血液净化技术在多器官功能障碍综合征中的器官支持作用

目的:探讨血液净化技术(BP)对小儿多器官功能障碍综合征(MODS)的多器官支持治疗作用。方法:比较本院PICU16例危重患儿实施BP治疗后各器官的功能。结果:体温、心率、呼吸频率、全血白细胞计数、ESR和CRP各项临床常用炎症指标在BP治疗后均显著下降(P<0.001);BP治疗前后肾功能指标(血肌酐、BUN、尿量)、心肌酶谱(ALT、CK、CK-MB、LDH)、肝功能指标(总胆红素、白蛋白)、血气分析指标(pH、PaO2、PaO2/FiO2)均明显好转(P<0.05);BP治疗前后机械通气参数(PIP、PEEP)无明显改变(P>0.05),但Vt上升,P<0.05。结论:血液净化技术对小儿MODS不但有肾代替作用,而且有呼吸、循环、肝、酸碱和电解质内环境的平衡等多器官支持、治疗作用。

PCR技术在儿科结核病诊断中存在的问题

目的：观察多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术在结核病临床诊断上的应用以及存在的问题。方法：２２例结核病符合临床诊断标准，５０例对照组，应用ＰＣＲ技术，经凝胶电泳法检测结果。结果：血样本ＴＢＤＮＡＰＣＲ的阳性率为结核组１８１８％，对照组３６００％，敏感度１８１８％，特异性６４００％，假阳性３６００％，假阴性８１８２％。１８例结核病未经抗结核治疗予复查，仅８例阳性，占４４４４％。结论：应用定性ＰＣＲ技术检测结核血标本的敏感度低，其较高的假阳性和假阴性结果应引起注意。ＰＣＲ技术在结核病诊断上的应用尚要解决取样、操作技术、判断结果的标准化和量化问题。在诊断结核病时不能脱离流行病学，临床表现，影像学，病原学和血清学。

小儿急性肺损伤的呼吸功能与炎症的研究

目的:探讨儿科急性肺损伤(ALI)的病理生理和发病机制。方法:比较小儿ALI与呼吸功能正常儿的呼吸功能与炎症因子的变化。结果:(1)ALI患儿血气分析显示氧合或通气功能不同程度的恶化。氧合功能(PaO2/FiO2)下降有47例;指标PaCO2上升有27例。(2)机械通气所需气道峰压(PIP)和呼气末正压(PEEP)呈不同程度的上升,PIP上升26例,ALI患儿与呼吸功能正常儿为(28.62±6.38)cmH2O比(20.90±3.60)cmH2O,P<0.05;PEEP为(5.0±1.6)cmH2O比(2.0±0.6)cmH2O,P<0.01。(3)ALI患儿血清TNF-α较正常对照组升高,分别为(32.60±8.62)pg/mL和(8.54±3.04)pg/mL,P<0.001。结论:(1)ALI的肺病理生理变化特点除氧合功能下降或肺泡有效通气减少外,还有小气道阻力升高;(2)全身炎症反应可能参与小儿ALI。

血清心肌酶与心电图在儿科非原发性心脏疾病中配合应用的临床问题

目的 探讨心肌酶谱与心电图在儿科非原发性心脏疾病中配合应用、反映心肌状态的临床问题。方法 排除原发性心脏疾患后 ,12 5例患儿做全导联EKG检查、心功酶CPK和同功酶CK -MB测定。结果 以EKG作因变量 ,CPK、CK -MB及发病年龄作自变量 ,经过逐步回归 ,均不能进入回归方程 ;CPK与CK -MB作直线相关分析 ,相关系数R :0 43 ,P <0 0 0 1。结论 发生病理心电改变时 ,心肌酶学未必发生改变 ;相反 ,当未发生病理心电改变时 ,部分非原发性心脏疾病患儿的心肌酶学已经发生变化 ,即EKG与心肌酶学在疾病过程中存在不同的变化时相 ;CPK与CK -MB升高的相关性一致 ,但他们的相关程度也不紧密 。

四逆汤对SIRS大鼠的早期干预

目的:通过复制大鼠系统性炎症反应综合征(SIRS)模型,研究四逆汤对MODS的防治作用。方法:建立大鼠二次打击SIRS模型,SD大鼠70只,随机分成模型对照组30只,四逆汤模型治疗组30只,正常对照组10只。治疗组大鼠在一次打击后给予四逆汤灌胃,模型对照组按相同溶液体重剂量、时点灌蒸馏水。在模型建立后的1、3、5 d分别活杀大鼠。剖开胸腔,暴露心脏,快速抽取主动脉血做血气分析和有关酶学指标的检测,ELISA法测定血浆TNF-α、IL-6的含量。结果:治疗1 d组TNF-α为(35.0±14.9)ng/L,IL-6为(96.3±29.0)ng/L;5d组TNF-α为(20.9±13.7)ng/L,IL-6为(48.7±40.0)ng/L;四逆汤中药方剂能够下调实验大鼠血浆TNF-α和IL-6水平(P<0.05)。结论:四逆汤中药方剂起到抑制炎症、有效改善SIRS、MODS大鼠的各项生理生化指标、防治MODS的目的,为四逆汤防治MODS提供了实验依据。

