肝癌SMMC7721细胞株P27RF-Rho mRNA基因沉默对5-Fu药物敏感性的影响

目的:探讨肝癌SMMC7721细胞株P27RF-Rho mRNA基因沉默对5-氟脲嘧啶(5-Fu)药物敏感性的影响,为临床晚期肝癌治疗提供理论依据。方法:构建P27RF-Rho RNAi载体,P27RF-Rho基因沉默慢病毒感染SMMC7721肝癌细胞,Western blotting法检测基因沉默效果。SMMC7721细胞分为Scramble-siRNA阴性对照组、5-Fu组、P27RF-Rho-siRNA组和P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组。荧光显微镜检测细胞转染效果,Western blottting法检测RNAi基因沉默效率,MTT法检测各组细胞生长曲线,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室检测细胞侵袭能力,Western blotting法检测各组细胞中肿瘤相关蛋白P27及RhoC表达。结果:成功构建P27RF-Rho RNAi慢病毒载体。Western blotting法,P27RF-Rho-siRNA组细胞中P27RF-Rho蛋白表达水平明显低于5-Fu组和Scramble-siRNA组(P<0.05)。与其他3组比较,P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组细胞生长速度降低(P<0.05);划痕实验中P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组细胞迁移能力明显减低(P<0.01);P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组穿过Transwell小室微孔滤膜的平均细胞数明显少于其他3组(P<0.01);Western blotting法检测,P27RF-Rho-siRNA+5-Fu组细胞中癌相关蛋白P27表达水平明显高于其他3组(P<0.05),侵袭相关蛋白RhoC表达水平低于其他3组(P<0.05)。结论:P27RF-Rho基因沉默能明显增强5-Fu对肝癌SMMC7721细胞的药物敏感性。

慢病毒介导靶向P27RF-Rho基因沉默对肝癌细胞侵袭性的影响

目的:探讨慢病毒靶向介导技术沉默P27RF-Rho基因,阐述其对肝癌细胞侵袭性的影响。方法:构建P27RF-Rho RNAi慢病毒。慢病毒感染肝癌细胞BEL7402。实验分为P27RF-Rho-siRNA实验组、Scramble-siRNA阴性对照组和BEL7402空白对照组。Western bloting法检测P27RF-Rho基因沉默效果及肝癌相关蛋白RhoA、RhoC、VEGF、P53和PTEN表达水平;明胶酶谱分析肿瘤侵袭相关基质金属蛋白酶(MMPs)活性;细胞划痕和体外Transwell小室侵袭实验比对细胞迁移和侵袭能力的改变。结果:Western blotting法检测,P27RF-Rho-siRNA实验组BEL7402中P27RF-Rho、RhoA、RhoC和VEGF蛋白表达水平明显低于2个对照组(P<0.05),P53和PTEN表达水平高于2个对照组(P<0.05)。明胶酶谱,P27RF-Rho-siRNA实验组MMPs活性明显降低(P<0.01)。划痕实验,P27RF-Rho-siRNA实验组细胞迁移距离明显低于2个对照组(P<0.01)。实验组穿过Transwell小室的平均细胞数明显少于2个对照组(P<0.01)。结论:沉默P27RF-Rho基因可以降低肝癌细胞BEL7402的侵袭和迁移能力。

高效液相色谱法测定保健食品中阿替匹林C的含量

目的建立高效液相色谱法测定保健食品中阿替匹林C的方法。方法保健食品直接用甲醇超声提取,加水稀释,采用Agilent ZORBAX SB-Aq色谱柱分离,甲醇:1%乙酸水溶液作流动相,紫外检测器310 nm波长检测,外标法定量。结果阿替匹林C在0.80~40.0μg/mL浓度范围内线性良好,相关系数为0.9999,方法回收率为99.2%~102.2%,相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)为1.1%,检出限(limit of detection,LOD)为0.018 mg/100 g。结论该方法快速、准确、灵敏,适合保健食品中阿替匹林C的测定。

藏红T共振瑞利散射光谱法测定保健食品中的透明质酸钠

建立藏红T共振瑞利散射光谱法测定保健食品中透明质酸钠的含量。在p H 5.00的Britton–Robinson缓冲介质中,藏红T与透明质酸钠反应形成化合物,使溶液共振瑞利散射急剧增强并产生相应的散射光谱,其最大散射峰位于335 nm,5.0×10^(–4) mol/L藏红T溶液用量为0.70 m L,反应时间为15 min。透明质酸钠的质量浓度在0.06~3.0mg/L范围内与共振瑞利散射增强程度成良好的线性关系,线性相关系数为0.999 2。方法检出限为19.8μg/L,测定结果的相对标准偏差为3.36%~4.52%(n=6),加标回收率为92.4%~103.0%。该方法灵敏度高、选择性好、操作简便,适用于保健食品中透明质酸钠的测定。

小议“体育课选修性项目教学与中学生的个性发展”

随着课程改革的深入，教师更加重视学生在教学过程中的主体作用和参与性能力，以培养学生综合素质能力，提高学生的创造性和学生个性健康的发展水平。在中学阶段的体育课教学过程中，仅注重发展身体素质，已经不能满足中学生的生理需要和心理需要。只有学生感兴趣，喜欢，心理上需要才能使个性得到发展。因此，学校的体育教研组应根据《体育与健康》课程标准的思想，在全校开展体育课选修性项目的参与式教学，为学生创造宜人的教育环境。在体育锻炼中他们会有意识和无意识地表现自我个性发展的能力，满足学生的精神发展，对学生的个性健康发展和终身体育锻炼意识的形成起到积极的促进作用。

加速康复外科在腹腔镜腹膜前补片置入术围手术期的应用及疗效观察

目的:分析加速康复外科(ERAS)在腹腔镜经腹腹膜前补片置入术(TAPP)的临床效果。方法:选取择期行TAPP手术的120例患者,随机分为ERAS及对照组各60例。对照组采用常规围手术期处理,采用加速康复外科围手术期处理。观察两组患者术后并发症的发生率、术后下床时间、住院时间、住院费用等指标。结果:ERAS与对照组相比,术后恢复饮食时间缩短,下床活动时间提前,住院天数缩短,住院费用减少,差异均有统计学意义(P <0. 05)。ERAS组与对照组比较,切口感染发生率、肺部感染发生率、恶心呕吐发生率、术后尿潴留发生率及总并发症发生率均有减少,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论:加速康复外科在TAPP患者围手术期的应用有良好的效果。

尿中马尿酸的高效液相色谱测定法及其不确定度评定

目的对WS/T 53-1996《尿中马尿酸、甲基马尿酸的高效液相色谱测定方法》中马尿酸的测定方法进行改进,分析并建立高效液相色谱法测定尿中马尿酸含量不确定度的评定方法及其影响因素。方法采用直接稀释法测定马尿酸,分析其测定不确定度的主要来源,对各不确定度分量进行分析、量化和合成,得出测量结果的扩展不确定度。结果当尿中马尿酸的浓度为201 mg/L,其扩展不确定度为±5.60 mg/L。结论改进后的方法操作简单,有效可行,影响检测结果不确定度的主要因素为标准溶液配制和标准曲线拟合。