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土贝母苷乙通过诱导铁自噬抑制非小细胞肺癌细胞增殖
1
作者
杨翘伊
张春云
+6 位作者
孙硕
李文敏
黄鑫
梁艳
张伟伟
李怀永
杨清竹
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期1834-1843,共10页
目的:探讨土贝母苷乙(tubeimosideⅡ,TBMSⅡ)诱导非小细胞肺癌细胞铁死亡的作用及潜在的分子机制。方法:体外培养非小细胞肺癌细胞H460,MTT法检测不同TBMSⅡ剂量处理的H460细胞的存活率,根据药物对细胞的抑制率的计算结果,选择细胞存活...
目的:探讨土贝母苷乙(tubeimosideⅡ,TBMSⅡ)诱导非小细胞肺癌细胞铁死亡的作用及潜在的分子机制。方法:体外培养非小细胞肺癌细胞H460,MTT法检测不同TBMSⅡ剂量处理的H460细胞的存活率,根据药物对细胞的抑制率的计算结果,选择细胞存活率50%的TBMSⅡ剂量为参照进行后续实验;Transwell实验检测细胞的迁移能力,克隆形成实验检测TBMSⅡ对H460细胞增殖的影响。流式细胞仪及荧光显微镜检测H460细胞中脂质活性氧(lipid reactive oxygen species,lipid ROS)水平的变化;试剂盒检测细胞中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、总抗氧能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)和Fe2+水平;Western blot法检测细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 membrane 11,SLC7A11)、铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)、核受体辅激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)、自噬蛋白P62和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达;透射电镜检测细胞中线粒体结构的变化;免疫荧光实验检测细胞中LC3分别与FTH1和NCOA4的共定位,同时检测LC3和NCOA4与溶酶体的共定位。结果:与对照组比较,随着TBMSⅡ药物浓度增大,H460细胞的存活率、迁移能力以及克隆形成数量逐渐降低且细胞内部出现空泡;H460细胞中加入TBMSⅡ作用后,细胞中GSH和T-AOC水平降低而MDA水平升高,并且细胞中抗氧化蛋白SLC7A11和GPX4蛋白表达下降;H460细胞中的lipid ROS水平以及Fe2+随着TBMSⅡ浓度的升高而升高,而TBMSⅡ诱导的细胞死亡能够被铁死亡抑制剂Fer-1所逆转;自噬标志蛋白LC3Ⅱ/LC3 I和P62的水平随着TBMSⅡ浓度的增加而升高,且TBMSⅡ对H460细胞的线粒体形态产生影响,并且随着TBMSⅡ浓度的增加细胞中线粒体荧光强度降低;H460细胞中NCOA4蛋白的表达随着TBMSⅡ浓度增加而增加,但FTH1蛋白表达则随着TBMSⅡ浓度的增加而降低;细胞中LC3Ⅱ/FTH1以及LC3Ⅱ/NCOA4的结合能力随着TBMSⅡ浓度的增加而增强;随着TBMSⅡ浓度的增加细胞中LC3Ⅱ以及FTH1与溶酶体结合能力增强。结论:TBMSⅡ通过诱导铁自噬抑制非小细胞肺癌的增殖。
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关键词
土贝母苷乙
非小细胞肺癌
核受体辅激活因子4
铁自噬
铁死亡
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职称材料
题名
土贝母苷乙通过诱导铁自噬抑制非小细胞肺癌细胞增殖
1
作者
杨翘伊
张春云
孙硕
李文敏
黄鑫
梁艳
张伟伟
李怀永
杨清竹
机构
齐齐哈尔大学生命科学与农林学院
抗性基因工程与寒地生物多样性保护黑龙江省重点实验室
齐齐哈尔市第一医院放疗科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第10期1834-1843,共10页
基金
黑龙江省自然科学基金(联合引导项目)(No.LH2023H104)
黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目(No.135509222)
2023年齐齐哈尔大学研究生创新科研项目(No.QUZLYS_CX2023010)。
文摘
目的:探讨土贝母苷乙(tubeimosideⅡ,TBMSⅡ)诱导非小细胞肺癌细胞铁死亡的作用及潜在的分子机制。方法:体外培养非小细胞肺癌细胞H460,MTT法检测不同TBMSⅡ剂量处理的H460细胞的存活率,根据药物对细胞的抑制率的计算结果,选择细胞存活率50%的TBMSⅡ剂量为参照进行后续实验;Transwell实验检测细胞的迁移能力,克隆形成实验检测TBMSⅡ对H460细胞增殖的影响。流式细胞仪及荧光显微镜检测H460细胞中脂质活性氧(lipid reactive oxygen species,lipid ROS)水平的变化;试剂盒检测细胞中谷胱甘肽(glutathione,GSH)、总抗氧能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)和Fe2+水平;Western blot法检测细胞中谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 membrane 11,SLC7A11)、铁蛋白重链1(ferritin heavy chain 1,FTH1)、核受体辅激活因子4(nuclear receptor coactivator 4,NCOA4)、自噬蛋白P62和微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)的表达;透射电镜检测细胞中线粒体结构的变化;免疫荧光实验检测细胞中LC3分别与FTH1和NCOA4的共定位,同时检测LC3和NCOA4与溶酶体的共定位。结果:与对照组比较,随着TBMSⅡ药物浓度增大,H460细胞的存活率、迁移能力以及克隆形成数量逐渐降低且细胞内部出现空泡;H460细胞中加入TBMSⅡ作用后,细胞中GSH和T-AOC水平降低而MDA水平升高,并且细胞中抗氧化蛋白SLC7A11和GPX4蛋白表达下降;H460细胞中的lipid ROS水平以及Fe2+随着TBMSⅡ浓度的升高而升高,而TBMSⅡ诱导的细胞死亡能够被铁死亡抑制剂Fer-1所逆转;自噬标志蛋白LC3Ⅱ/LC3 I和P62的水平随着TBMSⅡ浓度的增加而升高,且TBMSⅡ对H460细胞的线粒体形态产生影响,并且随着TBMSⅡ浓度的增加细胞中线粒体荧光强度降低;H460细胞中NCOA4蛋白的表达随着TBMSⅡ浓度增加而增加,但FTH1蛋白表达则随着TBMSⅡ浓度的增加而降低;细胞中LC3Ⅱ/FTH1以及LC3Ⅱ/NCOA4的结合能力随着TBMSⅡ浓度的增加而增强;随着TBMSⅡ浓度的增加细胞中LC3Ⅱ以及FTH1与溶酶体结合能力增强。结论:TBMSⅡ通过诱导铁自噬抑制非小细胞肺癌的增殖。
关键词
土贝母苷乙
非小细胞肺癌
核受体辅激活因子4
铁自噬
铁死亡
Keywords
tubemoside II
non-small-cell lung cancer
nuclear receptor coactivator 4
ferritinophagy
ferroptosis
分类号
R363.2 [医药卫生—病理学]
R285 [医药卫生—中药学]
R730.23 [医药卫生—肿瘤]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
土贝母苷乙通过诱导铁自噬抑制非小细胞肺癌细胞增殖
杨翘伊
张春云
孙硕
李文敏
黄鑫
梁艳
张伟伟
李怀永
杨清竹
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2024
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