间充质干细胞在肾脏疾病治疗中的应用进展

间充质干细胞可以通过旁分泌各种细胞因子减轻炎性反应和恢复肾脏损伤,以及通过调控免疫细胞维持免疫稳态。临床前研究表明,间充质干细胞对急性肾损伤、糖尿病肾病、狼疮性肾炎及各种肾小球疾病动物模型均有明显的治疗效果。临床研究中也证明了间充质干细胞治疗人类肾病是安全、有效的。间充质干细胞疗法揭开了肾脏疾病领域新的生物治疗模式。

人羊水间充质干细胞对膜性肾病大鼠的治疗作用

目的研究人羊水间充质干细胞(AF-MSC)对膜性肾病大鼠的治疗作用。方法24只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组(Control组)、模型组(Model组)和AF-MSC治疗组(AF-MSC组),每组8只。在模型组和AF-MSC组注射羊抗大鼠Fx1A抗体构建膜性肾病大鼠模型。造模成功后连续4周尾静脉注射AF-MSC;每周检测大鼠尿蛋白/肌酐比值(UPCR);治疗结束后,腹主动脉取血检测血清肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)、白蛋白(Alb)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC);肾脏组织切片经马松(Masson)和过碘酸-六胺银(PASM)染色,光镜下观察病理变化;透射电镜观察足细胞和基底膜结构变化;免疫荧光测定各组肾脏组织中IgG、膜攻击复合物C5b-9表达。免疫组织化学观测足细胞nephrin、podocin表达。结果与模型组相比,AF-MSC治疗组UPCR在第4周时显著下降(P<0.01)。血清白蛋白升高和胆固醇下降(均P<0.05);病理结果显示肾小球基底膜免疫复合物沉积减少,基底膜增厚程度减少,足细胞形态相对完好;免疫荧光结果显示IgG和C5b-9沉积减弱;免疫组化结果显示AF-MSC组足细胞中nephrin及podocin蛋白表达增强(P<0.01)。结论AF-MSC可以明显改善膜性肾病大鼠的肾脏损伤。

线性多肽α3127-148诱导抗肾小球基底膜肾炎大鼠模型的建立

目的以人Ⅳ型胶原α3链非胶原区结构域1[α3(Ⅳ)NC1]上的线性多肽α3127-148作为抗原,建立抗肾小球基底膜(GBM)肾炎大鼠模型。方法7~8周龄雌性WKY大鼠30只,体重100~150 g,随机分为3组(10只/组):对照组、低剂量多肽免疫组(低剂量组)、高剂量多肽免疫组(高剂量组)。多肽α3127-148一次性注射于大鼠后足垫来进行建模,低剂量组注射200μg/kg、高剂量组注射300μg/kg、对照组仅注射等体积溶剂。每周定时收集24 h尿测尿蛋白浓度。所有动物在第6周末处死,检测血清肌酐和尿素氮。大鼠肾组织切片进行PAS染色、Masson染色及免疫荧光染色。结果与对照组相比,高剂量组24 h尿蛋白浓度自第3周末开始明显升高(P<0.05),第6周末血清尿素氮和肌酐水平均明显升高(P<0.05),PAS染色可见肾小球硬化、弥漫性新月体形成,荧光染色可见IgG在GBM呈明显线性沉积。与对照组比较,低剂量组第6周末24 h尿蛋白浓度明显升高(P<0.05),PAS染色亦见肾小球有明显损伤,但较高剂量组轻。结论本研究采用线性多肽α3127-148免疫WKY大鼠,成功地建立了抗GBM肾炎模型,该方法简单、效率高。