水胺硫磷对人皮肤表皮细胞膜完整性的影响

目的 探讨新型高效有机磷农药水胺硫磷对人皮肤表皮细胞膜的影响。方法 以体外浸泡式培养的人皮肤表皮细胞为生物材料 ,以培养基中乳酸脱氢酶 (L DH)为指标 ,检测在不同染毒浓度条件下漏入培养基中的 L DH活性 ,并同时检测培养基中碱性磷酸酶 (AL P)的活性。结果 随着染毒剂量的增加 ,培养基中 L DH活性降低 ,与阳性及阴性对照组相比其差异显著 (P<0 .0 5或 P<0 .0 1)。各组培养基中的 AL P活性无显著性差异 (P>0 .0 5 )。结论 水胺硫磷对人皮肤表皮细胞无直接刺激损害 ,但对人皮肤表皮细胞中的 L DH有抑制作用。本研究提示水胺硫磷和其它大部分已广泛使用的有机磷农药一样 ,可经完整的皮肤进入机体 ,在未发生皮肤损害时就可造成机体中毒 ,因此劳动防护十分重要。

植物凝集素的主要生物学作用及应用

一、植物凝集素简介 植物凝集素(Lectin)一词,起源于拉丁语Legere。它是非免疫起源的,能与糖类结合的一类蛋白质,具有使细胞凝集和使多糖沉淀的特性,每分子的植物凝集素至少有二个能与糖结合的位点。一般而言。

1,6-二磷酸果醣对兔心肌细胞中LDH漏出和ATP含量的影响

为探讨 1,6 -二磷酸果醣 (FDP)对心肌细胞的影响 ,采用胶原酶二步灌流法将成年兔心肌细胞分离出来 ,培养于含有 2 5和 5 0mmol/LFDP的培养基中 ,分别于 0 ,4 ,8,12h取样 ,作台盼兰染色和光学显微镜上的观察 ,并对培养基中乳酸脱氢酶 (LDH)活性及心肌细胞中三磷酸腺苷 (ATP)含量进行了测定 .结果 ,在上述条件下 ,圆形细胞 (死亡的或受损后尚存活 ,但形态变圆的细胞 )的百分率一直保持恒定 .在FDP实验组 ,各时间点的LDH活性均低于对照组 .在 2 5mmol/L ,4h时 ,LDH的活性显著降低 (P <0 0 5 ) .而在 5 0mmol/L浓度 ,12h时 ,LDH活性却显著升高 (P <0 0 5 ) .在FDP低浓度为 2 5mmol/L和高浓度 5 0mmol/L时 ,与对照组相比 ,在各时间点 ,心肌细胞中ATP含量呈增加趋势 ,并在 5 0mmol/L浓度 ,8h时 ,差别显著 (P <0 0 5 ) .本研究表明 :在浸泡式培养的条件下 ,不同浓度的FDP ,在不同的接触时间 ,对兔心肌细胞膜产生不同的影响 .低浓度时 ,FDP对兔心肌细胞膜有稳定作用 ,浓度高 ,接触时间长 ,可造成心肌细胞膜通透性增高 ,进而造成心肌细胞损害 .结论 :无论将FDP用于临床医疗或科学研究中 ,根据用药目的 ,给药途径 ,方法及接触时间的不同 ,FDP的剂量可有很大差异 .因此 ,为满足使用需要 。

介绍一种成年兔心肌细胞的分离与培养方法

详细介绍了成年兔心肌细胞的分离方法 (胶原酶二步灌流法 )以及分离后的心肌细胞的培养 .根据实践经验 ,强调了灌流失败的主要原因是灌流管道末端插入过深以及胶原酶的用量不适 .同时提出在整个灌流和细胞制备过程中 ,要严格控制灌流液及胶原酶液的pH为 7 35～ 7 4 5 ,保持灌流液温度在 37℃ ,以减少细胞的损伤和死亡 .还提醒读者 。

二磷酸果糖对心脏作用及机制研究进展

二磷酸果糖 (FDP)是糖经无氧酵解途径产生的一个重要的中间代谢产物。FDP对缺血缺氧的心脏具保护作用 ,可解除某些药物和化学物质对心肌的毒性作用 ,并有益于低温保存后心脏功能的恢复。外源性FDP能透过心肌细胞膜 ,对心脏有保护作用 ,能防止心肌细胞内钾的外流 ,并与维持心肌细胞内三磷腺苷 (ATP)在较高的稳态水平有密切关系。

