮可抑制乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和炎症反应,其机制可能是通过上调miR-199a-3p表达、抑制p38MAPK/NF-κB通路实现的。

基于TCGA数据库分析乳腺癌组织RBP7 mRNA表达与肿瘤免疫细胞浸润及预后的相关性

目的通过生物信息学的方法探讨视黄醇结合蛋白7(retinol binding protein 7,RBP7)在乳腺癌中的作用。方法使用R语言基于癌症基因组图谱(the cancer genome atlas,TCGA)数据库和人类蛋白质图谱(the human protein atlas,HPA)数据库探索基因RBP7在乳腺癌组织中的差异表达。通过Kaplan-Meier生存分析和受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线,评估RBP7与乳腺癌临床数据的关系。基于TCGA数据库分析RBP7高低表达分组与不同肿瘤浸润免疫细胞(tumor-infiltrating immune cells,TIICs)的相关性。基因组富集分析(gene set enrichment analysis,GSEA)评估RBP7在与表型相关度排序的基因表中的分布趋势。结果与癌旁组织相比,乳腺癌中RBP7 mRNA表达水平下调,该分子表达在细胞核中。ROC曲线分析显示RBP7诊断乳腺癌的曲线下面积(area under curve,AUC)是0.943(95%CI:0.926~0.960),RBP7的最佳截断值是6.29,敏感度和特异度分别为82.32%,93.69%。Kaplan-Meier生存分析显示RBP7低表达与乳腺癌患者的总生存率相关(HR=0.68,95%CI:0.49~0.93,P=0.017),RBP7是乳腺癌发生的独立危险因素。Spearman相关性揭示RBP7与乳腺癌中pDC细胞和NK细胞呈正相关(r=0.290,0.253,均P<0.05),与Th2细胞呈负相关(r=-0.217,P<0.05)。GSEA表明RBP7富集在脂肪生成、核糖体、肽配体结合受体、钙信号途径等通路中(均P<0.001)。结论RBP7影响乳腺癌的发生发展,可能成为乳腺癌潜在生物标志物和治疗靶点。

术前纤维蛋白原与淋巴细胞比值在胃癌神经侵犯预测价值研究

目的探索术前纤维蛋白原与淋巴细胞比值(fibrinogen lymphocyte ratio,FLR)在胃癌神经侵犯(perineural invasion,PNI)中的临床意义。方法收集2020年10月~2022年2月在江苏省肿瘤医院接受手术切除且经病理学检查证实为胃癌并符合入组的患者360例,同时收集临床病理资料。受试者工作曲线(ROC)确定术前FLR判断胃癌神经侵犯发生的最佳截断值。采用二分类Logistic回归进行单因素和多因素分析,确定与神经侵犯发生相关的危险因素。结果神经侵犯阳性患者的FLR水平(2.37±1.31)明显高于神经侵犯阴性组的FLR水平(1.87±0.90),差异有统计学意义(t=4.184,P<0.05);同时神经侵犯阳性组患者的恶性程度(肿瘤浸润程度,淋巴结转移,TNM分期)更显著,差异有统计学意义(t=162.110,70.530,142.910,均P<0.05)。ROC曲线分析,FLR曲线下面积为0.650(95%CI:0.592~0.707),最佳截断值为1.82,灵敏度和特异度分别为64.4%,62.4%。Logistic多因素分析显示FLR>1.82(OR=2.155,95%CI:1.086~4.277,P=0.028),肿瘤浸润程度(OR=6.405,95%CI:2.040~20.107,P=0.001),II期(OR=7.002,95%CI:1.614~30.374,P=0.009)和Ⅲ期(OR=10.718,95%CI:1.809~63.498,P=0.009)是胃癌患者发生神经侵犯的独立危险因素。在淋巴结发生转移组中,多因素分析显示,FLR>1.82(OR=2.311,95%CI:1.074~4.974,P=0.032)和肿瘤浸润程度(OR=12.401,95%CI:4.549~33.806,P<0.001)是患者发生神经侵犯的独立危险因素。结论术前监测FLR水平对预测胃癌患者发生神经侵犯有一定参考价值。

