长时间血清饥饿胁迫对猪骨骼肌卫星细胞代谢和自噬的影响

为了探究长时间、不同程度饥饿胁迫条件对原代猪骨骼肌卫星细胞(SMSCs)代谢和自噬的影响,本试验通过控制SMSCs培养体系中血清浓度以形成不同程度饥饿胁迫,其中20%血清培养浓度为正常对照组,15%、10%、5%和0%血清培养浓度为试验组。细胞培养96 h后,通过流式细胞术检测各组细胞凋亡率、线粒体膜电位和活性氧(ROS)水平,通过ATP检测试剂盒测定细胞内ATP水平,通过Western blot检测各组细胞蛋白中自噬标志蛋白LC3b、p62以及AMPK-mTOR自噬信号通路中p-AMPK/AMPK和p-mTOR/mTOR蛋白的表达。结果显示,与20%血清组相比,0%血清和5%血清细胞凋亡率极显著上调(P<0.01),10%血清组细胞凋亡率显著上调(P<0.05);各试验组线粒体膜电位均极显著下降(P<0.01),ROS水平和ATP水平均极显著上调(P<0.01);细胞中LC3b蛋白的相对表达量随血清浓度降低而升高,p62蛋白的相对表达量随血清浓度降低而降低;p-mTOR/mTOR比值随血清浓度降低而降低,p-AMPK/AMPK比值随血清浓度降低而升高。结果表明,通过长期减少SMSCs培养体系中血清浓度,可以促进细胞代谢加快和凋亡发生,并且通过AMPK/mTOR信号通路激发细胞发生自噬,上述变化的程度与血清减少的程度呈正相关。本试验为后续探索不同程度饥饿胁迫对动物肌肉发育影响的研究提供理论依据。

动物源性大肠杆菌的耐药性和氨基糖苷类耐药基因的检测

为调查不同动物源性大肠杆菌的耐药性,本试验对65株源于畜禽的大肠杆菌进行18种常见抗菌药的药敏试验,用PCR法检测3种氨基糖苷类耐药基因aac(3)-II、arm(A)和aac(6′)-Ib。结果显示:65株大肠杆菌中对氨基糖苷类药物链霉素耐药率最高(75.38%),其次为复方新诺明(69.23%),耐药率最低的是头孢哌酮舒巴坦(0%);耐药基因aac(3)-II、arm(A)和aac(6′)-Ib的检出率分别为29.23%、1.54%和9.23%;有51株分离菌株存在多重耐药,占总株数的78.46%。结果表明,动物源大肠杆菌对多种抗菌药具有耐药性,在氨基糖苷类耐药基因中以携带aac(3)-II为主。

利用改良的CRISPR/Cas9系统构建猪PPARD载体及效率检测

为了构建猪PPARD基因编辑载体并进行基因编辑效率检测,本研究利用改良的双位点编辑CRISPR/Cas9载体系统,根据PPARD基因结构和序列特点,设计2个能靶向切割PPARD基因的sgRNA序列,将2个PPARD sgRNA表达盒以串联的形式连接到一个CRISPR/Cas9载体中。将构建的质粒转染PK15细胞,提取各组细胞DNA,PCR扩增突变区域后,通过序列测定在DNA水平检测载体编辑效率。分别提取各组细胞总RNA及细胞总蛋白,利用qRT-PCR及Western blot在基因表达及蛋白表达水平上检测重组载体的基因编辑效率。结果发现,PPARD-2KO组DNA总突变率为45.83%(22/48);与正常对照组相比,PPARD基因编辑组中PPARD mRNA显著下降84%(P<0.01),PPARD蛋白表达量显著下降61%(P<0.01)。本研究利用改良的CRISPR/Cas9载体系统成功构建了高效PPARD基因编辑载体,并且未经药物筛选即可在细胞上实现高效率基因编辑,将大幅提高后续筛选单细胞克隆效率,推进对PPARD基因的功能研究。

高校实施体育课分层教学可行性调查研究

通过对体育课分层教学基本理论的阐释,并结合对高校师生的调查,研究高校实施体育课分层教学的必要性和可行性,提出体育课分层教学要贯彻"以人为本"的教育理念,立足于学生的差异,并尊重差异,促进每个学生最优发展的实施策略。

运动影像解析系统在体育领域的应用现状及发展趋势

运动影像解析系统可以精确、实时地计测出运动员动作过程中各个部位的运动曲线及关节相对转动角度,这对于教练员纠正运动员的错误技术动作、防止运动损伤和提高运动成绩,有着极其重要的意义。通过对运动影像解析系统的发展历程、现状、性能及特点、国内外系统的比较及发展趋势等方面进行论述和分析,为运动影像解析系统在体育训练中的实施提供理论依据。

混凝土材料分级加载过程的声发射特征分析

对在役混凝土结构及其构件进行健康监测、损伤诊断及灾害预警具有重大的理论意义和实践价值。为反映声发射能量与混凝土材料破坏过程之间的关系,对在单轴多级循环加载条件下的混凝土试件进行了声发射试验,记录声发射能量的变化规律。试验对象为初始孔隙率为3.3%、6.7%及9.2%的混凝土圆柱试件,分析其加载过程中的声发射能量,得到混凝土试件在弹性压密阶段、损伤稳定积累阶段以及损伤快速积累阶段时声发射能量与荷载曲线的关系,引入活跃系数Act对声发射现象发生的活跃程度进行表述,提出基于声发射能量评价混凝土工作状态的方法。当出现能量峰值出现下降后再次激增,能量均值超过100mV×ms,且活跃系数Act出现在20~70范围内连续放缓的现象时,预示着混凝土材料的破坏。