二磷酸果糖对低温保存兔心肌组织蛋白质的影响

目的研究二磷酸果糖(FDP)对低温保存兔心肌组织蛋白质的影响。方法兔心肌组织分别在4℃保存于含5mmol.L-1FDP或无FDP的StThomas液中,提取心肌组织蛋白质经SDS凝胶电泳比较,肽质量指纹谱质谱分析和Westernblot鉴定蛋白质分子。结果肽质量指纹谱分析鉴定到β-肌球蛋白重链、莱恩素受体(ryanodinereceptor)、α肌动蛋白、电压依赖的阴离子通道蛋白1(VDAC1)和腺苷酸激酶3等5种蛋白质差异,Westernblot鉴定到β-肌球蛋白重链、蛋白激酶Cε(PKCε)和IgG重链3种蛋白质差异。加入FDP后心肌组织中β-肌球蛋白重链、α肌动蛋白和PKCε得到更好保存。结论FDP可以增加低温保存的兔心肌组织中一些与心功能相关的重要的蛋白质的保存量,以上所述的存在差异的蛋白质,在心脏低温保存条件研究中,具有作为生物标记分子的潜在应用价值。

兔心肌细胞蛋白质中可能的PKCε直接底物的鉴定

目的 :利用PKCε酶促放射性磷酸化标记兔心肌细胞蛋白质 ,鉴定出其可能的直接底物 ,为进一步研究奠定基础 .结果 :通过PKCε特异底物竞争抑制、PKCε特异抑制剂Ro 31- 82 2 0、兔心肌细胞蛋白质热变性等分析措施 ,初步用PKCε酶促放射性磷酸化标记 ,从兔心肌细胞蛋白质中鉴定出表观分子量为 5 7kd ,35kd ,2 3kd和 2 0kd的蛋白质的磷酸化与PKCε酶活性相关 ,其中 5 7kd ,2 3kd和 2 0kd 3种蛋白质可被PKCε在体外直接磷酸化 ,并且其磷酸化不受蛋白激酶抑制剂PD980 5 9和SB2 0 35 8的影响 .结论 :5 7kd ,2 3kd和2 0kd 3种蛋白质有可能是PKCε直接底物 .

介绍一种大鼠肝细胞的分离和培养方法

介绍分离、纯化大鼠肝细胞 (用胶元酶二步灌流和Percoll不连续密度离心 )及分离后的培养 .此方法可靠易行 ,可制备出质量合格的肝细胞 (实质细胞 ) .讨论了保证分离和纯化成功的一些关键步骤、条件和原理 .提出分离肝细胞应首选胶元酶Ⅳ ,Percoll的渗透压和pH也是影响肝细胞的漂浮密度和存活能力的因素 .

支气管肺泡灌洗技术及其应用

一、引言自六十年代以来,支气管肺泡灌洗技术不断得到应用和发展。国内外学者应用该技术来检测工业毒物对肺部的损害。

高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞的直接刺激损害

目的探讨高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞的直接刺激损害。方法以体外浸泡式培养的人皮肤表皮细胞为生物材料,以培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性为指标,检测了在不同染毒浓度条件下培养基中的LDH活性,并进行了电镜观察。结果随着染毒剂量的增加,培养基中LDH活性升高,与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01);与阳性对照组相比,差异亦有统计学意义(P<0.01);电镜观察显示,在低浓度条件下,细胞虽可保持结构完整,但表面的绒毛状突起减少,少数细胞胞核内出现空泡(水肿),细胞受到轻微损害。随染毒剂量增加,细胞胞膜破裂,细胞核溶解呈空泡状,乃至细胞大量坏死。结论高效氯氰菊酯对人皮肤表皮细胞有直接刺激损害作用,在一定条件下,可损害皮肤屏障,使其更易被吸收,造成机体中毒,应特别注意劳动防护。

二甲亚砜对人表皮的核酸和蛋白质合成的影响

用体外培养的人的伪表皮作为模型，进行药物毒理学作用的研究，观察了二甲亚砜（ＤＭＳＯ）在不同浓度和不同接触时间条件下，对人的伪表皮细胞脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）、核糖核酸（ＲＮＡ）和蛋白质合成的影响：随着接触时间的延长，ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质合成均受抑制。低浓度条件下（１％），ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质合成增加；在１５～５０％浓度下，ＤＮＡ和蛋白质合成抑制，而ＲＮＡ合成仍增加；在高浓度条件下（７０％～１００％），ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白质合成均明显抑制。

用家用数码照相机直接经显微镜目镜摄取高质量的数码图像

在生物学和医学的科研、教学中，往往需要使用生物显微镜和解剖镜。而与之相配套的照相装置，是保存、发表和教学展示光学显微图像的必备设备。一般的显微照相装置需要配有专用的光学适配装置，用于特定型号的显微镜，拥有成套设备的成本较高。本文探讨了使用普通家用数码照相机直接经生物显微镜目镜，摄取高质量、高分辨率数码光学显微图像的可行性和影响因素。

三种化学物对人皮肤细胞中三种酶漏出的影响

应用已知对皮肤有直接刺激作用的三种化学物溶液:70%二甲亚砜(DMSO)、20%苯甲酸(BA)和1%十二烷革磺酸钠(SDS)作用于体外液气界面原代培养的人的表皮细胞,探讨它们对细胞中乳酸脱氢酶(LDH)、谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)漏出的影响。结果表明,它们均使LDH从细胞内漏出,培养基中该酶活性显著升高。提示,培养基中LDH活性升高,可作为化学物质对皮肤表皮细胞有直接刺激作用、细胞膜受损的指标之一。