四逆汤对多器官功能障碍综合征大鼠炎症介质和氧化应激的影响

目的建立大鼠多器官功能障碍综合征(MODS)模型,观察四逆汤(SND)对MODS大鼠炎症介质和氧化应激的影响,探讨SND对MODS器官损伤的保护作用。方法通过可逆性失血性休克以及静脉注射脂多糖两次打击以建立大鼠MODS模型,将大鼠随机分为空白对照组、MODS模型组和SND治疗组。采用常规病理检查,快速抽取主动脉血作血气分析和心、肝、肾功能有关酶学指标的检测,测定血清SOD、NO含量,以及ELISA法测定血清TNF-α和IL-6的含量。结果病理检查显示模型组大鼠造模1 d后各重要脏器都有全身炎症反应综合征表现,3 d后更明显,而SND治疗组病变明显减轻;心、肝、肾功能生化指标在模型组明显升高(P<0.01),而治疗组较模型组有显著改善(P<0.05或P<0.01);与空白对照组比较,模型组大鼠血清SOD水平显著下降而NO水平显著升高,而治疗组除灌胃1 d后血清NO水平仍显著高于空白对照组(P<0.05)外,血清SOD和NO水平与对照组相比无显著差异;模型组和治疗组大鼠血清TNFα-和IL-6含量与空白对照组比较显著升高(P<0.05或P<0.01),且治疗组大鼠治疗3 d后血清TNF-α含量显著低于相应时间的模型组(P<0.05),治疗组大鼠治疗1 d后血清IL-6含量亦显著低于模型组(P<0.05)。结论四逆汤能有效防治MODS的发生和发展,其机制可能与其下调过度的炎症反应、提高机体的抗氧化能力以及减轻自由基损伤有关。

2005-2006年广州地区儿童甲型流行性感冒病毒感染情况

目的了解2005-2006年广州地区儿童甲型流行性感冒(流感)发病情况。方法取2005年1月1日-2006年12月31日广州地区临床疑诊病毒性上呼吸道感染患儿的咽分泌物,接种到狗肾细胞(MDCK),33℃温箱培养后取上清液进行血凝试验及流感病毒分型鉴定,检测到流感病毒A型抗原阳性572例,应用SPSS14.0软件,采用χ2检验对572例抗原阳性患儿不同年龄、性别及季节发病率及并发症发生情况进行统计学分析。结果检测到甲型流感患儿572例中,1d^7岁占总病例数的87.59%,且并发症发生率随年龄增长而下降。男68.88%,女31.12%,男女并发症发生率分别为50.25%和51.12%,二者比较差异无统计学意义(χ2=0.037P=0.847)。3-8月份病例占79.72%,11-12月份占11.19%,10月份有13例。春(3-5月份)、夏(6-8月份)、秋(9-11月份)、冬(12-2月份)四季并发症发生率分别为53.60%、54.85%、33.90%、37.29%。春季和夏季(χ2=0.072P=0.789)、秋季和冬季(χ2=0.277P=0.599)比较差异均无统计学意义;春季和秋季(χ2=7.411P=0.006)、春季和冬季(χ2=4.181P=0.041)、夏季和秋季(χ2=8.057P=0.005)、夏季和冬季(χ2=4.724P=0.030)比较差异均有统计学意义。结论2005-2006年广州地区儿童甲型流感发病1d^7岁是高峰年龄段,且随年龄增长并发症发生率下降。男性患儿病例数多于女性,但并发症发病率无性别差异。3-8月份是发病高峰季节,其次是11-12月份,10月份也有散发病例,春夏季节流感并发症发生率较秋冬季节高。

注意缺陷多动障碍儿童认知特征的研究

为探讨注意缺陷多动障碍（ＡＤＨＤ儿童的认知特征，用Ｃ－ＷＩＳＣ分别对１００名ＡＤＨＤ 儿童和５５名正常 儿童进行测试比较；分别对ＡＤＨＤ儿童和正常儿童各19名进行ERP检测。结果显示：①C-WISC中ADHD组的FIQ、 ＶＩＱ、ＰＩＱ、知识、领悟、填图、图片排列、图形拼凑和编码得分均较对照组明显低，差异有统计学意义，而且 ＡＤＨＤ组 ＶＩＱ 与 ＰＩＱ分离者比率明显较对照组高；②ＡＤＨＤ儿童的 ＥＲＰ的 Ｎ２００和 Ｐ３００ＰＬ均较对照组显著延长，而 Ｐ３００ Ａｍp则与 对照组无显著性差异。提示：ＡＤＨＤ儿童存在一定程度的认知功能障碍。