犬肘头黏液囊炎的诊治与体会

犬肘头黏液囊炎是肘头黏液囊的一种化脓性或非化脓性炎症。对临床上7例犬肘头黏液囊病例进行诊治,其中4例为一侧肘头发生黏液囊炎,3例为两侧发生。病例治疗采用保守治疗和手术治疗两种方法,一例经保守治疗治愈,6例经手术治疗治愈。现就该病的诊断要点、治疗方法的选择、术后护理应注意事项提出自己的见解,以供同行参考。

禽源大肠杆菌多重耐药机制初探

为了解禽源性大肠杆菌的多重耐药机制,对禽临床样品分离株进行了药敏试验、多重耐药调控基因soxS基因及氟喹诺酮类耐药基因检测。药敏试验结果显示,从禽临床样品分离出的12株大肠杆菌中,6株对氟喹诺酮类抗菌药物耐药,11株对氨基糖苷类抗菌药物耐药,12株对四环素类抗菌药物耐药和酰胺醇类耐药。PCR检测结果显示,12株禽源大肠杆菌均携带soxS基因,表明禽源大肠杆菌多重耐药与soxS基因关系密切。序列分析结果显示,7株大肠杆菌soxS基因无突变,4株存在点突变并导致A12S替换,2株soxS突变菌株同时携带氟喹诺酮类耐药基因qnrS。因此,12株禽源大肠杆菌具有多重耐药性,可能与soxS基因调控相关,突变株的出现增强了氟喹诺酮类的耐药性。

对28届奥运会男篮防守有球队员攻击性的比较研究

对二十八届奥运会男篮比赛小组赛中国队和与西班牙、新西兰、阿根廷、意大利和塞黑5个国家的球队的比赛录像进行分析,观察和统计与防守有球队员活动有关的指标,并将所得数据进行比较、研究,从中找出我国男篮运动员在防守有球队员活动能力方面存在的差距和问题,为提高我国篮球运动员防守能力提供理论参考。

高校体育教学中的思想品德教育新思考

面向2 1世纪,学校要培养德、智、体全面发展的高素质开拓型人才,以适应新世纪我国社会主义市场经济发展的需要.根据培养跨世纪人才的需要,本文对高校体育教学中思想品德教育作重新思考。

体育教学中纠正学生错误动作的语言分析

纠正学生的错误动作是体育教学过程中必不可少的重要组成部分,而语言的运用起着关键作用。本文通过对教学实践的总结、分析指出了教师在纠正学生错误动作过程中提高语言运用能力的必要性。提出了语言运用时应注意的事项及要求。并强调应和身体语言、示范动作相配合,以取得良好的教学效果。

三例犬股骨远端骨折的诊治

近些年来,犬发生车祸的事件呈上升态势,骨折成为犬病的一个新形势。笔者将3例因车祸而造成股骨远端骨折的病例的诊治报告如下。

波尔山羊胚胎移植受体羊难产的救助

优质良种家畜的胚胎移植会引起分娩时难产的发病率升高.徐州某种羊场2004年3月～4月份有98头波尔山羊胚胎移植受体羊分娩,有59头发生难产,难产率为60%.其中胎儿过大性难产,胎势、胎位和胎向异常性难产、子宫迟缓性难产分别占难产总数的79%,15%,6%.经过救助,有57例救助成功,成功率为96%.文章就难产临床表现、难产的诊断、难产救助时机和不同难产救助方法等方面进行报道.

由成年转基因山羊体细胞而来的克隆山羊

在已经获得的乳腺特异性表达人促红细胞生成素 (rhEPO)成年转基因山羊 (Caprahircus)的基础上 ,取其耳尖成纤维细胞和卵巢颗粒细胞 ,进行体外传代培养 ,然后将这种培养的转基因山羊的体细胞移入去核的处于第Ⅱ次减数分裂中期的卵母细胞中 ,并进行电融合 ,构建重构胚胎 ,重构胚胎在体内培养 6d ,再将发育至囊胚或桑椹胚的重构胚胎移入同步情期的寄母羊子宫内。结果 ,有 2只寄母羊妊娠并最终产下 2只成活的克隆山羊。她们分别来自同一成年母羊的耳尖成纤维细胞和卵巢颗粒细胞。克隆羊经PCR RFLP图谱分析显示 :以克隆羊组织DNA为模板的PCR产物与相应的提供体细胞的基因羊的PCR产物的酶切图谱完全一致 ;并且经PCR对外源hEPO基因检测表明 2只克隆山羊均携带hEPO外源基因。

第27届奥运会男子篮球比赛中国与国外队优秀组织后卫组织进攻能力比较研究

采用专家调查、录像统计、比较分析等方法 ,对参加第 2 7届奥运会男子篮球比赛的中国与美国、法国、立陶宛队的组织后卫在阵地进攻中组织进攻的运用情况进行统计、分析、研究 ,结果表明 :我国组织后卫与组织进攻的活动范围小 ,传球助攻能力差 ,组织各种配合的数量和成功率均低于国外优秀的组织后卫。

基于CT试验的混凝土裂纹扩展演化研究

针对混凝土宏观性能指标与破坏特性细观参数之间关系的技术难题,采用工业CT对单轴压缩条件下的混凝土试样进行了CT扫描试验;利用图像处理技术对混凝土CT图像进行分析,得到不同加载阶段混凝土孔隙和裂纹的三维细观模型及孔隙率变化规律。运用分形理论建立了CT图像分形维数计算模型,对混凝土CT图像分形特征进行了研究。结果表明:混凝土孔隙体积和分形维数的快速增大是混凝土失稳破坏的预警信息;利用混凝土CT三维重建图像结合分形理论观察研究混凝土裂纹扩展全过程,为有效分析混凝土细观损伤破坏提供了新技术。