前列腺特异膜抗原mRNA检测方法的建立及应用

目的 建立前列腺特异膜抗原 (PSM)mRNA检测方法。方法 利用异硫氰酸胍 /酚 /氯仿 /异戊醇一步法从前列腺癌患者外周血有核细胞或前列腺癌组织中提取总RNA ,进行RT PCR扩增。结果 在PCR反应体系中投入相当于 1～ 1 0 0个癌细胞所含总RNA量时 ,均能得到清晰的 2 6 2bp的产物带。结论 本法有很高的稳定性和灵敏度。临床应用有助于早期发现前列腺癌转移。

CD95、Bcl-2和TGF-α表达在慢性肾衰及血液透析患者的临床应用

目的:分析慢性肾功能衰竭患者及血液透析前后CD95抗原(Fas)、抗细胞凋亡因子(Bcl-2)蛋白及转化生长因子-α(TGF-α)含量变化及相互关系。方法:采用流式细胞术及放射免疫分析,分别测定患者血液透析(HD)前后外周血单个核细胞中CD95、Bcl-2阳性细胞数及血清转化生长因子-α的表达。结果:透析组、非透析组CD95明显高于对照组。Bcl-2与TGF-α含量均明显低于对照组(P<0.01)。HD后CD95表达明显高于HD前(P<0.05),Bcl-2蛋白在HD前后无显著性差异(P>0.05)。结论:CD95、Bcl-2及TGF-α表达在慢性肾功能衰竭及血液透析过程中起重要作用。

糖尿病视网膜病变VEGF,IFN-γ及NO测定的临床价值

目的 观察细胞生长因子与一氧化氮在Ⅱ型糖尿病 (DM )视网膜病变 (DR)发病中的作用。方法 采用酶联免疫吸附法和分光光度法检测 74例DM患者血管内皮生长因子 (VEGF)、γ 干扰素 (IFN γ)和一氧化氮 (ON)的血浆含量 ,同时以 30例健康人作为对照。结果 ①DM无眼底病变组 (NDR)与视网膜病变组 (DR)血浆VEGF ,IFN γ和NO含量均较对照组明显增高 (P <0 .0 5 ;P <0 .0 5 ;P <0 .0 1)。②DR组VEGF含量明显高于NDR组 (P <0 .0 5 )而IFN γ和NO含量明显低于NDR组 (P <0 .0 1;P <0 .0 5 )。③NDR组VEGF与NO含量呈直线正相关 (γ =0 .30 ;P <0 .0 5 ) ,其他各组均无相关性。结论 VEGF与INF γ过度表达在DM视网膜病变中起重要作用 ,NO代谢紊乱是导致DR发生中进展性微血管病变的重要因素。

TGF-α、IGF-Ⅱ、NPY、NT在慢性肾功能衰竭患者血液透析中的检测及意义

为了探讨慢性肾功能衰竭患者（ＣＲＦ）血液透析过程中ＴＣＦ－α、ＩＧＦ－Ⅱ、ＮＰＹ、ＮＴ的水平及其作用机理，我们采用放射免疫分析技术对４５例维持性血液透析前后的患者进行了上述四项指标检测。结果显示，ＣＲＦ患者在血液透析过程中，透析膜等因素可激活单个核细胞，使产生ＴＣＦ－α和ＩＧＦ－Ⅱ增高，并且患者存在ＮＰＹ与ＮＴ分泌异常，ＮＰＹ、ＮＴ作为体内的重要神经递质，参与了患者疾病及并发高血压的病理生理过程。