危重病患儿口服庆大霉素血药质量浓度监测的意义

目的 了解危重病患儿口服庆大霉素后肠道吸收情况。方法对ICU住院的41例危重病患儿[多器官功能障碍综合征（MDDS）组21例与非MODS组20例]口服庆大霉素进行肠道净化治疗，疗程3～7d，剂量10mg／（kg·d），分3次口服（部分病人经胃管饲入），1次／8h。治疗3d后、d4在给药后1h抽血，监测庆大霉素血药质量浓度。结果36例为阴性结果，5例（MODS组4例，非MODS组1例）存在消化道出血的患儿在d4服药1h后血清中检测出庆大霉素。口服庆大霉素后肠道的吸收与MODS的发生无关，胃肠道溃疡和庆大霉素血药质量浓度间有显著意义（P〈0．01）。结论危重病患儿口服庆大霉素进行肠道净化治疗是安全的，但对有胃肠道应激出血严重、且并肝肾功能不全的病人，最好能作血药质量浓度检测。

金黄色葡萄球菌肠毒素B基因在大肠杆菌中的克隆及表达

目的扩增金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)基因,构建其原核表达载体,并进行诱导、表达,为其应用研究奠定基础。方法根据GenBank中SEB的基因序列,设计一对分别含BamHⅠ、XhoⅠ酶切位点的特异性引物,以金黄色葡萄球菌基因组DNA为模板进行PCR扩增后,经BamHⅠ、XhoⅠ双酶切,并与做相应酶切的pET-28α(+)连接,转化大肠杆菌BL21,提取质粒进行双酶切鉴定及测序,用IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot印迹鉴定表达产物。结果成功扩增出SEB基因,基因大小为801bp,重组PET-28α(+)-SEB双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示SEB在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99%。经IPTG诱导后,pET-28α(+)-SEB/BL21在相应的相对分子质量(35×103)可见融合蛋白以包涵体形式表达,免疫印迹在相应分子量检测到目的蛋白。结论克隆了SEB基因,并成功在大肠杆菌BL21中以包涵体形式表达,为肠毒素B应用研究奠定了基础。

监护室中脓毒症患儿血乳酸监测的临床意义

目的:评估脓毒症患儿早期血乳酸水平与病情严重程度及预后的关系。方法:对监护室收治的56例脓毒症患儿进行回顾性的分析,将患儿分为死亡组和存活组。根据小儿死亡危险评分(PRISM评分)评定56例患儿严重程度,同时观察两组患儿入监护室时、治疗24h血乳酸的变化,血乳酸与PRISM评分、患儿预后的关系。结果:56例患儿分存活组37例(66.1%)、死亡组19例(33.9%);入监护室时死亡组血乳酸及PRISM评分明显高于存活组,差异有显著性(P<0.05);两组血乳酸值与PRISM评分显著正相关(r=0.314,P<0.05)。治疗24h时存活组血乳酸水平、PRISM评分下降,分别为(2.3±0.6)mmol/L、13.4±3.2,死亡组血乳酸水平、PRISM评分升高,分别为(7.3±4.4)mmol/L、29.6±4.5,两组血乳酸水平、PRISM评分差异有显著性(P<0.05)。结论:早期动态监测乳酸是判断脓毒症患儿的危重程度及预后的良好方法之一,且简便易行。

小儿急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征肺功能变化的临床研究

目的:了解小儿急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)肺功能的变化。方法:20例符合ALI/ARDS诊断标准的机械通气病人作为肺损伤组(ALI组),同期机械通气而无肺损伤病人20例作为对照组(NALI组)。入选同时记录病人的临床资料及呼吸机参数、血气指标。结果:本研究40例全身炎症反应综合征(SIRS)病人中合并多器官功能不全综合征(MODS)10例(25.0%),其中ALI组7例(7/40,占病人的17.5%),NALI组3例(3/40,占病人的7.5%),本组病人死亡7例(占17.5%),其中ALI组死亡5例(占12.5%),NALI组死亡2例(占5.0%),所有死亡病例均并发MODS。ALI组肺顺应性(Cst)、氧合指数(PaO2/FiO2)与NALI组比较明显降低,而肺内分流(Qs/Qt)明显高于NALI组(P<0.01)。发生ALI的病人机械通气参数吸气峰压(PIP)、平均气道压(Pmean)、呼气末正压(PEEP)明显增高,与NALI组比较差异有显著性(P<0.01)。结论:对小儿SIRS/MODS早期监测肺功能的改变,早期诊断和及时干预ALI,阻止MODS的发生、进展,对降低危重儿死亡率有重要意义。