EGFR突变对非小细胞肺癌预后的影响

目的探讨EGFR基因突变对非小细胞肺癌(NSCLC)患者临床特征,预后的价值,揭示总生存期(OS)≥3年的生存特点。方法回顾性分析2013年1月1日至2018年6月30日南京医科大学附属肿瘤医院接受个体化治疗的349例NSCLC患者临床资料。对应收集石蜡包埋组织标本,采用HRM法,检测组织中EGFR基因第18、19、20、21外显子的突变状态,分析EGFR基因突变与患者临床病理参数的相关性。Kaplan-Meier方法和χ2分析随访资料完整的249例患者EGFR基因突变对生存的影响,揭示OS≥3年生存影响因素。结果在349例NSCLC肺癌患者中,EGFR基因突变率为50.4%,EGFR基因主要高突变人群是女性(62.2%)和腺癌患者(52.0%),<60岁易发生19突变(28.9%),≥60岁(32.0%)和女性(37.8%)易发生21突变,差异具有统计学意义(P<0.05)。EGFR18、20、双突变和临床特征之间无统计学意义(P>0.05)。截至2018年12月15日,249例随访完整的患者中,中位生存时间为23个月。EGFR基因的总突变和21突变,与野生型相比较,能显著提高无进展生存期(PFS)和OS,差异具有统计学意义(P<0.05)。EGFR18、19、20、双突变的PFS生存率,与野生型相比较,差异不具有统计学意义(P>0.05)。OS≥3年和OS≤1年的患者在性别、TNM分期、淋巴结转移、EGFR总突变率、21的突变率及靶向治疗率方面差异有统计学意义(P<0.05)。结论EGFR基因的总突变和21突变的患者均能明显延长生存期。

术前血液学炎症指标对胃癌脉管癌栓的预测价值

目的探讨在胃癌合并脉管癌栓的预测中,术前血液炎症指标的价值。方法以2020年10月至2022年7月在江苏省肿瘤医院接受手术切除且均经病理学检查证实为胃癌的341例患者为对象进行回顾性研究。按术后病理有无脉管癌栓分为脉管癌栓阳性组(n=163)和脉管癌栓阴性组(n=178)。收集患者术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR),血小板与淋巴细胞比值(PLR),淋巴细胞与单核细胞比值(LMR),纤维蛋白原与淋巴细胞比值(FLR)及常用肿瘤标志物水平和临床资料,采用受试者工作特征曲线(ROC)评价NLR、PLR、FLR对脉管癌栓形成的预测能力并寻找最佳截断值,logistic回归行单因素分析胃癌患者脉管癌栓形成的影响因素,同时构建logistic回归胃癌脉管癌栓预测模型。结果与脉管癌栓阴性患者相比,阳性患者的NLR、PLR、FLR以及糖类抗原(CA)19-9水平显著增高,同时肿瘤浸润程度增加、淋巴结转移率更高(P<0.05)。ROC曲线分析:NLR、PLR和FLR的最佳截断值分别为1.68、115.29和1.96。胃癌患者发生脉管癌栓的logistic预测模型:Logit(P)=-2.117+0.890×X1+0.286×X2+0.917×X3(X1=PLR,X2=cT,X3=淋巴结转移);模型拟合度较好(χ^(2)=58.405,P<0.01),预报正确率为67.26%;AUC=0.733(95%CI:0.680~0.786,P<0.01);该模型分析显示,PLR>115.29(OR=2.436,95%CI:1.386~4.282,P=0.002)、cT分期(OR=1.331,95%CI:1.013~1.749,P=0.030)和发生淋巴结转移(OR=2.503,95%CI:1.507~4.156,P<0.01)是预测胃癌患者发生脉管癌栓的独立危险因素。结论术前监测PLR水平对评估胃癌患者发生脉管癌栓有一定预测价值,可以作为判断癌栓形成的辅助手段。