血浆与血小板中NPY、NT在慢性肾功能衰竭患者血液透析中的变化及意义

采用RIA法检测40例慢性肾功能衰竭(CRF)患者血液透析(以下简称血透)过程中,血浆和血小板中神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)的含量变化及其临床意义。并以30例健康人作为对照。结果显示,①CRF患者血透前血浆NPY、NT含量分别为432.34±52.27ng/L、138.44±80.35ng/L;血透后分别为324.52±48.16ng/L、211.6±124.69ng/L。②CRF患者血透前血小板中NPY、NT含量分别为34.86±18.82ng/L、41.12±24.12ng/L;血透后分别为66.97±21.81ng/L、14.89±12.56ng/L。结果表明,CRF患者存在NPY及NT分泌异常。NPY与NT作为体内重要的神经递质,参与了肾脏病及其并发高血压的病理生理过程。

银屑病患者NPY、NT、TNF、HA及LN检测的临床意义

本文对35例银屑病患者进行了神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)、肿瘤坏死因子(TNF)、透明质酸(HA)和层粘连蛋白(LN)测定,以探讨NPY、NT在银屑病时对血管的作用从细胞因子与细胞外间质成份在银屑病中的变化及作用机制。

糖尿病视网膜病变患者VEGF和IFN-γ及NO检测的临床价值

目的观察细胞生长因子与一氧化氮在2型糖尿病(DM)视网膜病变(DR)发病中的作用。方法采用酶联免疫吸附法和分光光度法检测74例DM患者血管内皮生长因子(VEGF)、γ-干扰素(IFN-γ)和一氧化氮(ON)的血浆含量,同时以30例健康人作为对照。结果①DM无眼底病变组(NDR)与视网膜病变组(DR)血浆VEGF、IFN-γ和NO含量均较对照组明显增高(P<0.05,P<0.05,P<0.01);②DR组VEGF含量明显高于NDR组(P<0.05),而IFN-γ和NO含量明显低于NDR组(P<0.01,P<0.05);③NDR组VEGF与NO含量呈直线正相关(r=0.30,P<0.05),其他各组均无相关性。结论VEGF与INF-γ过度表达在DM视网膜病变中起重要作用,NO代谢紊乱是导致DR发生中进展性微血管病变的重要因素。

第16、18型人乳头瘤病毒试剂盒的建立及应用研究

人乳头瘤病毒(HPV)是感染人上皮细胞,并引起多种上皮赘生物的一类病毒。研究发现HPV共有60余型,其中大部分并不导致或极少导致恶性肿瘤,只有HPV6、11、16、18、33等十余型与生殖泌尿系统的上皮性恶性肿瘤有关,其中90％以上的恶性肿瘤与HPV16、18型有关。我们用计算机技术设计合成了位于E6/

慢性肾功能衰竭患者血液透析前后多项放射免疫指标观察

血液透析(HD)技术已广泛用于各种病因的急、慢性肾功衰竭和某些药物、毒物中毒的治疗。由于复杂的因素，慢性肾功能衰竭(CRF)HD患者内分泌系统常有异常变化。因此，我们采用放射免疫分析(RIA)，观察了115例CRF患者HD前后的血清心钠素(ANP)，醛固酮(AId)、胰岛素(INS)、

慢性肾衰患者血液透析前后NPY、NT水平变化及意义

神经肽Y(NPY)作为一种神经递质对心血管起调节作用,可引起持久的平滑肌收缩。而神经降压素(NT)对心血管的作用主要是使血管扩张和降低血压增加血管通透性。我们对慢性肾衰血液透析(HD)患者进行了NPY、NT检测,以探讨慢性肾衰患者血液透析前后的含量变化及与肾脏疾病的关系。 材料和方法 一、病例资料,HD患者30例(男18,女12)。年龄34～62岁,平均43.5岁。均来自本院血液透析中心。对照组33例(男21,女12);

静脉血中微量肝癌细胞的检测方法

用聚合酶链反应法检测肝细胞癌病人静脉血中微量癌细胞，设计了两对特异引物，ＰＣＲ反应后出现与已知序列相符的１０１ｂｐ条带，并用Ｐｓｔｌ限制性内切酶消化确认其特异性。套式ＰＣＲ灵敏度达０．０１ｆｇ重组ＤＮＡ，在５ｍｌ静脉血中有１～１０个癌细胞即可识别，且重复性好。该方法可广泛地用于肝癌的早期诊断及转移机制的基础研究。