危重患儿应激性高血糖与肝脏功能的相关性

目的分析危重患儿应激性高血糖水平变化趋势与肝脏功能变化的时相关系,探讨儿科危重症应激性高血糖时肝脏对血糖的调控机制。方法按照前瞻性对照研究原则,选择符合入选标准的危重患儿63例,根据入室当天的血糖水平分为高血糖组(53例)及正常血糖组(10例)。动态监测血糖、肝功能(ALT、AST、LDH、TG、TC、HDL、VDL)水平。结果应激性高血糖患儿应激3 d时AST及VDL与高血糖相关,而TG与高血糖水平相关。研究病例中死亡8例,均为高血糖组感染性疾病患儿,病死率12.7%;存活与死亡(观察时点仍生存时)的血糖水平差异有统计学意义(P=0.000)。结论危重患儿出现应激性高血糖可能为死亡危险因素;应激发生后需要注意保护肝脏功能,维持足够的能量代谢,平衡机体的代谢稳态,同时需防止应激后继发感染与并发症的发生,促进危重患儿的良好转归。

超滤对婴儿先天性心脏病体外循环手术后肺功能的影响

目的了解婴儿先天性心脏病(简称先心病)合并肺动脉高压体外循环手术前后肺功能的变化及应用超滤对这种变化的影响。方法选择20例进行体外循环手术的室间隔缺损合并肺动脉高压的患儿,在手术中随机将患儿分为两组。超滤组在手术过程中进行超滤,对照组在手术过程中不超滤。观察两组患儿手术前后肺功能变化的异同。结果两组患儿术后3h呼吸指数比术前明显上升,差异均有显著性(P<0.05);术后6h与术后3h变化不大;超滤组术后3h和术后6h肺气道阻力、呼吸指数较对照组明显减低,而肺静态顺应性则较对照组明显升高,差异均有显著性(P<0.05)。结论超滤在婴儿先心病合并肺动脉高压体外循环手术中的应用能保护肺功能。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌CHIPS基因的克隆、序列分析及原核表达

目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)趋化抑制蛋白(CHIPS)进行扩增、克隆、序列分析、原核表达及纯化,为后续的疫苗研究奠定基础。方法根据GenBank中趋化抑制蛋白(CHIPS)的序列,设计一对特异性引物,以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA为模板PCR扩增CHIPS基因,纯化DNA进行EcoRI、XhoI双酶切鉴定及测序鉴定,并将CHIPS亚克隆入表达载体PET-28α,转化感受态大肠杆菌BL21,对质粒进行双酶切鉴定及基因序列分析,用IPTG诱导表达重组蛋白,His标签单克隆抗体进行免疫印迹验证重组蛋白的表达。结果以金黄色葡萄球菌临床儿童分离株基因组为模板,成功扩增CHIPS基因,基因大小为450bp;重组PET-28a(+)-CHIPS双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示CHIPS在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99.98%。经IPTG诱导后,pET-28a(+)-CHIPS/BL21在相应分子量(17kDa)可见融合蛋白在上清表达,免疫印迹检测到目的蛋白。结论成功从儿童分离株MRSA中构建了CHIPS的原核表达系统,并成功在大肠杆菌BL21中融合表达,为后续的疫苗研究奠定基础。

婴儿颅内出血与髓鞘碱性蛋白的关系

目的：检测颅内出血患儿脑脊液和血清髓鞘碱性蛋白（ＭＢＰ）的含量，探讨本病脑损害和ＭＢＰ含量变化的关系。方法：采用简易 ＭＢＰ ＥＬＩＳＡ法对３８例脑实质（或伴腔室）出血及腔室内（硬膜下腔、蛛网膜下腔、脑室）出血患儿脑脊液和血清标本作 ＭＢＰ定量测定，与对照组比较，并于治疗 ４－５周后复查对比。结果：两出血组脑脊液和血清 ＭＢＰ的含量明显高于对照组（Ｐ均＜０．０１），有脑实质出血组脑脊液和血清 ＭＢＰ含量亦高于腔室内出血组（Ｐ＜０．０１），治疗后ＭＢ Ｐ含量未见下降。结论：脑脊液和血清ＭＢＰ定量测定作为生化方面的指标丰富了本病诊断的实验室检查内容，有助于本病的预后评估。