肺癌及胸腔积液患者粘连蛋白、IL-8测定临床意义

用ＥＬＩＳＡ法分别测定了肺癌患者血清粘连蛋白及结核性胸腔积液ＩＬ－８含量。结果粘连蛋白水平肺癌患者为２０５６±５６４μｇ／Ｌ，结核性胸腔积液患者为１８０５±６０４μｇ／Ｌ，均较正常人的１３０２±５１２μｇ／Ｌ显著升高（Ｐ＜００１，００５）。且血清粘连蛋白水平随肺癌程度的加重而升高，可作为反应肺癌病情的一项指标。结核性胸腔积液患者ＩＬ－８含量为４３４±７６０μｇ／Ｌ，明显高于癌性胸腔积液患者０９１±０６８μｇ／Ｌ（Ｐ＜００５），表明测定胸腔积液ＩＬ－８水平有助于结核性胸腔积液和癌性胸腔积液的鉴别诊断。

慢性肾功能衰竭血液透析前后血清TGF-α和IGF-Ⅱ水平变化

目的探讨慢性肾功能衰竭患者血液透析前后TG F-α和IG F-Ⅱ含量变化与血液透析的关系。方法采用放射免疫分析法,检测45例慢性肾功能衰竭血液透析患者和30名正常人TGF-α和IG F-Ⅱ水平,并进行相关分析。结果患者血清TG F-α含量显著低于正常对照组(P<0.01),而透析后显著高于透析前(P<0.01);IG F-Ⅱ含量显著高于正常对照组(P<0.01),而透析前后无显著性差异(P>0.05)。患者12h尿液中TG F-α和IGF-Ⅱ含量均显著高于正常对照组(P<0.01和P<0.05)。结论TGF-α和IGF-Ⅱ两种多肽生长因子参与了机体自稳功能的调节,在慢性肾功能衰竭患者血液透析过程中,TG F-α和IGF-Ⅱ水平变化起着重要的病理生理作用。

β淀粉样蛋白在老年性痴呆和缺血性脑血管病中的表达及意义

目的探讨血清β淀粉样蛋白(β-AP)在Alzheimer病(AD)、血管性痴呆(VD)和缺血性脑血管病(ICVD)发病中的作用。方法采用放射免疫分析法检测临床诊断为AD患者8例,VD患者15例及63例不同类型ICVD患者血清β-AP含量,以38例正常人作对照。结果AD与VD组β-AP血清含量明显高于ICVD组(P<0.05)和对照组(P<0.01)。ICVD组β-AP含量明显高于对照组(P<0.05)。其中以脑梗塞后遗症组和椎基底动脉供血不足(VBI)增高显著(均P<0.05)。其他各组与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论β-AP是AD和VD发病的危险因素;β-AP在ICVD患者中过度表达与VD发生密切相关。

PSMmRNA检测方法的建立

目的：建立前列腺特异膜抗原（PSM）检测方法。方法：利用异硫氰酸胍/酚/氯仿/异戊醇一步法从前列腺癌患者外周血有核细胞或前列腺癌组织中提取总RNA。用AMV逆转录合成PSMcDNA后进行巢式PCR扩增。并对试验中各种因素进行了严格地筛选和调整，找出了最佳反应条件。结果：在PCR反应体系中投入总RNA量相当于1-100个癌细胞所含总RNA量时，均能得到清晰的262bp的产物带。结论：本方法具有良好的稳定性和极高的灵敏度。为早期预示前列腺癌转移、复发和疗效观察提供了技术手段。

转化生长因子α测定在血液透析患者中的应用

采用放射免疫分析法，对45例维持性血液透析患者血清及12h尿液进行转化生长因于α（TGF－α）测定。以30例健康人作为正常对照组。结果显示，与对照组比较，血液透析前，患者TGF－α含量显著降低（P＜0．01）。血液透析后又显著高于血液透析前的含量（P＜0．01）。而患者12h尿液中TGF－α含量明显高于对照组（P＜0．05）。说明慢性肾功能衰竭患者在血液透析过程中，可激活单核细胞，致使TGF－α增高。

缺血性脑血管病患者血浆和血小板提取液神经肽Y与神经降压素的改变

目的和方法：采用放射免疫分析法，观察５８ 例不同病因的缺血性脑血管病（ＩＣＶＤ） 患者血小板提取液和血浆中神经肽Ｙ（ＮＰＹ） 与神经降压素（ＮＴ） 的含量变化。结果：在ＩＣＶＤ 患者血小板提取液中ＮＰＹ 含量明显低于对照组，血浆中ＮＰＹ 则明显高于对照组。血小板中ＮＰＹ 减少与血浆浓度的增高呈明显负相关（ ｒ ＝ － ０ ．６０ ， Ｐ＜ ０ ．０１） 。ＮＴ 含量在患者血小板液中显著增高。结论：ＮＰＹ 与ＮＴ 在ＩＣＶＤ 病理过程中，由血小板大量释放并积极参与了以缩血管效应为主的病理反应，是造成血栓形成。

VEGF、IFN-γ及NO与糖尿病视网膜病变关系的研究

目的 探讨细胞生长因子与一氧化氮在 2型糖尿病 (DM)视网膜病变 (DR)发病中的作用。方法 应用竞争性亲和素 -生物素酶联免疫吸附法和分光光度法检测 74例 DM患者血管内皮生长因子 (VEGF)、γ干扰素 (IFN- γ)和一氧化氮 (NO)的血浆含量 ,分析它们与糖化血红蛋白 (GHb A1c)、空腹血糖 (FBG)、肌酐 (Cr)的关系 ,同时以 30例健康人作为对照。结果 (1) DM无眼底病变组 (NDR)血浆 VEGF、IFN- γ和 NO含量均较健康人明显增高 (P<0 .0 5 ;P<0 .0 5 ;P<0 .0 1)。 (2 )背景型 DR组 VEGF含量明显高于 NDR组而 IFN- γ含量明显低于 NDR组 (P<0 .0 5 ;P<0 .0 1)。 (3)增生性 DR组 VEGF、IFN- γ和 NO含量均较 BDR组明显降低 (P<0 .0 5 ;P<0 .0 1;P<0 .0 1) ,NDR组 VEGF与 NO含量呈直线正相关 (r=0 .30 ;P<0 .0 5 ) ,其它各组均无相关性。结论 VEGF过度表达及 IFN- γ、NO进行性减少在 DR新生血管的发生发展中起重要作用 ,其代谢紊乱是导致 DR发生中进展性微血管病变的重要因素。

骨代谢指标与老年男性骨质疏松症关系的研究

目的 探讨与老年男性骨质疏松症发生有关的骨代谢指标变化特点及意义。方法 采用放射免疫分析法对 5 8例老年男性骨质疏松和 37例骨量减少患者进行血清白细胞介素 1β(IL 1β)、类胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF Ⅱ )、甲状旁腺素中段 (PTH M)和 2 5 羟基维生素D(2 5 OH D)的含量和骨密度检测 ,同时与青中年和老年健康人进行比较。结果 老年男性骨质疏松和骨量减少患者IL 1β和PTH M水平不同程度高于不同年龄对照组 ,而IGF Ⅱ和 2 5 OH D水平则低于对照组 ,尤以骨质疏松组降低明显 (P <0 .0 1)。随着年龄增长和病情加重 ,两组患者骨密度均明显低于青中年对照组 (P <0 .0 1)。老年男性骨质疏松组骨密度明显低于骨量减少组 (P <0 .0 5 )。结论 细胞因子等骨代谢指标紊乱是造成老年男性骨质疏松症的重要因素。